血清

“Ｒ”相

“Ｑ”相

“Ｐ”相

１－Ｐ

2⁸

2⁵

2⁹

２－Ｒ

2⁸

2⁶

2⁶

３－Ｑ

2⁹

2⁶

2⁵

二、 禽类血清中往往含有非特异性血凝抑制因子，尤其是水禽血清在做禽流感血凝抑制试验时会出现对照孔和对照孔后2-3孔有凝集现象。因此，在利用血凝抑制试验进行血清抗体测定之前，有必要对血清中非特异性因子进行排除。热灭活是一种排除非特异性因子的有效方法，但对特异性抗体破坏较大。利用受体裂解酶处理血清在美国禽流感诊断中已广泛应用。但经过我们大量的临床试验发现水禽血清在经过受体裂解酶处理后有明显的差异，而鸡的血清却没有明显差异，所以在做血凝抑制试验时可对水禽血清用受体裂解酶进行处理，鸡血清不作处理结果影响不大。

三、在禽流感血凝抑制试验中抗原标定也是至关重要的一个环节。首先在试验之前要对禽流感抗原用已知效价的标准阳性血清进行标定，以确定抗原的纯度。抗原配制完后，需对所配制的抗原进行标定，看所配制的抗原是否达到所需标准，如工作抗原效价过高或过低对结果都有一定的影响。过高，测定抗体效价偏低；过低，测定效价过高，甚至很高。所以在禽流感血凝抑制试验中必须对抗原进行标定。

四、在进行试验操作时很容易出现错误，所以进行实验时一定要严格操作，每次测定应有严格的温度范围和作用时间，出现错误时要认真查找原因，以免类似错误再次出现。另外，所用抗原应是稳定性好，效价高的浓缩抗原。以下是容易出现的错误：

1.对照孔凝集

① 盐类凝集：所谓盐类凝集即稀释液中氯化钠达至一定高浓度时，即使没有血清抗体也能发生凝集反应。

② 当生理盐水被细菌污染时也可出现对照孔凝集。

③ 血清变质或受细菌污染。

2.全部凝集

① 当红细胞受细菌污染或保存时间过长可出现此现象。

② 抗原滴加时出现失误，工作抗原效价过高。

① 生理盐水受细菌污染或其它因素.

3、 红细胞全部下滑

①当配制抗原时，配制工作抗原效价过低，不足以凝集鸡红细胞。