1 禽流感诊断监测方法
禽流感诊断监测方法很多,各种方法都有各自的应用范围,有各自的优点和局限性。现将各种方法作一总结,在诊断监测工作中,应根据具体工作需要采用合适的方法。禽流感各种检测方法的比较见表1。
表1 禽流感各种检测方法比较 检测方法 检测对象 适用性与局限性 所用试剂 试剂生产 琼脂扩散(AGID)试验* A型AIV抗体 方法简单,敏感性低 抗原、抗血清 国内有试剂 血凝(HA)及血凝抑制( HI )试验 血凝素亚型抗原、抗体 鉴定 HA 亚型直观反映抗体水平,有明显交叉反应 血凝素抗原、抗体 国内有试剂 免疫胶体金试纸 A型AIV抗原 适合现场快速诊断 胶体金试纸条 国内有试剂 免疫荧光(IF)试验 组织、细胞病毒抗原 诊断速度较快,受主观经验影响大,不易掌握 抗 AIV 荧光抗体 国内无试剂 免疫酶渗滤法 A型AIV抗原 诊断速度较快,步骤比胶体金试纸多,适合小样本量测定 免疫酶试剂盒 国内无试剂 RT-PCR* 病毒基因 速度较快,可以鉴定亚型 RT-PCR 试剂盒 国内有试剂 NASBA 病毒基因 高敏感性,操作烦琐,易产生假阳性 NASBA 试剂盒 国内有试剂 病毒分离 * 病毒 可最终确诊,周期长 鸡胚 荧光RT-PCR 病毒基因 敏感度比常规 RT-PCR 高。但成本高,仪器昂贵 荧光 RT-PCR 试剂盒 国内有试剂
注:“ *”表示该方法为OIE诊断试验和疫苗标准手册中收录的方法
病毒分离 * 病毒 可最终确诊,周期长 鸡胚
注:“ *”表示该方法为OIE诊断试验和疫苗标准手册中收录的方法。
2禽流感临床快速诊断技术
出现疑似禽流感(尤其是高致病力禽流感)病例时,需要在最短的时间内作出诊断。可以先用快速诊断技术作初步判断:
(1) 现场快速诊断:
免疫胶体金试纸条可以现场操作,直接取喉气管、泄殖腔棉拭检测,无须仪器设备,操作简单,10分钟内即可初步判断是否有禽流感病毒存在。
(2) 实验室快速诊断
采用RT-PCR检测技术,可以直接鉴定AIV的型和亚型。
(3)其它快速检测方法
包括免疫酶渗滤法和免疫荧光法检测禽流感病毒,如果采用血凝素特异性的单克隆抗体,还可以初步鉴定病毒的血凝素亚型。采用血凝素特异性的单克隆抗体介导的抗原捕获ELISA,还可以初步鉴定病毒的血凝素亚型。
当然,依靠快速诊断技术仅能作出初步诊断,进一步确诊还需做病毒分离、RT-PCR检测,必要时需测定病毒的静脉接种致病指数。
3禽流感快速诊断试剂盒(试剂条)
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来源:互联网
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