近年来,我国香菇生产发展迅速,尤其以代料栽培香菇较为突出。传统的香菇固体制种技术经过较为繁锁的母种、原种、栽培种的三级培育,最后才能扩大到栽培袋的生产。其劳动强度之大、工艺之繁锁、杂菌污染率之高、生长周期之长等都大大制约了香菇的发展。本实验以6个香菇菌株的液体菌种进行培养和栽培对比,为香菇液体菌种的推广应用提供一定的理论依据。
1 材料与方法
1.1 供试菌株 L135(华中农业大学)、L939(华中农业大学)、L241-4(信阳农专食用菌实验室)、L103(西峡县农丰菌业公司)、L9608(河南省农科院)、L9015(河南省科学院生物研究所)。
1.2 培养基配方 ①液体培养基(CYM):蛋白胨2g,酵母膏2g,硫酸镁0.5g,磷酸二氢钾0.46g,磷酸氢二钾1.0g,葡萄糖20g,琼脂20g,蒸馏水1000mL。②栽培培养基:木屑77%,麸皮10%,米糠10%,蔗糖0.7%,磷酸二氢钾0.3%,石膏1%,生石灰1%。含水量55%~60%。
1.3 液体菌种培养方法 将不同的香菇菌株分别接入斜面培养基,在(25±1)℃的条件下培养9d,待菌丝长满斜面后,再分别转入液体培养基内,每瓶接种量为0.5平方厘米菌丝3块,每个处理(配方)重复3瓶。25℃静止培养48h、然后在转速为120r/min、温度为(25±1)℃的条件下振荡培养6d,瓶内产生许多细小而稠密的菌丝球时终止培养。
1.4 液体菌种菌丝体的营养成分测定 六个香菇菌株接入液体培养基内,每瓶100mL培养液接0.5平方厘米菌丝块,重复5瓶,终止培养后,将发酵成熟的培养液用60目筛过滤,收集各菌株的菌丝体和滤液,菌丝体用蒸馏水清洗2次,60℃烘干至恒重,用电子天平称菌丝体干重计算生物量。pH值用精密 pH试纸测定。
1.5 液体菌种培养特性比较 本试验采用栽培袋的规格为 55cm×15cm×0.045cm,每袋装干料1.5kg,接种后置低温20~25℃条件培养,每品种20袋。菌丝开始萌发时,用直尺测量菌丝生长速度。菌丝满袋后移入菇房脱袋出菇,并对出菇特性进行对比。
2 结果与分析
2.1 不同香菇菌株液体菌种菌丝体生物量和菌液pH值测定
将6个香菇菌株接入同一配方的液体培养基内,每瓶装100mL培养液,每个处理重复5次,培养结束后,测定不同香菇菌株之间菌丝体的干重和初、终pH,其结果见表1。
表1 不同香菇菌株之间生物量(mg/mL)及pH
品种 菌丝干重 初始pH 终止pH pH值变化值
L9608 16.7 6 4.2 1.8
L241-4 16.4 6 4.2 1.8
L939 9.7 6 3.9 2.1
L135 9.9 6 3.9 2.1
L9015 8.9 6 4.2 1.8
L103 7.8 6 3.9 2.1
从表1可见,6个香菇菌株的菌丝干重以L9608和L241-4较高。结果说明这两个菌株在液体培养基中,对各种营养物质分解利用较快,利于菌丝吸收、生长和活力的提高,适宜液体培养。而其他4个菌株菌丝干重较低,说明该菌株不适宜液体培养。6个香菇菌株的pH值变化范围不大。
2.2 不同菌株菌丝在料袋内生长情况 将6个香菇菌株的液体菌种接种在相同配方的栽培料上,采用大小相同规格的栽培袋,每袋装料相同,接种后置20~25℃条件下培养,以10d为区间,用直尺测定每袋菌丝生长速度,并计算平均值。其菌丝生长情况,结果见表2。
表2 不同菌株在菌袋内菌丝生长情况 (mm)
菌丝生长 L9608 L9015 L103 L939 L241-4 L135
菌丝长速 32.19 28.72 27.14 29.32 32.30 31.28
36.87 27.63 28.32 28.26 37.43 29.33
31.64 35.28 29.24 34.34 30.30 27.29
平均值 33.57 30.55 28.23 30.64 33.34 29.30
注:以上为10日测定值。
从表2可见,6个香菇菌株在应用于栽培时,L103、L135、L939、L9015四个菌株抵抗力相对较弱,菌丝生长慢。L9608、 L241-4菌丝生长速度相对较快,污染相对较低。L9608菌丝生长最快,10日均值为33.57mm,L103菌丝生长最慢,说明各菌株菌丝生活力有一定差异。
2.3 不同菌株出菇情况 各菌株栽培试验结果见表3。
表3 不同菌株的出菇特征 (单位:g、%)
菌株 出菇早晚 出菇特性 菇盖大小 柄长 子实体颜色 总产量 生物效率 位次
L241-4 中 单 中-大 中 黄褐色 23952 79.42 2
L9608 中 单 中 短 浅褐色 23955 79.83 1
L939 中 单 中 短 褐色 20601 68.67 1
L135 早 单/丛 中 中 茶褐色 20958 69.86 4
L9015 中早 单/丛 小 短 浅褐色 21426 71.42 3
L103 早 单 大 小短 褐色 19725 65.76 6
平均值 21769 72.33
从表3可以看出6个香菇菌株中L241-4、L939、L9608出菇晚,属晚熟型菌株。产量最高为L9608,其次为L241-4;生物学效率,L9608>L241-4>L9015>L135>L939>L103。
3 讨 论
本试验通过对6个香菇菌株的液体菌种栽培特性进行分析,可看出,6个菌株中以L9608、L241-4两个菌株菌丝活力、生长势以及抗杂力等方面具有一定优势,适宜于液体菌种代料栽培。对于同一菌株在不同温度等生态因子条件下的培养特性和出菇特性及其产量的对比还需进一步试验。
注:在实验过程中得到华中农业大学吕作舟教授的大力支持,深表谢意。
|