四、EDS-76导致产蛋异常的发病机制

患有EDS-76的鸡出现产蛋异常是由於EDS-76病毒侵害靶器官及其复制场所─ ─输卵管功能异常所致，健康鸡输卵管漏斗部和峡部粘膜的pH值为6.5±0.3，而患有EDS-76的鸡此处的pH值则为6.0±0.3(Van Eck，1979)，这就表明了子宫粘膜内的pH值的改变，导致了粘膜分泌功能紊乱。又由於酸度增加，溶解了大量钙质，因而蛋壳形成受阻。萤光抗体的定位检查表明。EDS-76病毒能使粘膜上皮细胞变性、脱落、细胞浆内分泌颗粒减少或消失及子宫的腺体细胞萎缩，这样使得钙离子转运障碍和色素分泌量减少，并使输卵管内pH值明显降低，这种酸性环境可以溶解卵壳腺所分泌的碳酸钙，使钙盐沈着受阻，从而导致蛋壳形成紊乱而出现蛋壳异常。由於输卵管各部功能异常使鸡的正常产蛋周期和排泄机制受到乾扰和破坏，导致产蛋率下降或产蛋停止。

五、诊断

由於许多疾病和环境因素都可造成密集饲养的鸡群发生产蛋下降，因而诊断时必须根据病的流行特点，临床征状，病理变化，血清学及病原分离和鉴定等进行综合分析和断定。

1. 流行特点：

一般发生在产蛋50％期与产蛋高峰期之间，即25~35周龄期间。

2. 临床征状和病理变化：

在按照规定的正常的饲养管理条件下，鸡群突然发生不明原因的群体性产蛋下降，并同时伴有畸形蛋，蛋壳褪色，变薄，蛋质下降。剖检见有典型的生殖道病变。取病变粘膜压片，进行包涵体染色，观察其包涵体。临床上无其他特异性表现时，可初步怀疑本病，以便早期诊断。

3. 病毒分离与鉴定：

从患鸡的输卵管，变形卵泡，无壳软蛋，泄殖腔、鼻咽粘膜，肠内容物，粪便等采集病料，经过常规灭菌处理後接种在鸡肾或鸭肾细胞上，孵育72~96小时後观察细胞病理变化及核内包涵体(需进行包涵体染色)，并用血凝(HA)及血凝抑制(HI)试验进行鉴定，用参比标准阳性HI血清检测出细胞培养物的效价。接种在5~10日龄鸭胚尿囊腔，可使鸭胚致死，其尿囊液有高的凝集滴度。从EDS-76血清阳性的鸡中，病毒的分离率约为63％。从产蛋异常的鸡群中，病毒分离率可达60％。

4. 血清学方法

(1)血凝抑制(HI)试验：

这是诊断EDS-76最常用的血清学方法之一。其原理是，EDS-76病毒含有红细胞凝集素，可凝集鸡、鸭、鹅的红细胞，其凝集作用可被相应的EDS-76病毒抗血清所抑制，具有很高的特异性和敏感性。HI试验多采用微量法，所以，也有叫做微量血凝抑制试验(MHIT)。试验用的抗原来自鸭肾或鸡肾细胞培养物制备，也可用鸭胚尿囊液制备。抗原采用4个血凝单位(4HAU)，用pH7．1PBS，指示系统所用红细胞为0.8~1％的鸡红细胞，采用常规操作程序进行。HI阳性标准在目前尚未统一，有人把1：32作为阳性，也有人将1：8判为阳性。B.N.布鲁耶夫报导，感染EDS76後2~3周内的新鲜鸡血清，HI滴度可达1：1280-1：2560。

(2)琼脂扩散(AGP)试验：

EDS-76病毒抗原与相应抗体在琼脂凝胶中双向扩散，在交接处形成肉眼可见的沉淀线，可用此法来检测EDS-76病毒的抗原或抗体。按Darbyshire提出的方法，是在含1.5M NaCl PBS(0.01M,pH7.2)制备的1％琼脂板上进行。

(3)病毒中的(VN)试验：

EDS-76病毒能致细胞发生组织学病变，并产生核内包涵体，这种作用可被相应的抗血清中和而消除，故可采用本试验检验EDS-76抗原或血清抗体。

(4)免疫萤光(IF)法：

Baxendale(1977)采用萤光法确定了EDS-76病毒与其它禽腺病毒有相同的抗原成份(抗原决定簇)。Adair(1978)采用萤光技术证明EDS-76病毒主要定位於感染细胞的细胞核。Mockett等(1984)也得出了同样结果。

(5)鶣联免疫吸附试验(ELISA)：