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美国 SHIC资助研究伪狂新PCR检测方法


    早期发现和了解伪狂犬病病毒的来源对于控制疫病传播和降低经济损失至关重要。美国伪狂犬病病毒监测现在依赖于抗体检测。然而,早期反应需要具有核酸检测(PCR)以便能够在发送给兽医诊断实验室的临床组织中检测病毒。

    美国国家动物卫生实验室网络兽医诊断实验室目前不具备通过验证的PCR检测临床组织中伪狂犬病病毒的直接能力。当发现这种情况时,猪健康信息中心(SHIC)与国家猪肉委员会、养猪协会合作,为研究检测方法的行动奠定了基础。在猪健康信息中心的资助下开发的新PCR检测方法具备实用性,可以从中国的伪狂犬病变异毒株中辨别出经典的伪狂犬病病毒,从而增强猪肉行业快速有效应对的能力。

    当猪健康信息中心监测和分析工作组的一名成员对兽医诊断实验室无法对伪狂犬病病毒进行经过验证的PCR测试表示关注时,就代表猪肉行业开始采取行动。猪健康信息中心与美国猪兽医协会、国家猪肉委员会和国家猪肉生产者委员会协调,与国家动物卫生实验室网络和国家兽医服务实验室联系,开展讨论并收集信息。他们证实国家动物卫生实验室网络实验室目前没有经过验证的伪狂犬病病毒PCR检测。

    猪健康信息中心随后与国家猪肉委员会猪健康委员会分享了这一信息,该委员会通过了一项决议,要求美国农业部为国家动物卫生实验室网络实验室提供伪狂犬病病毒感染和暴发的可能性分析。委员会认为有必要迅速发现新出现的或新引入的猪病,以便有效应对,委员会还注意到,2004年宣布净化伪狂犬病,当停止接种该病疫苗时,猪群易受伤害。中国的伪狂犬病病毒毒株与美国根除的毒株不同,于2011年在亚洲出现,导致猪群出现较高的发病率和死亡率。伪狂犬病病毒也被证明能够在从中国运来的饲料成分中存活下来,这也是疫病在美国传播的潜在途径。在决议中,委员会表示,准备工作存在合理性和紧迫性,并要求提供用于伪狂犬病病毒DNA检测的试剂,确保其可靠的测试能力,验证其可用于猪口腔液的检测使用。

    2016年,猪健康信息中心在加拿大曼尼托巴省温尼伯国家外国动物疾病中心资助下,开发了能够区分伪狂犬病病毒株的PCR试验,可区分中国流行的高变异毒株、美国已根除的毒株以及还存在于美国野猪体内的毒株。新开发的伪狂犬病病毒测定具有高度敏感性和特异性,能够在样品中检测低至一种感染性伪狂犬病病毒,同时可辨别变异毒株和经典毒株。

    在堪萨斯州立大学兽医诊断实验室和美国农业部国家兽医服务实验室,该试验在鼻拭子、口腔拭子、全血、血清和组织中均进行了验证。通过测试从加拿大和美国牛群收集的300多种临床样品(血清,组织和拭子)进一步证实了该测定的特异性。

    该PCR测试使用实验室和临床样本进行验证,并将提交给国家动物卫生实验室网络,供其技术工作组考虑分发给实验室。虽然这是一个逐步的过程,但猪健康信息中心通过研究伪狂犬病病毒PCR检测并对此漏洞采取行动,对提升养猪行业应对潜在威胁的能力具有积极意义。

    在高发病、持续发病率或高死亡率的疫情中,如果未发现病因或者确定所确诊的病因不是爆发的可能原因,在初始诊断检查完成并由养殖场主支付费用后,猪健康信息中心继续提供诊断费支持。对进一步诊断检查费用的额外支持可能有助于识别新引入或新出现的猪病。

    郝祖慧编译文章来源SwineHealth

    InformationCenter


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