纤维素是地球上最丰富的可再生生物资源。据报道,全球每年通过光合作用产生的纤维素高达1000亿t以上(David和Hou,1998),但能被利用的极少。当前,饲料原料资源的严重匮乏阻碍了我国畜牧业的发展,如何提高饲料原料的消化利用率,已经成为科研工作者研究的重要课题。因此,成功开发这一潜在饲料资源显得尤为迫切和重要。
l纤维素酶的种类
1.1 葡聚糖内切酶葡聚糖内切酶(endo-1,4-B-D-glucanase,EC 3.2.1,4,来自真菌简称 EG,来自细菌简称Len),又称为cl酶,这类酶作用于纤维素内部的非结晶区,随机水解B-l,4-糖苷键,将长链纤维素分子截短,产生大量带非还原性末端的小分子纤维素。葡聚糖内切酶分子质量介于23-146 ku之间,如真菌的异构酶EGI和EGⅢ分子质量分别为54 ku和49.8 ku,而纤维粘菌EG分子质量只有6.3 ku.
1.2葡聚糖外切酶葡聚糖外切酶(exo-1,4-β-D-gJucanase,EC 3.21.9t,来自真菌简称 CBH,来自细菌简称Cex),又称为Cx酶,这类酶作用于纤维素线状分子末端,水解1,4-β-D糖苷键,每次切下一个纤维二糖分子,故又称为纤维二糖水解酶(cellobiohydrolase,简称CBH),外切酶的分子质量介于38~118 ku之间,如木霉的CBH有两种异构酶:CBHI和CBHⅡ,分子质量分别约为66 ku和53 ku.
1.3 β-葡萄糖苷酶 β-葡萄糖苷酶(B- Glucosidase,EC 3.2.1.21,简称BG)一般将纤维二糖或纤维寡糖水解成葡萄糖分子,一般不直接作用于纤维素分子,β-葡萄糖苷酶分子质量约为76 ku(SuNsaN等,2002;Schulein,2000)。
2纤维素酶的营养作用
在动物饲料中添加纤维素酶的作用机制在于:1)可打破植物细胞壁,使胞内原生质暴露出来,由内源酶进一步降解,所以除了细胞壁被降解供能外,还提高了胞内物质的消化率,从而提高了饲料的有效能值。2)可补充草食动物内源酶的不足。草食动物胃中虽有一定量的微生物,可以分泌纤维素酶分解纤维素,但纤维素酶分泌量有限,而添加纤维素酶制剂可显着提高草食动物对粗纤维的消化利用率。另外,对单胃动物而言,纤维素酶可改善消化道环境,使酸度增加,以激活胃蛋白酶。消化酶不足可能与酶产量低、各种应激(如断奶、接种疫苗和环境应激)有关,外源酶可以补充幼龄动物消化酶的不足(David和 Hutcheson,2002)。3)消除抗营养因子。果胶、半纤维素、葡聚糖和戊聚糖部分溶解在水中产生黏性,增加了动物胃肠道内容物的黏度,对内源酶而言是一个物理障碍,导致饲料消化吸收利用率降低,同时黏稠的消化道内容物容易引起有害微生物的滋生,增加胃肠疾病的发生率。而添加纤维素酶可降低黏稠度,促进内源酶的扩散,增强养分的消化吸收,增大肠道内容物的流动性,有效降低有害微生物附着滋生的可能性(陈洪章等,1995)。4)提高畜禽体增重、降低料肉比。纤维素酶制剂本身是一种由蛋白酶、淀粉酶、果胶酶和纤维素酶等组成的多酶复合物。在这种多酶复合体系中一种酶的产物可以成为另一种酶的底物,从而使消化道内的消化作用得以顺利进行。也就是说纤维素酶除直接降解纤维索,促进其分解为易被动物所消化吸收的低分子化合物外,还和其他酶共同作用提高畜禽对饲料营养物质的分解和消化。5)纤维素酶还具有维持小肠绒毛形态完整、促进营养物质吸收的功能(张勇和陶青燕,2002)。
3纤维素酶对奶牛营养物质消化率和生产性能的影响
3,1 纤维素酶对奶牛精料的影响
许多动物生理学家曾担心添加外源酶会破坏内源酶或抑制内源酶的产生。研究表明,外源酶的添加不仅不会破坏和抑制内源酶,而且还能促进动物的消化吸收。
Hristov(1998)报道,在日粮中添加纤维素酶和术聚糖酶,可提高可溶性糖的含量(P<0.05)和降低中性洗涤纤维的含量(P< 0.05)。但对干物质消失率和瘤胃发酵影响较小,且日粮中直接加酶要好于真菌灌注的效果。Rode(1999)研究结果表明,在奶牛泌乳早期的精料中添加13 g/kg纤维素酶和木聚糖酶,使干物质、中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维和粗蛋白质的消化率分别由61.7%、42.5%、31.7%和61.7%增至69.1%、51.O%、4l 9%和69.8%,产奶量也由35.9 kg/d增至39.5 kg/d,但乳脂率和乳蛋白含量略有降低,采食量不受酶影响。Yang(1999)报道,在泌乳牛日粮中添加纤维素酶和木聚糖酶,不但提高了有机物和中性洗涤纤维的消化率,而且微生物蛋白质合成量也相应增加。刘建昌等(2001)在荷斯坦奶牛的配合精料中添加0.1%纤维素酶制剂,经过60 d的试验观察,结果表明添加纤维素酶,每头牛日平均产奶量提高了14.89%,试验组每头牛每日多收入5.41元,经济效益显着提高,此结果与焦平林等 (1997)的试验结果一致。刘德海等(2000)在奶牛饲料中添加纤维素酶复合酶53 g/t·d,奶牛平
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