1 发病情况及临床症状
辽宁省锦州市某养犬户饲养一只小巴哥犬,雌性,六岁多,于2004年1月下旬,发现采食逐渐下降,精神沉郁,体重下降;经过添加心解质、多种维生素、多酶片、乳菌生凋治,未见明显疗效,再经病毒唑、头孢噻唑、罗红霉素治疗未见明显疗效。
该犬发病约3个月后,体重由6kg降到4.3kg,体质衰弱,呼吸困难,脉数增多,多尿,有时呕吐,病犬腹围明显增大,可视粘膜苍白,触诊腹部有坚实肿物感,血液学检查,红细胞数、血小板减少,白细胞分类计数淋巴细胞和成淋巴细胞明显增多。经以上检查初步判定该病犬腹腔器官实性增大或腹腔内形成肿物。
2 腹腔探查和巨脾摘除术
2.1 器械利用品 一般开腹手术所需器械、药品和用品。
2.2 方法 将病犬仰卧保定,个身麻醉,在腹正中线上,剑状软骨与脐连线的小点为切口中点,先切开腹壁3~4cm,用手指探查腹腔器官;经探查发现脾脏高度肿大、坚实,腹腔内腹水增多、红黄色、稍混浊。将腹水涂片并接种琼脂培养基,然后用灭菌注射器吸出腹水,扩大切口,将脾拉出,分离出脾动脉和脾静脉行三重结扎,在结扎线中间剪断,再剪断脾胃韧带和脾肾韧带,将脾游离取出,然后,对腹腔出血的血管压迫或缝合结扎止血,但由于该病犬高度衰弱和贫血,血液凝固性降低,腹腔血管壁脆性增强,止血困难,出血过多,未等清理腹腔,缝合腹壁,病犬即死亡。
3 剖检变化
对病犬进行剖检,主要变化为:脾脏高度肿大,长26cm,脾头最宽处9cm,脾尾宽7cm,厚度3~5cm,脾重600g,脾包膜不完整,凹凸不平,有出血灶、坏死灶,质地脆弱,切面灰白、灰红等色彩斑驳,结构纹理不清;肝脏稍肿大,质脆,表面有灰白色小病灶,胆囊壁增厚;下颌淋巴结、腹股沟淋巴结、肠系膜淋巴结肿胀,乳白色或灰褐色,质地实硬但切面湿润,结构模糊:心包腔和腹腔积液。
4 细菌学检查
以无菌方法取腹水、肝血、心血、脾血、淋巴结涂片和接种普通琼脂培养基:涂片采取革兰氏和姬氏染色法染色,染色后镜检。培养基置37℃恒温箱培养24~72h。
观察结果:涂片镜检未见微生物,培养基经培养后未见菌落形成。
5 动物接种
5.1 器材和动物 常规动物接种器材,小白鼠30只。
5.2 病料 取肝、脾、淋巴结制成病料悬液。
5.3 方法 将病料分为病料悬液和双抗处理病料两种,分别腹腔接种10只小白鼠,并设10只小白鼠做为空白对照组,观察1周。
5.4 结果 对照组和试验组小白鼠均未发病和死亡。
6 病理组织学检查
6.1 材料 病犬脾、淋巴结、肝,10%福尔马林,H~E染色剂(苏木素~伊红染色剂)。
6.2 方法 取病犬脾、淋巴结、肝按照病理组织切片材料要求,用10%福尔马林固定液固定24h,然后水洗24h,再切成1cm×1cm×0.5cm大小的组织块,然后进入脱水、透明、浸蜡、包埋、切片过程,制成石蜡切片。制成的石蜡切片用苏木素一伊红染色法染色,最后封固贴签。
6.3 观察 取脾、淋巴结、肝组织切片于10×20、10×40倍显微镜下观察。
6.3.1 脾 脾组织结构紊乱,髓质、皮质界限不清,弥漫性的分布着成淋巴细胞和淋巴样细胞,尤以小动脉和小梁动脉周围细胞数量密集更多,瘤细胞形态为胞浆少,核呈卵圆形、圆形和四边形,核膜明显,染色质散在或呈团块状,核仁明显,核分裂相多见;脾组织内少见网状细胞,偶见巨噬细胞,多处可见大小不等的粉红色、无结构的坏死组织构成的坏死灶。
6.3.2 淋巴结 肿瘤细胞呈弥漫性增生,瘤细胞形态与脾组织的相似。
6.3.3 肝脏 瘤细胞主要在汇管区周围分布,有的中央静脉周围亦有瘤细胞分布。
7 诊断结果
7.1 病犬临床症状表现为消瘦、贫血、腹围增大,触诊腹腔内有坚实肿物感,抗生素治疗无效,判断该病为慢性消耗性疾病。
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