每件包装产品抽取一小袋,在无菌条件下每袋取样200g。然后将所有样品混匀,按四分法缩到2000g,分装4袋,然后封口。每2袋为一份装入牛皮纸封样袋。
液体产品每件吸取10mL,一同放入无菌的三角瓶中,混匀后分成两份,每份250mL。冻干产品,每件取一支放入无菌的三角瓶中,加无菌液体培养液,溶解混匀后分成两份,每
份50mL。贴上标签和封条(一份被抽样单位留存,一份交检测中心检测)。
7检验方法
71仪器设备及试剂
711仪器设备
生物显微镜(10100);
菌落计数器;
恒温培养箱;
恒温干燥箱,
恒温摇床;
灭菌锅;
无菌室或超净工作台;
酸度计;
试管%15mm150mm,%18mm180mm;
培养皿直径9cm;
三角瓶500mL;
无菌吸管05、1、5、10mL;
玻璃刮刀;
滤纸;
酒精灯;
标准筛孔径018mm和015mm;
1号羊毛画笔;
无菌水;
无离子水。
712试剂
选择培养基(见附录A);
刚果红染液(05%)。
72成品检验
721气味检验
取固氮菌肥料样品打开包装,进行感观检验。
722外观检验
将固体固氮菌肥料包装打开,装在白色搪瓷盘中,将液体固氮菌肥料摇匀,在明亮光线下进行感观检验。
723pH值测定
液体固氮菌肥料的pH值测定:取供检菌液直接测定pH值,取三次测定结果的平均数。固体固氮菌肥料的pH值测定:取50mL烧杯一个,加入菌肥25g,无离子水25mL。通过磁力搅拌器使溶液均匀后用酸度计测定pH值。取三次测定结果的平均数。
724含水量测定
称取固体固氮菌肥三份,每份2000g,精确到001g,放入已称恒重的铝盒中。置105干燥箱内烘烤4h,移至干燥器内,冷却后称重。根据烘干前后质量差按式(1)计算含水量。取三个样品测定数的平均值。平行样品绝对偏差应低于1%。
含水量(m
%)=0-m1
m100…………………………(1)
0
式中m0———烘干前样品质量,g;
m1———烘干后样品质量,g。
725吸附剂颗粒细度测定
称样1000g
(精确至001g),置于标准筛中(直径分别为018mm或015mm),用水冲洗,用毛笔轻刷,至粉末不再通过为止。将筛余物置105!110温度下烘干,称重。筛余物百分含量按式(2)计算:
筛余物(%)=筛余物量(1-样品含水量百分数)
样品质量100…………(2)
726有效活菌数和杂菌含量测定
采用平板计数法测定有效活菌数及杂菌率。
7261测定步骤
采样应不少于500g,从中称取1000g,加入带玻璃珠的100mL的无菌水中(液体菌剂取10mL,加入90mL的无菌水中),静置20min后在旋转式摇床上200r/min充分振荡
30min,即成母液的菌悬液。
用无菌吸管吸取5mL上述母液的菌悬液加入45mL无菌水中,混匀成110稀释的菌悬液,这样依次稀释,分别得到11102,11103,11104,11105等浓度(每个稀释度必须更换无菌吸管)。
用05mL无菌吸管分别吸取不同稀释度菌悬液01mL,加至直径为9cm平皿的选择培养基(见附录A)表面,用无菌玻璃刮刀将菌悬液均匀地涂于琼脂表面,或取1mL不同稀释度菌悬液加入培养皿内,与琼脂培养基混匀,每个样品取3个连续适宜稀释度,每一稀释度重复3次,同时加无菌水的空白对照。28培养2!3d后每个稀释度取5!10个菌落的菌体,涂片染色(见附录B)。显微镜观察识别后,选一个适宜稀释度(菌落在30!300个之间的平板),计算出同一稀释度三个平皿上菌落平均数。
杂菌数是指在选择培养基上,除有效活菌外的其他菌的菌落数与马丁培养基上霉菌数之和。马丁培养基10-4稀释度菌悬液加样,操作步骤同样品有效活菌数检测操作。
7262允许差
平行样品误差按式(3)计算,并应符合表2的规定。
*=%(x--x)
(n-1…………………………………(3)
式中*———单一标准差;
x———同一个稀释度任一个平板测定值;
-x———同一个稀释度平板测定的平均值;
n———重复次数。
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