由于痢菌净在386、242 和243. 2 nm 有最大吸收,而甲氧苄胺嘧啶在386 nm的波长处无吸收,因此在此波长下对痢菌净不造成测定干扰,可直接用单波长分光光度法测定。甲氧苄胺嘧啶在272 nm有稳定的最大吸收,但痢菌净在此处有干扰,此波长为测定波长Al ,以369 nm为参比波长A2 ,使得痢菌净在两波长处的有吸光度AA = A272 :2A369 = 0 ,可完全排除痢菌净的干扰。辅料基本无吸收。采用该法,痢菌净的浓度C 与吸光度A 的相关系数r 为0. 999 0 ,平均回收率为99. 2 %,变异系数为0. 44 %。为了促进动物的生长,将喹喔啉二氧化物类兽药(主要是喹乙醇) 制成中西复方制剂,对该类制剂中喹乙醇的测定文献报道较多,主要是高效液相色谱法、薄层色谱法、导数分光光度法和等吸收分光光度法。由于中药成分的复杂性,因此在检测时都首先进行了专属性考察以保证测定的准确性。

　　3 　饲料中药物的检测
喹喔啉1 ,4-二氧化物类药物通常作为饲料添加剂使用,为了防止过量添加此类药物而引起对动物甚至人类的危害,检测其在饲料中的含量就显得尤为重要,这方面的研究报道较多。由于饲料中药物的分析属微量分析的范畴,对分析方法的灵敏度要求高。导数光谱在改善分析的选择性、提高灵敏度及消除背景干扰等方面具有独特的优点,因此周鸿志等研究使用导数分光光度法直接测定饲料中的喹乙醇的条件,饲料经蒸馏水提取喹乙醇后,直接以二阶导数光谱定量,提出喹乙醇二阶导数光谱扫描波长范围340～420 nm,实际样品测定时,以375～360 nm 区间的峰谷高度定量效果更佳。笔者用本法对多种饲料样品进行了测试,得到了满意的结果:方法回收率和相对标准偏差RSD 依次为98 %～104 %和3 %～0. 3 %。除此之外,国内对饲料中药物的检测以高效液相色谱法居多, 如欧阳华学等建立了高效液相色谱法测定饲料中喹乙醇含量的方法:饲料用甲醇- 水提取,在380 nm波长下检测,色谱柱为NOVA - PAK C18 (3. 9 mm ×150 mm,4 mm) ,流动相为甲醇- 水(体积比为10∶90) ,流速为1. 0 ml/ min ,喹乙醇质量浓度在2. 5～20. 0 mg/ ml 范围内与峰面积呈良好线性关系,相对标准偏差为1. 2 %～1. 6 %,回收率为97 %～101 %。国外在20 世纪70～80 年代就有这方面的文献报道。Fernando Jorge Dos Ramos 等采用柱色谱法同时测定猪饲料中的卡巴氧和喹乙醇,以四氯化碳- 二甲基甲酰胺(80∶20) 作溶剂提取药物,提取液中加入水并离心,取水层注入反相色谱柱中,采用梯度洗脱,紫外检测,分别选取波长306 和262 nm,在20～50 mg/ kg 水平下,卡巴氧的回收率达(92 ±9) %、喹乙醇的回收率为(93 ±6) %。SHIH -YUHLIN 等[40]运用液相色谱法同时测定饲料中的卡巴氧、喹乙醇、呋喃唑酮和硝基呋喃。本法采用C8 硅胶柱,以乙腈-水作流动相梯度洗脱,所有被测药物的线性回归曲线的相关系数均大于0. 999 ,在高中低3 种浓度下,4 次进样所得峰面积的相对标准偏差均小于3. 0 %。样品前处理时首先选用水作样品提取溶剂,后以95 %二甲基甲酰胺溶液室温下提取过夜,提取液用氧化铝柱净化。样品回收率都达90 %以上。
2001 年,国际上制定了饲料中卡巴氧的高效液相色谱检测方法,该方法的定量限为0. 5 mg/ kg ,检测限为0. 1 mg/ kg。近几年,由于接口技术的成熟,液质联用技术发展很快并已应用于饲料检测,C.Van Poucke 等[42]采用液质联用的方法测定了饲料中的喹乙醇的含量,既提高了灵敏度又提高了准确度,该方法的检测限小于0. 1 mg/ kg中国兽药114网。

　　4 　药物残留的检测
除喹烯酮外,其他几种喹喔啉1 ,4-二氧化物类兽药都有一定的残留毒性,1999 年,欧共体禁止在动物饲料中使用包括喹乙醇、卡巴氧。为了保证人类的安全,国内外都相当重视这类药物的残留检测。残留检测与上述各类药物分析相比有其自身的特点:样品基质复杂,待测药物含量低和需要繁琐的样品前处理过程,属于复杂基质中痕量组分的分析技术。我国分别制定了出口肉中卡巴氧和喹乙醇残留检测的行业标准,标准规定了出口肉中卡巴氧和喹乙醇残留量检验的抽样、制样和液相色谱测定方法。标准适用于出口鸡肉、猪肉、羊肉、兔肉中卡巴氧和喹乙醇残留量的检验。农业部于2003 年1 月22 日发布第236 号公告,发布动物性食品中卡巴氧标示残留物检测方法———高效液相色谱法。本标准规定了动物性食品中卡巴氧的标示残留物喹喔啉-2-羧酸(QCA) 残留量检测的制样和高效液相色谱测定方法。本方法在猪的肌肉、肝脏和肾脏组织中的检测限为l5μg/ kg ,在l5μg/ kg 添加浓度下回收率为70 %～l10 %。标准适用于猪的肌肉、肝脏和肾脏组织中卡巴氧标示残留物残留量检测。