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恩诺沙星广泛应用于兽医临床,尤其对革兰氏阴性菌具有很强的抗菌活性。此类药物抗菌活性的研究主要是进行体外抑菌试验和药效学研究。前者是在人工培养基上进行,其结果虽具一定参考价值,也有一定局限性;后者在多数情况下是以一两种剂量进行。研究抗菌药物的体内抗菌活性,对评价不同药物以及同一药物不同制剂的临床疗效更具实际意义。为此,在体外药敏试验的基础上,以人工诱发雏鸭大肠杆菌病为模型,测定了恩诺沙星混悬剂对大肠杆菌体内抗菌活性,并同恩诺沙星普通注射剂和常用药物阿米卡星进行对比。?
1 材料与方法
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1.1 药品与试剂 恩诺沙星对照品(广东养宝生物制药有限公司提供),按实际含量配制成1280 mg/L水溶液用于体外药敏试验;恩诺沙星注射混悬剂按文献方法制备,经测定药物含量为40.4 g/L;恩诺沙星注射剂(广东海康兽药厂);阿米卡星(广东养宝生物制药有限公司提供)。
1.2 动物与菌株 仙湖三号肉鸭由佛山科学技术学院科研禽场提供,饲养至15日龄开始实验。大肠杆菌O78由中国兽医药品监察所提供。
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1.3 方法?
1.3.1 菌液稀释 将增毒后的大肠杆菌在实验前1天接种于2 ml营养肉汤中,37℃孵育6 h,取0.1 ml转种10 ml营养肉汤中,37℃孵育18 h,为实验用原菌液。将原菌液用生理盐水稀释至感染动物所需浓度。
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1.3.2 药物稀释 采用等比系列稀释法,恩诺沙星混悬剂用相应的溶媒稀释,恩诺沙星注射剂和阿米卡星注射剂用注射用水稀释。高低剂量组药物浓度比值为1∶0.75。
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1.3.3 感染动物保护实验 将实验动物按体重均衡随机分组,每组10只,肌肉注射菌液感染雏鸭,每只鸭注射菌量为1 MLD(预试中测定),每只动物感染后即刻肌肉注射给药2 ml/kg,连续观察7天,记录感染后雏鸭的症状及死亡数。?
1.3.4 数据处理 恩诺沙星混悬剂、恩诺沙星注射剂以及阿米卡星对大肠杆菌感染雏鸭的体内抗菌作用以半数有效量ED50?表示:ED50=1 g-1?[Xm-i(∑P-0.5+i(1-Pm-Pn)/4],其中,Xm为最大剂量对数值,i为组距即高低剂量之比的对数值,Pm为最高存活率,Pn为最低存活率。?
1.3.5 最低抑菌浓度(MIC)采用试管二倍稀释法测定。?
2 结果?
2.1 体外抗菌活性 恩诺沙星和阿米卡星对大肠杆菌O78的MIC分别为0.60 mg/L和0.25 mg/L。
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来源:互联网
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