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奶牛流产胎儿弯曲菌的分离鉴定


2.1 涂片镜检结果 用病料直接涂片,以科兹洛夫斯基氏染色后,未见红色球状或短杆状细菌。病料及纯培养物革兰氏染色涂片镜检均可见逗点形、S形、海鸥展翅形和少数螺旋形的无芽孢革兰氏阴性杆菌。

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2.2 分离培养结果 在需氧、厌氧、10% CO2培养条件下均未见疑似细菌生长;但在含85% N2、10% CO2和5% O2的微需氧条件下25℃培养48h后,血琼脂培养基、巧克力培养基上均可见光滑、圆形、半透明、微隆起、直径1mm的黄褐色菌落。菌落不溶血,经纯培养后,菌落呈薄膜状融合生长。?

2.3 细菌鉴定结果

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2.3.1 呼吸需求试验结果 分离菌株在需氧和10% CO2条件下37℃培养48h,均未见生长;但在85%氮气、10% CO2和5% O2的微需氧条件下25℃培养48h,生长良好。

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2.3.2 生长试验结果 分离菌株在微需氧条件下25℃生长,42℃不生长;在含1%甘氨酸、3.5% NaCl、1%胆汁的巯基乙酸肉汤中不生长。

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2.3.3 运动力检查结果 镜检可见菌体运动性很强,多呈螺旋运动,少数为快速投镖式运动。

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2.3.4 生化试验结果 分离菌株氧化酶和过氧化氢酶阳性;在三糖铁培养基上不产生H2S,醋酸铅纸条法产生H2S;不还原亚硝酸盐;不水解马尿酸钠;不水解七叶苷,不使苯丙氨酸脱氨,不利用丙二酸盐;在含1%甘氨酸、3.5% NaCl、1%胆汁的巯基乙酸肉汤中不生长;在微需氧条件下,25℃生长,42℃不生长。?

2.4 药敏试验结果 对分离菌株进行药敏试验结果:卡那霉素、红霉素、恩诺沙星、丁胺卡那霉素、洛美沙星、庆大霉素、氟哌酸、环丙沙星、萘啶酮酸和头孢噻吩高敏;青霉素、链霉素中敏;复方新诺明、四环素不敏感。?

2.5 动物感染试验结果

小鼠经尾静脉和腹腔接种后观察1周,均无发病和死亡。鸡胚接种试验中,接种细菌原液的鸡胚均于24h死亡,其头和爪有少量出血;接种5倍稀释菌液的鸡胚有1枚于接种24h后死亡,头、腿有明显出血,其余3枚于接种24h以内死亡;接种10倍稀释菌液的鸡胚和对照鸡胚均正常。?

3 讨论

3.1 本试验在85% N2、10% CO2和5% O2的微需氧条件下分离获得了革兰氏染色阴性菌,呈逗点形、S形和螺旋形;螺旋式或投标式运动;氧化酶及过氧化氢酶阳性;在25℃及37℃微需氧条件下生长良好;在三糖铁培养基上不产生H2S,醋酸铅纸条法产生H2S;不


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