1 疾病流行概况及临床症状

2004年7月，广西地区某鸡场进3 800羽麻鸡苗，39日龄时开始发病，第2天开始死亡，第7天达到高峰，继而下降，持续5天，死亡率约10%。主要临床症状是一过性咳嗽、流鼻涕，精神不振，羽毛蓬乱，两翅下垂，喜饮水，采食减半，拉白色稀便，怕冷聚堆，急性死亡。耐过鸡个体发育比正常鸡偏小。?

2 病理变化

大部分病鸡机体脱水严重，肌肉发绀，皮肤紧缩，皮肤与肌肉不易分离，病死鸡的鼻、气管、支气管黏膜轻微充血或出血；鼻腔、喉头、气管内有少量淡黄色黏稠液体；肠壁变厚；肾肿大苍白，呈典型槟榔状；输尿管变粗，内有大量的白色尿酸盐沉积；其他脏器未见异常。

3 实验室检验

(1)按常规方法将病死鸡肝脏、病变肾脏接种于普通、营养、厌氧培养基恒温37℃培养5天，均无细菌生长.(2)对有典型病变的鸡只的肺、肾于无菌试管或样品袋中置冰冻-20℃保存。病料处于半冻状态时剪碎，用生理盐水5倍稀释，添加适量抗生素进行研磨成匀浆。反复冻融3次，12 000 r/min 4℃离心5 min，上清液用0.45 μm滤膜过滤.(3)取10日龄SPF鸡胚，试验组尿囊腔接种滤液8枚（?0.2 ml/?枚），37℃孵化；对照组接种同量生理盐水4枚；弃去24 h内死胚，36～48 h时试验组抽检3枚，对照组抽检2枚，测HA；无菌收集尿囊液经4℃低速离心10 min，HA阴性的尿囊液盲传4代（8枚/代），从第2代到第4代的尿囊液经胰酶处理后测HA，第4代同时做干扰试验及动物回归试验。每代抽检后的剩余5枚继续孵化至16日龄观察与记录死亡及矮化数量。结果见表1。由表1可知，随着在鸡胚中传代次数的增加，出现矮化数量和死亡胚增多，鸡胚死亡时间也提早。(4)取第2、3、4代和对照组胚液离心取上清，与2％胰蛋白酶混合，置37℃作用2 h，中间轻轻摇动2次，按常规方法在96孔“V”型微量滴定板上进行HA。稀释液为0.05M pH值7.2的PBS缓冲液，红细胞悬液为0.5％鸡红细胞。结果，试验组3代HA平均值分别是：4.5、6.8、8，对照组HA为0。试验组胚液能凝集鸡红细胞，初步判定胚液中可能有IBV存在.(5)取16枚10日龄SPF鸡胚，均分两组：Ⅰ组尿囊腔接种第4代离心上清0.2 ml/胚，37℃孵化10 h复种NDⅣ系活疫苗（广东省生物药厂提供），后继续孵化36 h，冻胚进行HA检测；Ⅱ组同条件下孵化，10 h时接种NDⅣ系0.2 ml/胚，也孵化至?36 h?，同时进行HA检测。结果是Ⅰ组的HA分别为2.5，2.5，3，3，3，3.5，3.5，4，Ⅱ组的HA分别是7，8，8，9，9，9，9，10，由此可见NDIV受干扰，胚液中可能有IBV存在。(6)取40只易感日龄的健康雏鸡（未免疫IB疫苗），分两组。一组用第4代胚液点眼或滴鼻攻毒，每只鸡0.3 ml；一组空白对照，分开于隔离舍饲养。观察14天。结果是攻毒鸡只在36h时出现临床症状，精神委靡，羽毛松乱，部分见咳嗽、喷嚏（这种情况是一过性的，72 h时表现不明显），继而饮食下降，见白色稀粪，第2天开始死亡，第9天达到高峰，然后下降，约持续1周，死亡80%。剖检死鸡，见肾肿严重，明显花斑，输尿管尿酸盐沉积清晰，其他部位病变不明显。活鸡剖检也可见肾部病变。试验组耐过鸡只个体明显比对照组小。与自然发病的病例基本一致。?

表1 接种鸡胚后的死亡和矮化情况

4 防治

（1）降低饲料中的蛋白量、解肾肿、补电解质、抗菌、中西结合方法。具体措施为：饲料中添加?10 kg?米糠；肾肿解毒药按治疗量加大一倍饮水，第1天全天饮水，以后饮半天，连用3～5天；预防用多维以及环丙沙星拌料；根据验方添加清热解毒、抗病毒、利尿类中药.（2）隔离饲养，强化防疫消毒，每天0.3％过氧乙酸喷洒舍内外地面，保持鸡舍内适宜温湿度。处理3天后，虽然病情有所缓解，但效果不是很理想。?

6 讨论

(1)根据以上试验结果分析，最终确诊为该群鸡感染了肾型传支病毒。曾用H120和H52免疫鸡群，排除疫苗质量和操作的原因外，仍发生本病，可能与传支抗原性发生变异有关，是否为新的或其他血清型，有待进一步作血清型鉴定和免疫原性研究.(2)肾型传支的预防，目前在国内外除隔离、消毒等综合措施外，主要以接种疫苗为主，比较成熟的做法为接种自家株灭活苗和弱毒疫苗（血清型适合）。对于肉鸡和肉种鸡来说，如果当地存在肾型传支的疫情或疫情威胁，那么，除了做好普通呼吸型传支疫苗的免疫外（如H120，Ma5等），还应该选择准确质量优良的肾型传支疫苗进行免疫（如H120+28/86肾传支等）。值得注意的是，由于IBV有众多血清型和变异株存在，所以选择有效的疫苗是很重要的。加之疾病诊断研究的发展往往滞后于病原变异，所以防治IBV任重而道远。