（1）疑似发病猪场采样

　　采样工作准备：准备长的棉签（15厘米以上）、医用纱布、自封袋、一次性注射器、防护服、一次性长臂手套、鞋套、大的塑料袋（或塑料布，用于包裹病死猪）、记号笔、记录纸、笔、甲醛溶液、Eppendorf管、拉链式自封袋、垃圾袋、录像机（手机）、手电筒、拖布、消毒药、火焰喷枪等。

　　样品类型：

　　①疑似猪只口鼻拭子。将每头猪口、鼻拭子收集于同一采样管中，以便提高检测的准确性和减少工作量。拭子装于Eppendorf管内，建议将样品保存于4℃，立刻送检，没有实验条件的应在24小时内送至有资质的实验室。

　　②病死动物的腹股沟淋巴结。突然死亡的猪只，由于血液及脏器中携带大量的病毒，建议仅采集腹股沟淋巴结，然后将病死猪包裹后进行无害化处理。

　　③全血。用含有EDTA抗凝血剂的真空采血管，从颈静脉、前腔静脉或耳静脉抽取全血。如果猪只已经死亡，可以立即从心脏采血。不宜使用肝素作为抗凝剂，因其可以抑制PCR反应而造成假阴性。

　　偏远地区或者在无法冷链运输的时候，可经干血斑（DBS）进行微量血液样品的采集和储存。将几滴由刺血针或无菌注射器针头从动物的静脉或皮肤滴加到特制的吸水滤纸中完成干血斑(DBS)样品的收集。血液样品应完全浸透滤纸，并风干数小时。将样品储存在低透气性的塑料袋中，加入干燥剂以减少湿度。

　　④血清。使用未加抗凝剂的真空采血管从颈静脉、前腔静脉、耳缘静脉，或剖检过程收集血液样品。

　　⑤器官和组织样品。不推荐进行剖检采样，因易造成ASFV的扩散。必须在保障生物安全的条件下进行剖检，所有的猪器官和组织均可用于检测ASFV，但脾脏、淋巴结、肝脏、扁桃体、心脏、肺、肾脏及骨髓等含毒量较高。

　　⑥软蜱等媒介样品。钝缘蜱可以用于检测ASFV。有三种收集技术：手动收集、二氧化碳诱捕和真空吸引捕捉。收集后，应让蜱保持存活或直接储存在液氮中，避免DNA降解。

　　⑦环境样品。以区块为单位，对风险等级进行区域采样。如猪场内所有墙体、地面、设备等表面进行全覆盖采样。

　　生产区内：包括各区间猪舍内所有区间单元墙体、地面、风机、地沟、设备、水线、料线等。采样应全覆盖包括死角、料槽底部等不易采集到的位置。

　　生产区外：对可能的风险区域进行采样，包括出猪台、场区大门、料塔、下水道、员工宿舍、储物间、浴室、办公室、餐厅厨房、车辆、水源等所有可能受到污染的区域。

　　（2）包装和运输样品

　　采集好的样品应仔细进行包装，做好标记并送到实验室。运送的样品必须有足够数量的冷却材料（如冰袋、干冰），避免变质。样品应使用“三重包装系统”，保障运输过程中的生物安全，并避免样品受到污染。样品运输必须遵守农业农村部《高致病性动物病原微生物菌（毒）种运输包装规范》等规定。

　　（3）废弃物处理

　　采样结束后，做好尸体、场地、物品、个人防护用品的消毒和无害化处理。对不同场点尽量安排不同的采样人员，避免交叉污染。

　　（4）快速精准检测

　　实时荧光定量PCR（qPCR）是实验室快速检测ASFV的常用方法。大型养猪企业可建设ASFV检测实验室，当猪场周边和自己猪场受到威胁时做好疫情排查与监测，为疫情处置和精准清除提供技术支撑。开展qPCR检测必须配备专用的实时荧光PCR仪和相应检测试剂。实验室可以根据技术标准开展ASFV的qPCR检测。由于qPCR检测技术灵敏，极其微量的污染即可造成假阳性，对PCR实验室进行分区管理可以避免检测污染。应根据条件将PCR实验室分为试剂准备区、样本制备区、产物扩增区等。

　　（5）疫情确诊

　　中国动物卫生与流行病学中心或省级动物疫病预防控制中心实验室可以按要求确诊ASF疫情。

　　精准清除是指采集合适样品，在实验室检测结果基础上，结合流行病学调查和风险分析，准确判定感染个体和群体，科学划定疫点范围，迅速清除发病猪与感染猪，消灭传染源等的各种活动总称。

　　疫点清除

　　整栏清除：对于保育、育肥群体，在ASF传入早期，病猪数量极少，聚集在同一栏内，可实施整栏清除。

　　整栋清除：同时满足下述3个条件的，可实施整栋清除：阳性病例呈多点散发状态且只局限于某一栋猪舍，其他猪舍或生产线未检出ASFV感染阳性猪；栋舍之间有可靠的物理隔离屏障（如实体围墙）；严格限制场内员工交叉串舍。清除过程中，人员不可与相邻猪舍接触。