保安全可靠、无污染。较可靠的办法是使用无菌猪或SPF猪肺泡巨噬细胞。据Kawamura H等报道,猪输卵管细胞可支持该病毒复制,Bouillant等建立了输卵管类上皮和输卵管类成纤维细胞,可以用于病毒培养。其细胞病变不明显,必须用姬姆萨染色或标记抗体染色后观察。另有报道,十四烷酰佛波醇乙酸酯(120tertadecanoylphorbol 13?acetate)能增强病毒的复制。
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1.3 抗原特性 有关猪包涵体鼻炎病毒抗原特性的研究很少,迄今为止 ,仅对世界不同国家的7个PCMV分离物的ELISA特性进行了比较,发现OF1株在血清学上与Chiba2和Hiroshima株有明显不同。同时Chiba2株与Chiba C株之间、Chiba C株与Kagawa S株之间也有不同,而英国的B6株与OF2、Chiba2、Chiba C和Hiroshima等株也表现有血清学差异。以上资料表明PCMV不同地区分离株之间可能存在抗原结构的差异。本病毒的抗原特异性较强,与其他疱疹病毒尚未发现有交叉反应。?
1.4 抵抗力 该病毒在56℃经30 min灭活。22℃只能保持24 h活性。但将患病仔猪鼻黏膜组织保存于-30℃,其感染力至少可维持5个月,病毒液在-60℃下可保存2年以上。PCMV对有机溶剂(如氯仿和乙醚)敏感,经过这些试剂处理,可使其丧失感染力。?
2 流行病学?
PCMV在体内外有高度的宿主特异性,仅猪感染,尚未发现其他实验动物感染的报道,例如兔、小鼠、苍鼠、鸡胚和牛均不感染。?PCMV最易传染和扩散的途径是上呼吸道。通常认为1个月龄左右的猪是经鼻感染的,仔猪可能主要是通过与母猪接触而感染。病毒可由鼻、眼分泌物及子宫颈黏液等排出尿液也会加大环境污染。可能经飞沫和吮乳途径在猪群中呈水平传播。本病毒还可通过胎盘传播,垂直感染胎儿,从初次感染PCMV怀孕母猪的眼、鼻分泌液、尿液和子宫颈黏液中都可以分离出病毒。也可从公猪的睾丸和附睾中分离出该病毒,所以通过交配也能发生传染。
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与其他细胞巨化病毒一样,PCMV主要是一种“机会性感染”的病毒,用不排毒的5~6月龄猪的肺泡巨噬细胞进行培养,几乎可100%地分离出PCMV。根据病毒能持续感染肺泡巨噬细胞这一事实,推测该病毒可能具有免疫抑制作用。实际上在长途运输、寒冷、分娩等应激因素作用下或使用类皮质激素后,处于潜伏感染状态的猪只,病毒可被激活并重新排毒。?
3 临床症状?
潜伏期14~21天。临床症状随年龄和生理状态不同,有很大差异。无论在实验室还是在野外条件下PCMV可引起木乃伊、死产和新生仔猪死亡,以仔猪鼻炎、肺炎与生长发育不良。感染率随猪群而异,从12%~90%,死亡率最高时达25%。?
妊娠母猪感染后在整个妊娠期未见有发热或其他临床异常,但在病毒血症阶段常常会嗜眠、食欲不振,如首次感染发生于妊娠后期的母猪,则引起胚胎死亡、木乃伊胎、死产和不育等繁殖障碍。有些仔猪出生后可能未见有临床症状即死亡,有些弱仔表现为贫血、皮肤或黏膜苍白、不同程度的水肿、生长及发育不良。
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本病常发生于1~3周龄的仔猪,发病程度与初乳中获得母源性抗体多少有关。生后5~10日龄仔猪感染后,呈现急性经过,其主要症状是呼吸道症状,如喷嚏、咳嗽、流泪、鼻分泌物增多,继之出现鼻塞、吮乳困难,体重很快减轻,如果无母源抗体的仔猪感染,则可能发生鼻衄。严重时还可见仔猪颤抖和呼吸困难等症状。可在发病后5天死亡,一窝仔猪中死淘率可高达25%,其他耐过的仔猪表现生长发育不良,增重变慢。
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