近年来,我国香菇生产发展迅速,尤其以代料栽培香菇较为突出。传统的香菇固体制种技术经过较为繁锁的母种、原种、栽培种的三级培育,最后才能扩大到栽培袋的生产。其劳动强度之大、工艺之繁锁、杂菌污染率之高、生长周期之长等都大大制约了香菇的发展。本实验以6个香菇菌株的液体菌种进行培养和栽培对比,为香菇液体菌种的推广应用提供一定的理论依据。
1 材料与方法
1.1 供试菌株 L135(华中农业大学)、L939(华中农业大学)、L241-4(信阳农专食用菌实验室)、L103(西峡县农丰菌业公司)、L9608(河南省农科院)、L9015(河南省科学院生物研究所)。
1.2 培养基配方 ①液体培养基(CYM):蛋白胨2g,酵母膏2g,硫酸镁0.5g,磷酸二氢钾0.46g,磷酸氢二钾1.0g,葡萄糖20g,琼脂20g,蒸馏水1000mL。②栽培培养基:木屑77%,麸皮10%,米糠10%,蔗糖0.7%,磷酸二氢钾0.3%,石膏1%,生石灰1%。含水量55%~60%。
1.3 液体菌种培养方法 将不同的香菇菌株分别接入斜面培养基,在(25±1)℃的条件下培养9d,待菌丝长满斜面后,再分别转入液体培养基内,每瓶接种量为0.5平方厘米菌丝3块,每个处理(配方)重复3瓶。25℃静止培养48h、然后在转速为120r/min、温度为(25±1)℃的条件下振荡培养6d,瓶内产生许多细小而稠密的菌丝球时终止培养。
1.4 液体菌种菌丝体的营养成分测定 六个香菇菌株接入液体培养基内,每瓶100mL培养液接0.5平方厘米菌丝块,重复5瓶,终止培养后,将发酵成熟的培养液用60目筛过滤,收集各菌株的菌丝体和滤液,菌丝体用蒸馏水清洗2次,60℃烘干至恒重,用电子天平称菌丝体干重计算生物量。pH值用精密 pH试纸测定。
1.5 液体菌种培养特性比较 本试验采用栽培袋的规格为 55cm×15cm×0.045cm,每袋装干料1.5kg,接种后置低温20~25℃条件培养,每品种20袋。菌丝开始萌发时,用直尺测量菌丝生长速度。菌丝满袋后移入菇房脱袋出菇,并对出菇特性进行对比。
2 结果与分析
2.1 不同香菇菌株液体菌种菌丝体生物量和菌液pH值测定
将6个香菇菌株接入同一配方的液体培养基内,每瓶装100mL培养液,每个处理重复5次,培养结束后,测定不同香菇菌株之间菌丝体的干重和初、终pH,其结果见表1。
表1 不同香菇菌株之间生物量(mg/mL)及pH
品种 菌丝干重 初始pH 终止pH pH值变化值
L9608 16.7 6 4.2 1.8
L241-4 16.4 6 4.2 1.8
L939 9.7 6 3.9 2.1
L135 9.9 6 3.9 2.1
L9015 8.9 6 4.2 1.8
L103 7.8 6 3.9 2.1
从表1可见,6个香菇菌株的菌丝干重以L9608和L241-4较高。结果说明这两个菌株在液体培养基中,对各种营养物质分解利用较快,利于菌丝吸收、生长和活力的提高,适宜液体培养。而其他4个菌株菌丝干重较低,说明该菌株不适宜液体培养。6个香菇菌株的pH值变化范围不大。
2.2 不同菌株菌丝在料袋内生长情况 将6个香菇菌株的液体菌种接种在相同配方的栽培料上,采用大小相同规格的栽培袋,每袋装料相同,接种后置20~25℃条件下培养,以10d为区间,用直尺测定每袋菌丝生长速度,并计算平均值。其菌丝生长情况,结果见表2。
表2 不同菌株在菌袋内菌丝生长情况 (mm)
菌丝生长 L9608 L9015 L103 L939 L241-4 L135
菌丝长速 32.19 28.72 27.14 29.32 32.30 31.28
36.87 27.63 28.32 28.26 37.43 29.33
31.64 35.28 29.24 34.34 30.30 27.29
平均值 33.57 30.55 28.23 30.64 33.34 29.30
注:以上为10日测定值。
从表2可见,6个香菇菌株在应用于栽培时,L103、L135、L939、L9015四个菌株抵抗力相对较弱,菌丝生长慢。L9608、 L241-4菌丝生长速度相对较快,污染相对较低。L9608菌丝生长最快,10日均值为33.57mm,L103菌丝生长最慢,说明各菌株菌丝生活力有一定差异。
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