一、同期发情技术
同期发情又叫做同步发情或发情控制技术。它是利用某些激素人为地控制并调整若干(供、受体)母牛在一定时间内集中发情,它可以对受控制的母牛不经过发情检查即在预定时间内同时受精。
现行的同期发情技术有两途径,都是通过控制黄体――延长或缩短其寿命,降低孕酮水平,使母牛摆脱孕激素控制的时间一致,从而导致卵泡同时发育,达到同期发情的目的。
同期发情的处理方法主要有:
1.孕激素处理:孕激素处理是人为地造成黄体期,控制发情。母牛处理一定时间后,同时停药即可引起母牛发情,此类孕激素包括孕酮及其合成类似物,如甲孕酮、炔诺酮、氯地孕酮、18―甲基炔诺酮等。投药方式有阴道栓塞,皮下埋植等。
2.前列腺素(PG)及其类似物处理,前列腺素处理是溶解卵巢上的黄体,中断周期黄体发育,使牛同期发情。
由于前列腺素如氯前列烯醇等仅对卵巢上有功能性黄体的母牛起作用,而对群体来说,黄体存在于发情周期的各个阶段,所以必须间隔11天后再用药1次,才能使群体达到同期化。前列腺素的投药方式有肌注、宫腔或宫颈注入。
二、胚胎移植技术
胚胎移植是对经超数排卵处理的供体母牛,用手术或非手术手段从其输卵管或子宫内取出若干早期胚胎,移植到经过同期发情处理的另外一群受体母牛的相同部位,以达到产生供体牛后代的目的。
1980年英国剑桥大学的科学家Water Heap从安哥拉母兔上取出4细胞期的2枚胚胎移植到比利时兔的输卵管内获得成功。1951年胚胎移植在牛上获得成功。我国胚胎移植技术起步较晚,最早开始于1973年,1978年在牛上胚胎移植获得成功。目前国外鲜胚移植妊娠率可达60%以上,我国鲜胚移植受胎率可达50%~60%,冻胚为40%~45%。
(一)超数排卵
超数排卵简称超排,指在母牛发情周期的适宜时间,用促性腺激素处理母牛,使卵巢比在自然情况下有较多的卵泡发育并排出多个有受精能力的卵子。超排技术的应用,可充分发挥优良种母(供体)牛的作用,加速牛群改良,同时也是胚胎移植的重要环节。
1. 常用的超排处理方法:
(1)PMSG+PGF2α法在性周期第8~12天内1次肌注PMSG 2000~3000IU(老年牛剂量可大大一些),48小时后肌注PGF2α15~25毫克或子宫灌注2~3毫克,以后的2~4天内,多数母牛发情,但PMSG不宜PGF2α同时注射,否则会导致排卵率降低。
(2)FSH+PGF2α法在性周期第8~12天内1次肌注FSH每日2次,连注3~4天,总剂量30~40毫克(第一次用量稍多,以后逐日降低),在第五次注射的同时,注射PGF2α15~25毫克。在有必要的情况下,可在牛发情后肌注GnRH(LRH-A2或LRH―A3)200~300微克。
(3)促排卵类药物经超排处理的供体,卵巢上发育的卵泡数要多于自然发情的卵子数,仅依靠内源性促排卵激素不能达到超排目的。因此,在供体母畜出现发情时,需要静脉注射外源性hCG或GnRH、LH等,以增强排卵效果,减少卵巢上残余的卵泡数。
(4)孕激素如用孕激素作超排预处理,可以提高母牛对促性腺激素的敏感性。
超排处理的时期应选择在发情周期的后期,即黄体消退时期,此时卵巢正处于由黄体期向卵泡期过渡。
2.提高反复进行超排处理的措施
超排应用的PMSG、HCG、FSH及LH均为大分子蛋白质制剂,对母牛作反复多次注射后体内会产生相应的抗体,使卵巢的反应逐渐减退,超排效果也随之降低。
(1)增加药物的剂量在第二次超排处理时,可将促性腺激素的剂量加大,以到达正常的超排处理。
(2)间隔一定时间处理母牛每进行一次超排处理,使卵巢经历一次沉重的生理负担,需经一定时期才能恢复正常的生理机能。所以,在给供体体母牛作第二次处理的间隔时期应为60~80天,第三次处理时间则需长到100天,在每一次冲取胚胎结束后,应向子宫内灌注PGF2α以加速卵巢的恢复。
(3)更换激素制剂当连续两次使用同一种药物进行处理时,为了保持卵巢对激素的敏感性,可以更换另一种激素进行超排处理,以获得较好效果。
(二)胚胎移植
1.胚胎移植的意义
(1)通过胚胎移植可以充分发挥优良母畜的繁殖潜力,使优良供体免去很长的怀孕期,缩短繁殖周期,生产更多的优秀后代个体。2)利用超数排卵,一次可获得更多的优良胚胎缩短世代间隔,及早进行后裔测定。
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