(2)NSl蛋白与细小病毒的组装密切相关。PPV新合成的单链DNA基因组的5’端通过共价键与NSl联结,在随后的病毒包装过程中NSl被去掉并连在病毒粒子的外层。
(3)非结构蛋白NSl具有抗原性,并刺激机体产生抗体。NSl虽然是微量的,但在病毒复制中,能持续刺激机体产生抗体。当猪感染PPV后,体内将产生抗NSl的抗体,而使用灭活苗免疫的猪则没有这种抗体一基于此,利用杆状病毒体外重组表达的NSl建立了区分PPV野毒感染和灭活疫苗免疫猪的鉴别诊断方法
8诊断试剂盒研制的过程
本研究在对PPV中国株的NSl基因进行PCR扩增、克隆和序列测定的基础上,进一步对细小病毒进行了深入研究,利用大肠杆菌表达系统成功表达了PPVNSl蛋白作为抗原,建立间接ELISA诊断方法。
通过大量临床血清的检测证实:
(1)特异性实验:用NSl包被微孔板,分别检测猪口蹄疫、猪伪狂犬等猪的阳性血清,检测结果都呈阴性。表明,此诊断方法对猪细小病毒病的检测具有特异性,是一种准确而使用简便的诊断方法。
(2)稳定性实验证实诊断试剂盒在室温下放置的有效使用期可以达到5个月。
(3)灵敏性实验证实其比常规的诊断方法,如HI和LAT等更为灵敏,尤其可以鉴别诊断自然感染和灭活苗免疫猪群。
(4)此诊断方法对于大量血清检测具有省时、便捷、准确的特点,更适应规模化养殖的早期诊断和及时预防的需要。
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