2.2.2 融合细胞的电刺激活化 细胞活化常用不同时长的直流方波。核移植过程中的电刺激活化对细胞融合必不可少也十分有效。Collas的研究显示成熟的卵母细胞活化效率比较高。活化效率与电场强度和脉冲时间无关，却与脉冲波形有关。非均一的电场能得到较高的活化效率。最佳的电场强度依赖电极间隙。脉冲数以及脉冲之间的间隔增加都可提高活化效率[14]。

3、供核来源不同的核移植

3.1 以胚胎为基础的核移植 由核移植产生的哺乳动物胚胎克隆涉及8-64个细胞胚胎的其中一个细胞与去核的成熟卵母细胞之间的融合。Ilmense 和Hoppe于1981年首次报道了产生成活个体的核移植[15]。他们的研究没有被重复出来，但却产生了效率更高的核移植技术[16]。许多物种成功的核移植实验都使用了电融合技术。 Li Meng和Don Wolf把这一技术应用于灵长类于1997年发表了克隆恒河猴的实验研究结果[17]。他们的工作为基因治疗提供了有效的动物模型。

3.2 以胚胎和初生动物细胞系为基础的核移植 应用胚胎分裂球作为细胞核供体有许多限制。如何产生合适的胚胎细胞是个瓶颈，而且分离的分裂球难以在体外进行遗传操作，使得克隆之前无法有效地向其转移基因。因此许多学者从事发展基于胚胎或初生动物细胞系的核移植策略。 1996年位于苏格兰的Ian Wilmut研究小组报告他们利用细胞系获得转基因绵羊的结果[18]。用于核移植的细胞系来自于胚胎，已经在体外培养了6-13代，在移植之前用血清饥饿法诱导其停止生长。1997年利用转染人IX因子基因的绵羊羊胎纤维母细胞获得的核移植绵羊克隆获得成功[19]。 Cibelli, Stice and Robl首次报告了使用永生化的胎牛纤维母细胞作为细胞核供体获得的克隆转基因奶牛。他们的工作首次证明活跃分裂的细胞在进行细胞核移植以后可以继续发育[20]。

3.3 以分化成熟细胞为基础的核移植 应用细胞系的核移植研究为分化成熟细胞的克隆扫除了障碍。Ian Wilmut于1997年报告了第一只来自分化成熟细胞的动物克隆---绵羊多利[21]，这一成果震动了整个世界。为多利提供细胞核的是一只成年绵羊的乳腺上皮细胞，同样应用了血清饥饿诱导法处理细胞。 此后不断有应用体细胞作为细胞核供体获得克隆动物的报告[22-24]，证明了多利的技术路线确实是可行的。

4、电穿孔设备的性能

早期电穿孔设备的波形和时间都是固定的，使用不便且效果差。20年来的发展使得设备本身和附件的技术水平都有了很大提高。

4.1脉冲形状早期的指数衰减式脉冲一直沿用至今，保留在低端产品的设计上，主要用于基因转染。新开发的方波脉冲产品成为目前市场上的主流，在众多品牌中方波脉冲的纯度和重现性并不完全一致，应选择那些专业厂家的产品。有的产品用一系列高频脉冲代替方波，其导入基因和细胞融合的效率还有待于进一步证实。除了直流脉冲以外，有些用于细胞融合的设备还可以产生非正弦交流波使细胞按电场方向排列，可比单纯直流脉冲获得更高的融合效率。

4.2 脉冲强度和时间 由于细菌和细胞的操作需要不同的脉冲强度和时间，而低端产品的强度和时间调整范围都比较窄，因此作用单一。通用型产品可以产生0-3000V的电压以及1微秒-10秒的脉冲，因此可应用于细胞、细菌转基因和细胞融合、胚胎工程等多种操作。

4.3 外围设备带有监视器、打印机和遥控器接口的细胞操作系统已经出现，与这些设备配套使用能方便地记录和优化实验参数，可以在最短的时间内取得最佳结果。