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科技攻关:H5亚型禽流感病毒检测再提速


■技术人员在2~3小时内就可以检测出禽流感病毒

■比原有的荧光RT-PCR检测方法用时缩短一半,且检验成本较低

■集靶核酸扩增、检测和结果判定于一体

■技术敏感性高、准确性好,且无需昂贵仪器

■非常适合基层单位现场疫病检测使用

《高品质畜禽产品关键检测技术研究及示范应用》课题组科研团队

近日,由北京检验检疫局研发的禽流感新检验方法———LAMP快速检测技术顺利通过验收,技术人员在2~3小时内就可以检测出禽流感病毒。据该技术研发团队北京检验检疫局《高品质畜禽产品关键检测技术研究及示范应用》课题组负责人赖平安研究员介绍,此检测方法比原有的荧光RT-PCR检测方法用时缩短一半,且检验成本较低,未来将在基层检疫机构和养殖场推广。

RT-LAMP快速检测技术学名为环介导等温扩增法,是集靶核酸扩增、检测和结果判定于一体的快速检测方法,能够在2至3个小时之内得到检测结果,该技术敏感性高、准确性好,且无需昂贵仪器。实验证明RT-LAMP检测方法与国标荧光RT-PCR检测方法的阳性符合率为100%,非常适合基层单位现场疫病检测使用。

据悉,目前我国畜禽产品疫病检测存在的主要问题是生产企业、基层兽医部门与上层畜禽产品疫病检测、监测权威部门所采用的方法不一致,一般来说基层兽医部门不具备昂贵仪器设备,所使用的检测方法简单,检测的准确性、敏感性相对较差;而质量安全权威检测部门设备先进、拥有各方面的专业技术人才,检测方法敏感性更高、准确性更好。客观上造成有时基层检测结果合格的畜禽产品,而在权威部门抽检不合格。检测结果的不一致,往往影响食品安全各级执法部门的客观公正,是造成我国食品生产质量参差不齐的主要原因之一。

为了解决畜禽肉产品检测中存在的这一矛盾,更好地为我国畜禽肉品安全从养殖、屠宰、加工等环节现场监管和各级执法部门建立统一标准方法提供良好的技术保障,北京检验检疫局科研技术人员将科研重心偏向了推进动物疫病现场快速检测关键技术的发展。在详细了解国内外相关研究方向的最新进展基础上,《高品质畜禽产品关键检测技术研究及示范应用》课题组应运成立。这支结构合理、团结协作和多学科背景的研究队伍的组成,为LAMP技术在畜禽养殖场疫病检测中的应用奠定了坚实的基础。

赖平安研究员介绍说:“LAMP技术是自2000年以来,在分子诊断领域取得的一项重大科技成果,该技术的突破性进展就是集靶核酸扩增、检测和结果判定于一体。我们在报这个选题之初,就是想利用LAMP技术敏感性高、准确性好,不需昂贵设备,易于推广应用等特点,来克服目前实验室检测方法操作复杂、现场快速检测方法灵敏度不高的缺陷,整个研发过程很顺利,在大量实验的基础上,保质保量地完成了任务书中的要求,建立了H5亚型禽流感病毒和美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒的等温扩增快速检测技术。”

课题组技术人员在进行实验

LAMP阴阳性样品检测结果

大事记>>

2008年4月

启动项目研究,收集课题研究所需的技术资料,与合作单位协商研究方案和技术路线,与技术发明者日本荣研公司建立交流渠道。

2008年6月至10月

设计LAMP技术引物,进行验证和筛选;2008年11月至2009年4月建立禽流感和蓝耳病的检测方法,并用已知阴阳性质控样品优化检测操作程序和检测体系,确定出检测方法的灵敏度、准确性、重复性等性能参数。

2009年5月至12月

优化反应体系,建立闭管、结果目测判定的LAMP检测方法,并进行初步临床验证。

2010年1月至3月

将优化后的LAMP检测方法更大范围应用于北京市畜禽养殖企业禽流感病毒H5亚型检测和病死猪蓝耳病检测。

2010年4月9日

《高品质畜禽产品关键检测技术研究及示范应用》课题顺利通过验收。

关键词>>

LAMP快速检测技术


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