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云南农业大学培育转基因克隆猪 猪蹄发绿色荧光


  在紫外线灯的照射下,转基因克隆猪的脚趾会发出绿色荧光。付兴华摄

  这几天,云南农业大学动物科学技术学院实验区的猪圈热闹非凡,原来,这里刚培育出了10头转基因克隆猪。

  这些小猪,在阳光下与普通的小猪没有什么差别,全身呈灰白色,刚从猪圈里抓出来时,还嗷嗷叫唤个不停。随后,研究人员将它们放进没有一点光线的小暗室后,一开紫外线灯,却发现这些小猪的猪蹄部位竟然散发出绿色的荧光

  解密猪蹄为何会发荧光

  身体里拥有水母的基因

  主持这个课题研究的魏红江教授向晚报记者介绍,这些小猪就是转基因克隆猪了,它们的基因不全部来自父母亲,一个或多个基因是来自其他生物体。经鉴定,共有10头刚出生的小猪被确定为转基因克隆猪。

  什么是转基因克隆猪呢?众所周知,自然界中每个生物体都固有不同的生命特征,而保持这些生命特征的物质就是细胞核中的基因。生物体的基因一般都来源于父母。当人们把一种生物的基因片段加入到另外一种生物中时,就诞生了转基因生物,比如在玉米的基因中加入昆虫基因。

  云南农业大学动物科学技术学院的这项研究,是在学校和曾养志教授的大力支持下,与该校高士争教授合作开展的,由高教授提供Leptin基因。

  魏红江团队首先从30日龄的猪胎儿皮肤细胞中分离出成纤维细胞,进行细胞培养,建立细胞系;

  第二步,把Leptin基因与水母绿色荧光蛋白基因构建到同一个载体上,通过转染胎儿成纤维细胞,获得阳性的供体细胞;

  第三步,去屠宰场采集猪卵巢,从卵巢中抽吸出卵母细胞进行体外成熟培养,培养38~42小时后去除卵母细胞上的卵丘细胞,找出已排出第一极体的成熟卵母细胞,经过去核,并除去第一极体,留下细胞质;

  第四步,把转基因阳性细胞注入到去核的卵母细胞里,构建转基因克隆胚胎;

  第五步,对转基因克隆胚胎进行细胞融合和电激活处理,然后移入二氧化碳培养箱内进行5~24小时的体外培养;

  第六步,让代孕母猪发情,然后把转基因克隆胚胎移植到代孕猪的输卵管内。他们中的极少部分会进一步发育,在子宫里吸收养分并长成生命。100多天后,新的生命就会从这里孕育而出。

  2011年9月29日至10月8日,研究人员先后把准备好的转基因克隆胚胎移植到5头代孕母猪体内,平均每头代孕母猪移植克隆胚胎398枚,有4头母猪妊娠。

  为何要培育

  可建成动物模型

  助人类战胜疾病

  魏红江说,就拿该校培育的这些转基因克隆猪来说,它们体内所含的Leptin蛋白基因,又名瘦素、瘦蛋白抗肥胖因子、苗条素,是由肥胖基因编码、脂肪细胞分泌的一种激素样蛋白质,具有调节摄食行为、增加能量消耗、抑制脂肪合成、促进脂肪分解和降低采食量的作用。

  这种转基因克隆猪在生长、繁殖、泌乳和生长性能方面发生的改变,将可用于脂肪沉积以及人类肥胖病和糖尿病等疾病的研究。

  该项成果运用了分子生物学、体细胞转染、体细胞克隆、胚胎移植等技术,突破常规育种所无法实现的跨物种基因转移。

  这项技术,若与该校的版纳微型猪近交系结合,将在验证基因功能、确认关键致命基因、制备生物反应器猪,以及建立各种人类重大疾病的动物模型、开展异种器官移植等领域的应用都具有非常重要的意义。

  


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