我国浙江省化工研究院采用 GB 15670—1995《农药登记毒理学试验方法》中的方法测定了氯化苦的急性经口、经皮、吸入毒性。氯化苦急性经口LD50：雌性大鼠为369（271～501）mg/kg，雄性大鼠为316 mg/kg；经皮LD50：雌雄大鼠均为926（636～1,350）mg/kg；吸入LC50（2 h）：雌雄大鼠均为316 mg/kg。该实验室条件下，氯化苦对大鼠急性经口、经皮、吸入毒性均属于中等毒。

华中科技大学同济医学院农药毒理研究中心检测结果：99.5%氯化苦原药对雌雄大鼠急性经口LD50均为200 mg/kg，属中毒；对雌性大鼠急性经皮LD50为681 mg/kg，属中毒，对雄性大鼠急性经皮LD50为 584 mg/kg，属中毒；对雌性大鼠急性吸入LD50为271 mg/m3，对雄性大鼠急性吸入LD50为233 mg/m3，属中毒；对家兔皮肤有轻度刺激性，对家兔眼睛有中度至重度刺激性。99.5%氯化苦原药属中度致敏类农药，Ames致突变试验结果阴性，对小鼠骨髓细胞的分裂未见明显抑制作用，体外哺乳动物细胞染色体畸变试验结果为阴性，不引起哺乳动物体细胞基因突变，对大鼠亚慢性经口毒性最大无作用剂量为1 mg/(kg·bw·d)，ADI为0.01 mg/(kg·bw·d)。

近期有学者评估了氯化苦对人类角膜上皮细胞的毒性，研究结果表明氯化苦暴露导致角膜上皮细胞活力降低，裂解酶和核糖体聚合酶表达上调，导致细胞凋亡增加。氯化苦通过氧化应激和脂质过氧化增强蛋白羰基化，促使角膜上皮蛋白发生改变，干扰信号通路，从而产生毒性作用。氯化苦对眼睛有强刺激性及催泪性，可用作警示剂。利用这一特点，氯化苦能有效保护人畜免受无色无味有毒物质的侵害。