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固氮菌肥料行业标准




  每件包装产品抽取一小袋,在无菌条件下每袋取样200g。然后将所有样品混匀,按四分法缩到2000g,分装4袋,然后封口。每2袋为一份装入牛皮纸封样袋。

  液体产品每件吸取10mL,一同放入无菌的三角瓶中,混匀后分成两份,每份250mL。冻干产品,每件取一支放入无菌的三角瓶中,加无菌液体培养液,溶解混匀后分成两份,每

  份50mL。贴上标签和封条(一份被抽样单位留存,一份交检测中心检测)。

  7检验方法

  71仪器设备及试剂

  711仪器设备

  生物显微镜(10100);

  菌落计数器;

  恒温培养箱;

  恒温干燥箱,

  恒温摇床;

  灭菌锅;

  无菌室或超净工作台;

  酸度计;

  试管%15mm150mm,%18mm180mm;

  培养皿直径9cm;

  三角瓶500mL;

  无菌吸管05、1、5、10mL;

  玻璃刮刀;

  滤纸;

  酒精灯;

  标准筛孔径018mm和015mm;

  1号羊毛画笔;

  无菌水;

  无离子水。

  712试剂

  选择培养基(见附录A);

  刚果红染液(05%)。

  72成品检验

  721气味检验

  取固氮菌肥料样品打开包装,进行感观检验。

  722外观检验

  将固体固氮菌肥料包装打开,装在白色搪瓷盘中,将液体固氮菌肥料摇匀,在明亮光线下进行感观检验。

  723pH值测定

  液体固氮菌肥料的pH值测定:取供检菌液直接测定pH值,取三次测定结果的平均数。固体固氮菌肥料的pH值测定:取50mL烧杯一个,加入菌肥25g,无离子水25mL。通过磁力搅拌器使溶液均匀后用酸度计测定pH值。取三次测定结果的平均数。

  724含水量测定

  称取固体固氮菌肥三份,每份2000g,精确到001g,放入已称恒重的铝盒中。置105干燥箱内烘烤4h,移至干燥器内,冷却后称重。根据烘干前后质量差按式(1)计算含水量。取三个样品测定数的平均值。平行样品绝对偏差应低于1%。

  含水量(m

  %)=0-m1

  m100…………………………(1)

  0

  式中m0———烘干前样品质量,g;

  m1———烘干后样品质量,g。

  725吸附剂颗粒细度测定

  称样1000g

  (精确至001g),置于标准筛中(直径分别为018mm或015mm),用水冲洗,用毛笔轻刷,至粉末不再通过为止。将筛余物置105!110温度下烘干,称重。筛余物百分含量按式(2)计算:

  筛余物(%)=筛余物量(1-样品含水量百分数)

  样品质量100…………(2)

  726有效活菌数和杂菌含量测定

  采用平板计数法测定有效活菌数及杂菌率。

  7261测定步骤

  采样应不少于500g,从中称取1000g,加入带玻璃珠的100mL的无菌水中(液体菌剂取10mL,加入90mL的无菌水中),静置20min后在旋转式摇床上200r/min充分振荡

  30min,即成母液的菌悬液。

  用无菌吸管吸取5mL上述母液的菌悬液加入45mL无菌水中,混匀成110稀释的菌悬液,这样依次稀释,分别得到11102,11103,11104,11105等浓度(每个稀释度必须更换无菌吸管)。

  用05mL无菌吸管分别吸取不同稀释度菌悬液01mL,加至直径为9cm平皿的选择培养基(见附录A)表面,用无菌玻璃刮刀将菌悬液均匀地涂于琼脂表面,或取1mL不同稀释度菌悬液加入培养皿内,与琼脂培养基混匀,每个样品取3个连续适宜稀释度,每一稀释度重复3次,同时加无菌水的空白对照。28培养2!3d后每个稀释度取5!10个菌落的菌体,涂片染色(见附录B)。显微镜观察识别后,选一个适宜稀释度(菌落在30!300个之间的平板),计算出同一稀释度三个平皿上菌落平均数。

  杂菌数是指在选择培养基上,除有效活菌外的其他菌的菌落数与马丁培养基上霉菌数之和。马丁培养基10-4稀释度菌悬液加样,操作步骤同样品有效活菌数检测操作。

  7262允许差

  平行样品误差按式(3)计算,并应符合表2的规定。

  *=%(x--x)

  (n-1…………………………………(3)

  式中*———单一标准差;

  x———同一个稀释度任一个平板测定值;

  -x———同一个稀释度平板测定的平均值;

  n———重复次数。


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