5年里分别暴发了H7N1、H7N2和H5N2亚型的禽流感。因此，必须使用3种不同的异源NA血清型的疫苗，且要选取与野生毒株最匹配的抗原蛋白。每种毒株都要保存，并在暴发禽流感时能快速鉴定出野生毒株的亚型，这就使得疫苗开始使用的时间延迟了。克服这种缺陷的方法是使用反向基因构造病毒，使它和感染毒株具有相同的血凝素基因和相匹配的异源NA亚型。这种方法在试验中效果很好并且能及时完成，但是很难调整，缺乏灵活性，必须在应用以前先在野生禽类试用。

诊断方法的应用也是一个难题，神经氨酸酶抑制(NI)试验可以鉴定出9种NA亚型，但是这种试验不能筛取大量样本。意大利鉴别诊断策略采用iIFA定向检测N1蛋白是一种快速而简便的试验方法，可是iIFA试验并不是适合所有的NA亚型，并且试验结果很难解释。一种正在开发的ELISA方法有可能会提供一种灵敏高效的检测方法。

4　非结构蛋白策略

近年来提出了一种可选择的非结构蛋白(NS1)策略，它利用了流感病毒NS1免疫反应的差异。细胞感染流感病毒时会产生大量的NS1蛋白，但病毒粒子内不存在这种成分。禽流感灭活疫苗主要是全病毒粒子，理论上疫苗免疫动物不会产生NS1蛋白的抗体反应，而野毒感染动物则会产生这种反应。NS1试验不仅能区分疫苗免疫和野毒感染家禽，而且也能鉴定疫苗免疫和正遭受感染的家禽^[12]。此外，这种鉴定能力让贸易伙伴们相信他们的禽类没有受到野毒感染。

NS1策略与NA策略相比，前者的最大优势是适用于任何一种灭活疫苗并且只需要一种诊断方法，而NA策略需要进行多种诊断方法。此外，NS1系统要求疫苗中HA和NA都要匹配，潜在地提高了保护性。NS1策略最大的缺点是潜在的NS1蛋白污染对试验结果造成的影响。和亚单位疫苗与NA策略一样，NS1策略同样存在灵敏度不高的问题^[13]。

5　结语

采用接种疫苗控制禽流感的暴发会成为一种有效的措施，但完整的控制计划中还应该包括：生物安全、培育、监测和对疫苗效果的评价。近年来，在使用鉴别诊断策略上所做的努力增强了对野毒感染禽流感病毒的监测能力，确保了家禽和家禽产品贸易的安全性。