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接种鸡卵黄液防治鸭病毒性肝炎试验


    鸭病毒性肝炎(DVH)主要是3~20日龄的雏鸭发病,临床症状以发病急、死亡快,死前呈角弓反张姿态和病鸭肝脏肿胀,表面有出血斑点为病变特征的病毒性传染病。我县年出栏肉鸭2000万只以上,鸭群DVH发病率高,死亡多,经济损失很大。笔者试用鸡作为免疫蛋源,制备DVH卵黄抗体,临床试用效果良好,兹介绍于下。

    1 试验材料与方法

    1.1 高产蛋鸡的选择

    选择健康高产母鸡30只,隔离饲养,加强饲料营养和预防细菌感染,观察1周,正常时即接种疫苗。

    1.2 DVH弱毒疫苗

    由江苏农科院近期生产,-15℃冷冻保存。

    1.3 DVH肝组织上清液油剂灭活苗制备 1.3.1制水相:无菌手法,取新鲜且具有DVH典型病变的肝脏,除去胆囊、称重、剪碎,按1∶3比例,用生理盐水稀释捣碎装入瓶中,加双抗,置冰箱反复冻融3次,离心,取上清,再加入肝组织,按上述方法处理,取其上清液(保留200ml冻存备用),加0.5%福尔马林(分析纯)混匀,于37℃条件下灭活24h,即可达到灭活目的,再加入4%吐温~80,高速搅匀5min,装瓶,即为水相。

    1.3.2制油相:取10号白油和司本DA96∶4混合加入2%硬脂酸铝,高压灭菌后即为油相。

    1.3.3制油苗:以油相与水相3∶1;的比例,先高速搅匀油相3min,然后逐渐加入水相,边加边混,至加完水相后再高速 (10000转/min)搅拌3min,检验:静置72h或3000转/min离心不分层,判为合格。

    1.4 卵黄抗体的制备

    1.4.1准备高免蛋:将DVH弱毒苗,用生理盐水稀释,每只以2倍量饮水接种疫苗,之后,于第10d和20d分别接种上述DVH油剂灭活苗2ml和4ml,注射后25d开始留蛋,留取20d的高免蛋,消毒备用。

    1.4.2制备孵黄抗体:将消毒过的高免蛋无菌法分离出卵黄,按1∶3比例用生理盐水稀释,匀浆过滤,加双抗冷冻保存。

    2 安全试验和保护试验

    2.1 安全试验

    给5日龄雏鸭颈背部皮下注射卵黄抗体1~2ml,隔离饲养观察10d,其精神、食欲、粪便均无明显异常。

    2.2保护试验

    随机抽出5日龄雏鸭20只,其中10只为试验组,另10只为对照组。2组均皮下注射上述肝组织上清液0.5ml,分别隔离,同条件下饲养。24h后对试验组,皮下注射卵黄抗体1ml,饲养观察14d。

    2.3 结果

    试验组的雏鸭均健活。而对照组雏鸭分别于接种肝毒液后,于第4、5d,分别死亡4只和5只,余1只,精神不振,食欲减退,仅能饮少量水,至第9d衰弱而死,死亡率100%。实验组由于注射了卵黄抗体而获得了保护,相对于对照组,保护率100%。

    3 防治效果

    3.1 预防

    我县安国镇张某,养肉仔鸭每批2000只,而每批都发生过DVH,死亡10%以上,用其他药物防制、效果不够理想,使用我们提供的卵黄抗体预防,3~5日龄雏鸭皮下注射卵黄抗体1ml/只,于10d后再注射1次,照和此方法预防3批,均未发病。

    3.2 治疗

    2003年4月13日上午,朱寨镇孙某饲养的1500只13日龄肉鸭发生了死前背头症状、剖检肝脏具有明显的出血斑点,胆囊肿大,肾脏充血,呈斑驳状,胰脏肿大,临床诊断DVH病,已死亡12只,即用卵黄抗体皮下注射2ml,当天死亡21只,次日早上即停止死亡。之后对王店村刘某等4户所养的6400多只雏肉鸭DVH病进行了治疗,也获得较满意的效果。

    4 讨论

    4.1 给鸡接种鸭DVH肝毒油剂灭活苗,强化免疫,能获得相应特异性卵黄抗体,防治鸭DVH病,具有良好的效果,也能避免应用同源蛋黄液可能带来的疫病传播。

    4.2 对于卵黄抗体和肝组织上清液的效价,可进行中和试验等方法检测,但受条件限制,未能测定,有待进一步试验。


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