1.2.2作用适宜PH值：临床中许多药物的疗效很大程度上受到溶剂PH的影响。药物的作用可能因为溶剂PH值的改变而加强或减弱，即药物的作用强弱存在最适宜的PH值。当然这类药物的试纸片也很容易受到培养基PH值的影响。如：氨基糖苷类[3]在弱碱情况下抗菌作用稍有增强；而呋喃托因和呋喃坦啶在酸性条件下比碱性条件下杀菌作用强（PH5时比PH8时分别强100倍、800倍）。

1.2.3药物有效部位：有些药物的抗菌作用是不能通过体外药敏试验来判断的，如：乌洛托品、部分中药提取物（穿心莲内酯）等，这些药物在体外一般没有抗菌作用或抗菌作用相当低，它们只有在体内进一步分解（或转化）后才能表现出抗菌作用，所以检测这类药物的抗菌作用是不能通过抑菌环大小来判断的。这类药物还有：鞣酸黄连素、金荞麦等。

1.2.4离子的影响：常用的许多药物可以受到各种离子的影响而导致抗菌作用降低甚至丧失。如：喹诺酮类药物、氨基糖苷类、土霉素、金霉素、妥布霉素、泰乐菌素等药物在Ca2+、Mg2+、Al3+等阳离子的作用下（一般是形成不溶性络合物）抗菌作用降低或丧失；许多重金属离子（铜、锌、汞）等可以破坏青霉素钠(或钾)的活性，使其抗菌作用降低。在药敏试验培养基中如果含有大量这些阳离子就可以直接导致以上药物的抑菌环（带）减小甚至消失，所以在进行药物敏感性试验时应该选用无离子水和高质量的营养琼脂。

1.2.5其他因素：药物自身性质影响因素还包括药物蛋白结合率、作用温度等多方面因素。如果一种药物的蛋白质结合率很高或与蛋白质结合力很强，当培养基中存在大量蛋白质时，药物和培养基中蛋白质的结合必然降低药物的抑菌环（带）的大小。同样，培养温度也在一定程度上影响着药物敏感性试验的结果判断。

2培养基

药敏试验的结果在很大程度上也受到培养基厚度、用水的质量、PH值以及培养基成分的影响。