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5.2 组织病理学检查 对于全身感染的病猪,可采取鼻黏膜或其刮削物作组织染色标本检查,根据在鼻黏膜管状腺见到特征性成丛的膨大细胞及嗜碱性核内“鹰眼形”包涵体,不难作出诊断。也可根据组织切片中的嗜碱性核内包涵体和巨细胞检查,或作冰冻切片,用免疫染色法检测病毒抗原,继而作出诊断。在急性感染的幼龄仔猪肾和脑等组织,也可见到这种包涵体。
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5.3 血清学试验 血清抗体是确证猪群中存在PCMV最可信的方法,本法也可以用于对剖腹产猪进行监测。对育肥猪随机采取血清样品做间接免疫荧光试验或者ELISA试验测定,将感染病毒的肺泡巨噬细胞或类成纤维细胞用丙酮固定,然后进行间接荧光抗体染色法检查,其试验敏感性比病毒中和试验至少高8倍,而且还可对不同类别的IgG和IgM抗体予以鉴别。人工感染后3周可检出抗体,6周后达最高值并一直持续到屠宰。现场猪的抗体效价多为64~128倍。
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也可应用感染的输卵管类上皮细胞作ELISA,它与间接荧光抗体具有相同的敏感性。现场猪在2~3周龄感染病毒,血清抗体在5~6周龄转阳,并呈终生持续感染。Tajima等(1994)以血纸法建立了ELISA法,并将全血法与血清检法的抗体效价进行了比较,样品的吸收值高度相关(r=0.88),对26份田间收集血纸的检查,发现这些仔猪出生后8周母源抗体水平下降,并从4头猪中检出IgM抗体。
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PCR技术 Hamel等(1999)首次报道了应用PCR诊断本病,采用直接从具有不同临床综合征的病猪肺和鼻黏膜的刮削物提取DNA检查的方法,从126份样品中检出59份阳性样品,该方法有可能成为PCMV检查和监测的常规方法。之后,Fryer等(2001)用定量竞争PCR对不同的猪器官(包括用于异种移植供体)进行了病毒的检测,可以从每微克DNA中检出低于10至97个基因组拷贝。?
6 防制措施?
康复猪血清中虽产生相当水平的中和抗体,但不能清除体内的病毒,表明本病的免疫力不强。患病母猪的初乳内含有中和抗体,可为哺乳仔猪提供一定的保护力。但是在PCMV呈地方性流行的猪场,似乎只有存在循环的母源抗体时才向外排毒。?迄今尚未见有疫苗研制的报道。目前对此病无治疗方法,但在发生鼻炎时,可使用抗菌类药物控制细菌的继发感染。在猪群饲养管理良好时,在有与PCMV有关的鼻炎和/或SMEDI的地方,疾病的暴发通常具有自限性。因此要加强饲养管理,尤其是PCMV呈地方性流行的猪群中,引种前要进行隔离和免疫检测,防止将传染源引入易感猪群中,导致本病暴发或激发原有猪群的潜伏感染。理想的控制措施是通过剖腹产取得猪崽隔离饲养,并进行至少70天的血清学监测,以建立无病毒感染的猪群。?
近年来猪PRRS的广泛传播,给养猪生产造成了巨大的经济损失,诊断RRSV的实验工作也在各地普遍展开,目前在某些病例中,偶尔也会在初次分离PRRSV的猪肺巨噬细胞中发现PCMV。从无症状猪的肺泡巨噬细胞中发现病毒,说明巨噬细胞是感染源。PCMV能够抑制宿主的免疫功能和防御机制,尤其是抑制T?细胞的功能,从而影响到感染的后果。相信随着时间的推移,本病的重要性同PRRS一样,势必会引起人们的关注。PCMV将会得到人们更广泛地认识。
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