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(沈阳农业大学畜牧兽医学院,辽宁沈阳110161)?

摘 要: 牛分支杆菌感染的主要特征是引起细胞免疫反应。现在牛结核病的诊断试验是以T细胞反应机制为基础的。低敏感性的结核血清学试验是不值得提倡的，血清学试验最好作为细胞学试验的补充而不是替代。最近，发现了牛结核γ干扰素试验是一种快速的（24 h）惟一使用全血的体外试验，该方法在澳大利亚应用，结果表明，比传统的结核菌素法诊断牛结核更敏感。假阳性反应的难题归因于所使用的抗原制品间的交叉反应特性，设动物对牛PPD和禽PPD的γ干扰素反应作对照可解决假阳性的问题。虽然牛结核特异性蛋白已确认并被分类，这些特异性蛋白可能在血清学或细胞学诊断试验中使用，但是它们可能因牛对牛分支杆菌感染的免疫反应的遗传多样性而受到限制。?

关键词： 牛分支杆菌;酶联免疫吸附试验;γ干扰素;单一结核菌素试验?

结核菌素试验是广泛使用的最古老的免疫学试验方法之一。自从罗伯特·库克首次在1891年提出了结核菌素反应，这种试验一直应用于动物和人结核病的免疫诊断。尽管传统的结核菌素试验得到了广泛的应用，但已证实该方法存在的问题^[1]。一些详细研究牛单一结核菌素试验（SIDT）的敏感性和特异性的文献指出，在某种情况下，这种试验方法的敏感性会大大下降。 Francis J等(1978)重复了该项工作，结果发现SIDT的敏感性只是中等水平（平均72%）。Wood P R等发现SIDT的敏感性为65.6%^[2]。??

虽然SIDT的特异性一般很高（98.8%）^[3]，但在一些国家的一些畜群和一些特殊群体中，可因抗原与非典型结核分支杆菌间的交叉反应而出现假阳性。另外,该试验结果需要3 d，并且被检牛在60 d~90 d内不能再接受检查。因此,亟待探索诊断结核病的替代试验。?

1 血清学检查?

对牛结核病的早期血清学研究有各种不同的试验，如皂土絮状沉淀试验、kaolin凝集试验、直接荧光抗体试验和补体结合试验。所有这些试验系统都使用粗制抗原制品，且非感染牛和其他分支杆菌感染的动物与该血清具有广泛的交叉反应，与较低的特异性问题一样，这些血清学试验也有很低的敏感性，而那些结核病牛的检测结果却是阴性。从这些早期研究中得到的惟一可喜的成果是在提高抗体效价和感染的严重程度之间存在相关性，也发现牛结核菌素试验阳性者中抗体反应有所提高。?

Thoen C A等首次报道了用结核纯化蛋白提取物作抗原来进行牛结核病的酶联免疫吸附试验（ELISA）^[4]，在ELISA的早期研究中,Ritacco V等^[5] 报道了其对牛结核病的敏感性为90%，特异性为89.8%但是后来该研究组成员对ELISA进行了更深入的研究，发现ELISA的敏感性下降至73.6%