2.1.2病原菌鉴别试验挑取纯化培养物接种于玉米吐温80培养基,葡萄糖蛋白胨水、营养肉汤。TCTA培养基显色试验,参照文献[3]中方法。牙管试验,参照文献[4]中的方法。荧光染色,参照文献[5]中的方法。厚壁孢子试验,用小培养法。
2.2药敏试验与治疗?
按照Kirby-Bauer琼脂扩散法操作[6] ,将标准药敏纸片和自制药敏纸片无菌操作贴于涂有病原菌的普通营养琼脂培养基上。选择敏感药乳房内灌注,治疗一个疗程后,根据病牛的表现情况再增加治疗疗程。?
3结果?
3.1培养特性?
普通培养基上生长良好,培养48 h后菌落为乳白色,圆形凸起,表面光滑湿润。继续培养2 d后菌落变大,仍为乳白色。沙堡罗氏培养基上培养24 h后已长出,但菌落较小,继续培养3 d后,菌落变大为乳白色圆形菌落,表面光滑。玉米吐温80培养基培养基上,为乳白色圆形隆起,表面光滑。革兰氏染色镜检,可见卵圆形、瓜子形的革兰氏阳性菌。?
3.2鉴别试验?
在10 mL/L吐温?80玉米琼脂上镜检可见到假菌丝、厚壁孢子。葡萄糖蛋白胨水、营养肉汤静置培养均无菌膜生长,菌体乳白色、沉于管底,上层液体澄清。芽管试验,可见到明显的牙管。TCTA培养基上培养24 h出现红色,培养48 h红色加深,镜检见到假菌丝,厚壁孢子。吖啶橙染色,荧光显微镜下可见黄绿色菌体。?
3.3药敏试验?
洁霉素、麦迪霉素、卡那霉素、丁氨卡那霉素、四环素、妥布霉素、庆大霉素、新霉素、红霉素、羧苄青霉素、万古霉素、氟哌酸、头孢哌酮、头孢呋新、呋喃妥因、宫乳康、乳炎必治、多黏菌素B、氯林可霉素等均无抑菌作用;盐酸多西环素为中度敏感(抑菌直径18 mm);酮康唑为高度敏感(抑菌直径30 mm)。?
3.4治疗结果 ?
使用敏感药酮康唑乳房内注射进行治疗后,症状明显减轻,精神状况明显好转,日产奶量回升至15 kg~25 kg,但仍未回复到患乳房炎前的日产奶量?40 kg。??
4 讨论?
4.1病原学鉴定表明该乳房炎是由白色假丝酵母菌引起的或者是最初由细菌感染引发的乳房炎,经抗生素治疗后,细菌被杀灭或被抑制,而抗生素对酵母菌性乳房炎病原菌无效,畜主连续使用抗生素或联合使用抗生素更有利于酵母菌的感染。?
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