仇建华1 鞠晓峰1 段 红1 高俊峰2 冉旭华1 侯美如2 王春仁1

（1.黑龙江八一农垦大学 黑龙江大庆 163319，2.黑龙江省兽医科学研究所 黑龙江齐齐哈尔 161000）

作者简介：仇建华（1966-），女，研究员，本科。

通讯作者：王春仁（1965-），男，教授，博士。

基金项目：黑龙江省教育厅资助黑龙江省教育厅科学研究项目，土耳其斯坦东毕吸虫雌雄虫消减文库的构建及性别差异新基因的克隆分析，项目编号：11551311

土耳其斯坦裂体吸虫主要寄生于牛、羊等反刍动物的门静脉和肠系膜静脉。该病在我国流行时以东北和内蒙古较为严重。慢性感染可引起家畜腹泻、贫血、水肿，发育不良，影响受胎或发生流产。急性感染可引起牛、羊大批死亡，给畜牧业带来较大经济损失。因此土耳其斯坦裂体吸虫病是重要的寄生虫病。

1 诊断

1.1 临床诊断

根据患畜贫血、消瘦、腹泻、水肿等临床症状结合流行病学调查进行诊断。在流行区家畜出现以上临床症状时可以怀疑感染了土耳其斯坦裂体吸虫，但不能确诊。如果要确诊，需要进行实验室检查。

1.2 病原检查

虫卵检查法：采用粪便水洗沉淀法。因土耳其斯坦裂体吸虫成熟雌虫子宫内只有一个虫卵，又寄生于肠系膜静脉和肝门静脉内，排卵量很少，因此在粪检时应采集较多的粪便。通常取患畜粪便50~100克加入烧杯内，加适量水混匀后40~60目铜筛过滤，经20~30分钟沉淀后，倒掉上次液体，如此反复水洗沉淀三次，吸沉渣镜检。虫卵为椭圆形，呈淡黄色，一端有附属物，另一端有小刺，内含有一毛蚴。检查时应注意，如果在炎热的夏天可用0.9%生理盐水代替常水，并将待检样本放入4℃冰箱中，防止毛蚴过早孵出影响检验效果。

毛蚴孵化法：由于土耳其斯坦裂体吸虫虫卵很少，因此虫卵检查时检出率很低，现多采用虫卵检查阴性者再用毛蚴孵化法复核的方法。取患畜新鲜粪便50~100克，反复洗涤沉淀或尼龙筛兜内清洗后，将粪便沉渣倒入三角烧瓶内，加清水至瓶口。在20~30℃的条件下，经3~5时后用肉眼或放大镜观察，如在离瓶口2~3厘米处有白色点状物作直线来往游动，即是毛蚴。必要时也可以用吸管将毛蚴吸出镜检。

虫体检查法：牛、羊死亡或扑杀后，在肠系膜静脉和肝门静脉内检出大量土耳其斯坦裂体吸虫即可确诊。此法简单、实用，但需要剖检动物，主要适合疾病确诊。

1.3 免疫学检测

目前，用于土耳其斯坦裂体吸虫病的免疫诊断方法主要包括间接血凝试验、酶联免疫吸附试验、酶联免疫印渍技术和斑点免疫金渗滤法。

间接血凝试验（IHA）：使用虫体粗抗原或纯化抗原检测土耳其斯坦裂体吸虫抗体效果较好。张世英等使用虫体粗抗原对100多只羊试验表明，此法较毛蚴孵化和粪便虫卵检查简易快速，特异性强，敏感性高，阳性符合率大约为86%[1]。耿进明等首次使用Sephadex G200柱层析将虫体粗抗原进行了部分纯化，初步建立了使用IHA诊断牛、羊土耳其斯坦裂体吸虫病的方法，并对62份阳性血清，25份阴性血清分别进行了检测，阳性符合率可达96.8%，阳性符合率为96%，具有较强的特异性和较高的敏感性[2]。

酶联免疫吸附试验（ELISA）：刘振玲和赵辉元应用ELISA检测绵羊抗土耳其斯坦裂体吸虫抗体取得了满意结果，阳性符合率为98.4%，阴性符合率为95%，比沉淀法、孵化法分别高57.55%和24.25%，在特异性方面，仅与肝片吸虫有4.8%的交叉反应，未发现与矛形双腔吸虫、前后盘吸虫有交叉反应[3]。耿进明等用碳酸钠溶液包被土耳其斯坦裂体吸虫的可溶性抗原于聚苯乙烯板，采用待检血清和酶标的二抗进行ELISA试验，结果表明ELISA与IHA及毛蚴孵化法相比检出率最高，与刘振玲等实验结果相一致，证明ELISA检测土耳其斯坦裂体吸虫抗体具有较高的敏感性[4]。

酶联免疫印渍技术：该法是通过粗提土耳其斯坦裂体吸虫的可溶性抗原进行聚丙烯酰氨凝胶电泳，然后电转印到硝酸纤维素膜上，加入待检血清和酶标的二抗底物显色，阳性血清即可在膜上显色。该法可用于土耳其斯坦裂体吸虫的免疫诊断，极大地提高了检测的特异性和灵敏性，达到纳克级水平[5]。

斑点免疫金渗滤法：王春仁等应用该法检测羊土耳其斯坦裂体吸虫，在特制的醋酸纤维摸上进行免疫学反应[6]，该法与解剖法阳性符合率为98.35%，阴性符合率为97.78%，与ELISA法检测结果相似；除与肝片吸虫阳性血清有2.86%交叉反应外，与前后盘吸虫、胰阔盘吸虫阳性血清没有交叉反应，其阳性检出率明面高于沉淀法、孵化法和IHA法，本法具有操作简单、反应快速、灵敏性强、重复性好、检出时间早，而且标记好的诊断试剂盒可在4~10℃可贮存1年。