细菌总数（TVC）：标准琼胶培养基，25℃培养48h。
　　假单胞菌数（Pseudomonasspp）：假单胞菌专用培养基，按使用说明25℃培养48h。
　　5.挥发性盐基氮（VBN）测定称取打碎鱼肉浆10.00g于锥形瓶中，加入20mL水、20mL10%三氯醋酸，用玻璃棒搅匀，振摇，浸渍30min后过滤，滤液按半微量定氮法进行，每个样品至少做二个平行。
　　6.数据处理和回归分析实验数据用SPSS11.5软件进行统计与分析，感官变化曲线和VBN变化曲线采用多项式方程描述，微生物生长曲线采用Zwietering等修正的
　　Gompertz方程描述，用Statistica5.5软件进行非线性回归。
　　结果与讨论
　　1.罗非鱼在不同低温贮藏时感官鲜度的变化特性和保藏期图1是感官评分用多项式回归得到的罗非鱼在0、5、10、15℃贮藏过程中感官鲜度变化曲线。由曲线可得，罗非鱼在0、5、10、15℃贮藏中，感官评分达到1时的高品质期（HQL）分别为11、6、3、1.5d，感官评分达到2时的货架期（SL）分别为20、9.5、5、2.5d。与徐家敏等报道的鲤在冰藏、10、15℃贮藏中，货架期分别为18、4、2d和王等报道的鳙在0、5、10℃贮藏，货架期分别为11、7、4d相比，低温贮藏淡水鱼中，罗非鱼属鲜度下降慢的鱼种。鲜鱼到达感官剔除的时间长短主要与贮藏温度和鱼的种类有关，鱼的生长水温不同也有很大影响。生长水温不同，鱼体附着的细菌种类也不相同，在低温贮藏中具有不同的增殖速度。罗非鱼一般生长在较高水温的水域，鱼体附着细菌较多属中温菌，在低温贮藏中生长受到抑制，这是罗非鱼在低温贮藏中鲜度下降慢的主要原因之一。
　　感官评价结果显示了不同贮藏温度对罗非鱼的鲜度变化影响很大，0℃和5℃贮藏的高品质期分别达到11d和6d，但是10℃和15℃的货架期仅有5d和2.5d。因此在鲜罗非鱼冷链流通中温度的控制十分重要，应尽可能控制在0~5℃，不要超过10℃。按照欧盟的鲜鱼冷链流通法规，鲜鱼必须保存于冰或冷却凝胶等冷却剂中流通，无论在何种环境温度，贮藏流通全程鱼体温度波动要控制在8℃以下，温度高于8℃微生物包括致病微生物的生长会加快，有可能威胁到消费者的健康。罗非鱼冷藏链温度范围的拟定，有待于对其冷藏流通过程中腐败菌和病原菌的生长动态进行广泛深入的研究。另外罗非鱼冷藏链流通应以高品质期为控制目标，这样即使温度有波动或流通时间有拖长也处于货架期范围。
　　与海水鱼相比，罗非鱼腐败时，氨臭味较轻，而硫化氢味明显。这与国外一些专家的描述是一致的，有氧储藏的鱼类，海洋温水鱼的腐败在感官上以鱼腥味、腐臭味和氨臭味为特征，而淡水鱼和一些热带海水鱼的腐败感官特征明显不同，更多出现硫化氢味、水果或酸臭味等异味。这是低温贮藏淡水鱼特定腐败菌假单胞菌的腐败特点。
　　2.不同贮藏温度下VBN和微生物的变化特性图2是实验得到的VBN值用多项式回归得到的罗非鱼0、5、10、15℃贮藏中
　　VBN值变化曲线。由图2可见，罗非鱼在0℃贮藏中VBN变化的缓慢期比5、10、15℃长得多，10、15℃贮藏中的VBN上升比0、5℃明显快。0℃贮藏第17天、5℃贮藏第8天
　　VBN值才开始明显增加，而10℃贮藏第3.5天VBN值就开始明显增加。一般认为，中温菌的增殖在10℃以下就受到抑制，只有低温菌能够增殖，而0℃是低温菌增殖的下限温度。罗非鱼在0℃和5℃的贮藏中，中温菌的生长受到抑制，低温菌增殖缓慢，这在VBN曲线中可清楚地反映出来。由此看来，罗非鱼在0~10℃低温流通可能是较符合实际的。由此也可知，历来认为的“淡水鱼鲜度下降比海水鱼快”，从微生物方面来说应该有二个原因，一是淡水鱼体附着的腐败细菌往往比海水鱼的多，在不加冷藏的常温流通中，能越过延滞期而更快地增殖，产生腐败产物。二是淡水鱼腐败产物不仅有氨臭味的
　　VBN化合物，还有较多量硫化物等，臭味怪异，令人难以接受。
　　鲜鱼在低温贮藏中鲜度下降到感官剔除，主要是腐败微生物产生难闻的腐败产物造成的，所以有必要对腐败菌进行深入研究。由于主要是特定腐败菌（SSO）造成腐败，所以SSO菌数作为评价鱼的品质指标，可得到比细菌总数更确切的结果。实验验证了罗非鱼在0~15℃贮藏温度范围，特定腐败菌为假单胞菌。
　　图3、图4是实验得到的细菌总数（25℃培养48h）和假单胞菌数采用修正
　　Gompertz方程回归得出的罗非鱼0、5、10、15℃贮藏中微生物生长曲线。由图所示，用修正Gompertz方程均能适当地描述总菌和假单胞菌生长动态典型的S型曲线，所求得的回归相关系数值均较高(R2分别为0.979、0.995、0.990、0.990和0.967、0.994、0.996、0.994)。由图3、图4可见，0℃贮藏中，菌数增殖缓慢，假单胞菌有相当长的延滞期，第11d才开始进入对数生长期，第20d进入平稳期。5℃贮藏，假单胞菌有2.5d的延滞期。10、15℃菌数上升都较快，假单胞菌没有明显的延滞期。国外学者研究指出，菌数达到107cfu.g-1或更高时有难闻的气味和味道产生，与本实验货架期终点的总菌数和假单胞菌数相一致。