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家畜卵泡抑制素的研究进展


摘要:抑制素(Inhibin,INH),是一种主要由动物性腺(卵巢的颗粒细胞和睾丸的支持细胞)分泌的异二聚体糖蛋白激素,由两个三硫键连接两个不同的亚单位(α和β)构成,对垂体促卵泡素FSH的分泌、合成起选择性负反馈调节物作用。卵泡抑制素免疫中和技术能特异性地刺激机体FSH分泌,促进配子生成,进而提高动物生殖能力。本文主要就家畜卵泡抑制素的研究进展以及其对家畜生殖的影响作一综述。
关键词:畜牧学;抑制素;综述;家畜;生殖;促卵泡素
抑制素(Inhibin,INH)又称卵泡抑制素(Folliculostatin)或性腺抑制素(Gonadostatin),是一种主要由雌、雄动物性腺分泌的一种水溶性多肽激素,由α 和β 亚单位组成。由于其具有免疫原性,外源卵泡抑制素通过免疫调节可以降低动物机体内卵泡抑制素的生物活性,导致机体循环中FSH浓度升高,使排卵率和产仔数增加。国外已从牛、羊、猪、鼠及人类卵泡液中分离提纯,生化合成也得到具有卵泡抑制素活性的α 亚单位片断,利用cDNA技术已生产出卵泡抑制素融合蛋白,且证明这些卵泡抑制素产物均具有抑制脑垂体体内外FSH分泌的性质,参与调节动物卵泡发育。研究者通过利用卵泡抑制素的这种特性进行免疫处理,以提高牛、羊、猪等哺乳动物的生殖能力,这在生产和科研上都具有重要意义。近年来β-亚单位多,β-亚单位氨基酸序列与转化生长因子β(TGFβ)和苗勒氏抑制因子(MIF)相似。由于β- 亚单位有A、B两种故抑制素存在两种形式:INHA(αβA)和INHB(αβ 抑制素的生物学特性 
抑制素的耐热性能差,在有机溶剂中加热到65℃以上,或在培养基中80℃下加热30分钟,活性即被破坏。在pH1.9~4.0和7.0~10.0,可以进行过滤、冰冻和干燥,分子量在31KDa~32KDa和55Ka~65KDa者较为容易提纯。不同来源的抑制素对多种动物都有降低FSH作用,说明抑制素没有种属特异性。但抑制素的免疫化学性能并不完全一致,如用纯化的人精浆抑制素制备的特异性抗体与大鼠睾丸和卵巢抑制素有交叉反应,但与纯化的羊睾丸抑制素无交叉反应。
抑制素在切除卵巢绵羊的外周血中半衰期为45~50分钟。正常绵羊注射羊卵泡液后,一部分成分半衰期为18~24分钟,另一部分成分为50~60分钟。这可能是由于β 二聚体不具有糖基化位置,与抑制素相比更容易在血中被清除,因此出现两个半衰期。
2 抑制素的免疫调节功能
2.1 抑制素的免疫原性 
利用抑制素作为免疫原,通过主动免疫或被动免疫,中和内源性抑制素,可调节动物的排卵率。目前用于主动免疫的抑制素来源主要有三种:
一是用同源的或异源的卵泡液初提物或部分提取组分作免疫原。但实验结果表明,只有用异源卵泡液提取物才能产生较强的免疫反应和免疫效果。用卵泡液作免疫原时,通常要用活性碳处理以除去类固醇,以提高抑制素浓度。免疫效果会因提取程度不同而有差别。
二是化学合成的抑制素片断。现已知抑制素的化学结构。抑制素的生物活性中心在α 亚单位上,并合成得到了羊、牛和猪的具有25~32个氨基酸残基的抑制素α 亚单位片断,还进行了免疫试验。发现α 亚单位必须与一定载体蛋白(如血清白蛋白)偶联才具有抗原性,单一α 亚单位片断免疫不能产生抗体滴度。
三是生物技术合成物。近年来,利用cDNA技术,已得到了抑制素融合蛋白。这种蛋白质具有完全抗原性,可直接用于免疫动物,并已有试验结果报道。
2.2 抑制素免疫的作用机理 
抑制素最基本的生物学作用是抑制FSH合成和分泌,并可通过复杂的反馈机理,调节体液FSH水平,以及通过局部作用,对卵巢内卵泡发育发挥调节作用。因此,采用抑制素免疫动物,可导致抑制素的免疫中和作用,使血液循环FSH水平上升,促进排卵数增加。利用碘标记抑制素抗原测定血清抗体滴度结果表明,抑制素免疫动物血清与碘标31kD牛抑制素具有较高的结合率。而且结合率与FSH水平和排卵数呈正相关。
许多试验证明,用不同类型的抑制素免疫原免疫动物,均可引起血FSH水平增加,而对黄体化激素LH没有直接作用,被免疫动物循环LH水平无明显变化。但也有体外试验表明,猪抑制素制备物可加强绵羊垂体细胞GnRH诱导的LH释放,而抑制素对GnRH诱发的鼠垂体细胞FSH和LH释放均表现为抑制作用。这说明抑制素对LH的作用可能存在种间差异。


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