动物体脂的沉积始终处于一个动态平衡，体脂含量的多少取决于脂肪合成和分解2个过程。一方面动物的体脂沉积所需要的脂肪酸大多来自脂肪酸的从头合成，即由脂肪酸合成酶(FAS)催化乙酰辅酶A和丙二酸单酰辅酶A合成甘油三酯。FAS表达水平的升高能够显著增加甘油三酯在体内的沉积，并导致肥胖。熊文中等研究发现，猪脂肪组织中脂肪酸合成酶与胴体脂肪量、胴体脂肪率呈显著正相关。另一方面，动物脂肪的水解主要靠激素敏感酯酶催化，它是脂肪细胞中甘油三酯降解的限速酶，在调控能量平衡中起重要作用。作为脂肪合成与分解2个过程中的关键酶，FAS和HSL的基因表达水平、酶活性高低对动物体脂沉积的调控具有重要意义。许多研究表明日粮能量水平明显的影响猪脂肪的沉积，但是其是否影响FAS和HSL的活性和基因表达需进一步研究。因此，本试验考察了不同能量水平对猪体内脂肪和肌肉组织中FAS、HSL的活性及其相应的基因表达水平的影响，旨在揭示能量水平调控脂肪沉积的机理。

1材料与方法

1．1 试验设计与试验动物 本研究采用单因子试验设计，从20 kg左右体重的长白X荣昌杂交猪中，选用72头日龄、体重、健康状况以及遗传差异一致的试验猪进入正式期，按性别随机分成3个组，每个组6个重复，每个重复4头猪，饲养管理按常规进行。

1．2试验日粮采用玉米-豆粕-麦麸型日粮。参照NRC(1998)和中国瘦肉型猪饲养标准(1987)确定中能量水平为l3．05 MJ／kg，高低能量水平是在中能量水平基础上提高或降低10％，分别为l4．36 MJ／kg和11．75 MJ／kg，其余指标基本一致。

1．3样品的采集和处理试验猪体重达l00 kg时，每个重复屠宰l头猪，取屠体左边8～12肋处取眼肌、肝脏及皮下脂肪，立即将各种样品编号分装保存于液氮中，-70°C保存备用。

1．4酶活性的测定

1．4．1 脂肪酸合成酶活性的测定 猪脂肪组织样品制备参照Moibi等的方法，脂肪酸合成酶活性的测定参照田维熙等的方法；肌肉和肝脏组织样品的制备和FAS活性测定均参照田维熙等。

1．4．2激素敏感脂肪酶(HSL)活性的测定脂肪组织样品制备和HSL活性的测定参照Tihon等的方法；肌肉和肝脏组织样品制备和HSL活性测定参照Tilton等和Watt等的方法。

1．5 FAS与HSL基因表达量的测定 肌肉和脂肪组织中FAS和HSL基因表达量的测定采用荧光定量PCR进行。参考GenBank中登录的FAS、HSL和B-actin序列，在保守区设计特异引物，引物由Invit—rogen生物公司合成。肌肉和脂肪组织中总RNA的提取采用Invitrogen公司的Trizol试剂，FAS和HSL基因的定量表达采用TaKaRa公司生产的荧光定量试剂盒ExScriptTM RT—PCR Kit，并采用双标准曲线法对目的基因的表达量进行分析。

1．6统计分析 数据统计分析使用SAS软件包和一般线性模型程序。所有数据采用单因素方差分析，处理问的显著性检验采用邓肯多重比较，结果以平均数±标准差表示。

2结果与分析

2．1 能量水平对各组织中FAS酶活性的影响 由表1可知，肌肉组织、肝脏组织和脂肪组织中FAS活性均随着日粮能量水平的提高而不同程度的增加。与低能量组相比，中能量组和高能量组的脂肪组织中的FAS活性分别提高了19．4％(P>0．05)和41．9％(P<0．Ol)，而中能量组和高能量组之间差异不显著(P>0．05)；肝脏组织中的FAS活性显著提高了6．6％(P>0．05)和31．4％(P<0．01)，并且中能量组和高能量组之间差异极显著(P<0．Ol)；肌肉组织中的FAS活性提高了208．4％(P<0．01)和769．9％(P<0．01)，并且高能量组的活性极显著高于中能量组，提高了182．1％(P<0．01）。

2．2能量水平对各组织中HSL酶活性的影响 由表2可知，随着能量水平提高，脂肪组织、肝脏组织和肌肉组织中的激素敏感酯酶具有降低的趋势，但各能量组之间差异不显著(P>0．05)。此外，HSL活性具有组织差异性，脂肪HSL活性极显著高于肝脏HSL活性和肌肉HSL活性(P<0．01)

2．3 能量水平对各组织中FAS基因表达量的影响

由表3可知，脂肪和肌肉组织中FAS mRNA均随着日粮能量水平的提高而不同程度的提高。与低能量组相比，中能量组和高能量组皮下脂肪中FAS mRNA表达量分别提高了13．9％(P>0．05)和42．3％(P<0．05)，而中能量水平与高能量水平之间差异不显著(P>0．05)；中能量组和高能量组肌肉组织中FASmRNA表达量分别提高了23．1％和44．6％，但各组织之间差异不显著(P>0．05)。此外，FAS mRNA表达量具有组织差异性，脂肪组织中的FAS mRNA表达量极显著高于肌肉组织(P<0．01)。