温度是胚胎发育的首要条件，必须严格而正确地掌握。优质土鸡种蛋的孵化温度具体如下：
一般情况下，鸡胚胎适宜的温度范围为37.8-38.2℃。孵化温度超过42℃，经2-3小时以后即造成胚胎死亡；如温度低至24℃，经30小时胚胎便全部死亡。
通常立体孵化器孵化鸡种蛋的温度范围为36.9-37.8℃，但在胚胎发育的不同阶段，对温度的要求有差异。使用立体孵化器孵化鸡蛋时，温度要求是：孵化前期37.8℃；孵化中期37.4℃；孵化后期37.1-37.2℃。
在孵化实践中，孵化温度还受孵化机类型、性能、种蛋类型以及外界气温等因素的影响，需视具体情况，加以灵活掌握。在使用各种型号机时，应按说明书规定的温度施温，用过使用验证，予以调整，确定适宜的孵化温度。肉用型的种蛋比兼用、蛋用型的大，蛋壳也较厚，温度要求稍高些。根据现代孵化室的要求，室温要控制在10-20℃之间，而目前许多孵化室室温随季节气温变化而变化，从而影响机内温度。一般以室温18-20℃、机温37.8℃为基础，如室温变化范围在12-32℃之间，机内温度相应升降0.19-0.56℃。