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聚乙二醇提取鸡新城疫康复鸡蛋黄抗体及应用


    笔者利用新城疫康复鸡所产的蛋试制高免蛋黄液,并用聚乙二醇6000提取蛋黄抗体液,用于控制鸡新城疫,效果较好,现报道如下。

    一、康复鸡只选择

    我县张庄镇田娄村张某饲养的2000只海赛克斯商品蛋鸡,按孵化场提供的免疫程序,于55日龄、110日龄用NDⅠ系疫苗和鸡新城疫油剂灭活疫苗接种,到190日龄突发以呼吸道哕音为主要症状的鸡新城疫,产蛋率下降10%。用NDⅠ系疫苗3倍量和英特威产鸡新城疫油剂灭活疫苗1毫升/只,分别肌肉注射,第7天后死亡停止,死亡率3.1%,全群鸡采食量增加,产蛋率回升,至229日龄产蛋率达95%。测20只鸡血样,ND抗体HI效价平均达1∶2E14。

    从鸡群中挑出发病后康复的并且鸡白痢杆菌、支原体全血平板凝集试验全部阴性的高产鸡50只,隔离饲养,加喂抗生素和电解多维,适应3天,收集所产蛋备用。

    二、蛋黄抗体液制备

    将收集的鸡蛋洗净,用0.5%福尔马林浸泡消毒20分钟,取出晾干,无菌分离蛋黄,加2.5倍的生理盐水稀释,再按每500毫升蛋黄液加50毫升25%聚乙二醇 6000(约占蛋黄液的2.5%),8000转/分匀浆3分钟,倒入玻璃缸内,置0~4℃冰箱内8~12小时,取出,这时蛋黄液变为两层:上层为黏稠的脂蛋白(弃掉),下层为含免疫抗体的清液,用虹吸法取出下层清液,装瓶,加青霉素、链霉素2000单位/毫升,即为蛋黄抗体液,体积为原蛋黄液的55%左右。

    三、检验

    1.无菌检验:取成品蛋黄抗体液0.2毫升,接种于普通营养琼脂培养基和厌气肉汤培养基,37℃培养48小时,无细菌生长。

    2.效价测定:对每次蛋黄抗体液作鸡新城疫抗体效价测定,HI值均在1∶2E12以上。

    3.安全检验:选择体重0.5千克蛋公鸡,肌注蛋黄抗体液2毫升/只,观察一周,未见异常反应。

    四、临床应用体会

    用ND康复鸡蛋制备的蛋黄抗体液,紧急控制ND发病鸡31群21300只鸡,体会如下:

    1.对ND发病鸡群,立即肌注蛋黄抗体液1~3毫升/只,一般2~3天即可控制死亡,效果明显。之后,3~5天或据ND抗体监测结果,再接种鸡新城疫Ⅰ系或弱毒疫苗,同时配合新城疫油剂灭活疫苗,使机体内免疫抗体保持一致持久,内服抗生素和电解多维,预防继发感染,增强机体抗病力。

    2.蛋黄抗体液应冻结保存,-5℃保存半年,-10~15℃保存一年,效价不变,解冻后稍有沉淀,振摇刀:即可使用,切勿将沉淀弃掉;忌反复冻融,否则会降低效价,影响防制效果。


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