根据蜘蛛毒的作用不同，大致可分为神经毒、溶血毒和混合毒等三大类。

蜘蛛神经毒蛋白的分子量大，其他动物和人被蚕后，毒素不能通过血脑屏障进人大脑，因而蜘蛛毒不影响中枢神经系统，而是作用于外周神经系统，如运动、自主、感觉和胆碱能外周神经系统。在神经肌肉接头处，一头是神经末梢，
另一头是肌肉纤维在神经末梢里有许多小窝，其中含有乙酞胆碱、去指令大脑发出甩脉冲带给肌肉。每当脉冲来到末梢时，这些小窝就释放乙酞胆碱，越过神经肌肉间的缝隙和肌肉纤维上的受体相结合，接着产生一系列化学反应而引起肌肉收缩。而蜘蛛毒素对神经肌肉传递起到千扰的作用。

对人有致命作用的神经毒蜘蛛主要有黑寡妇蜘蛛、悉尼漏斗网蜘蛛、穴居狼蛛、南美流浪者蜘蛛和巴西神经毒蜘蛛、南非拂拂蜘蛛等。

溶血毒蜘蛛也称为坏死型蛛毒，中毒表现为皮肤局部坏死，综合反应为溶血、衰竭、死亡。如线蛛属蜘蛛毒引发两种症状：一是局部皮肤坏死，有的出现水肿，并伴随疼痛，坏死区皮肤接着转为紫红色、黑色，千枯，几天后脱皮；二是3.7微克的毒素就能引起人体红细胞溶血。静脉为注射毒素引起血管内溶血，血小板减少，网状红血脉减少。

对人体有威胁的溶血毒蜘蛛，主要有棕隐士蜘蛛和南欧他兰登图毒蜘蛛。

混合毒蜘蛛既有神经毒的作用，又有溶血毒的作用。