④CMV MP介导抗性研究进展 植物病毒侵染宿主植物后在体内的运转方式主要有两种，一是通过植物维管组织进行的系统转移，二是通过胞间连丝在细胞之间的移动。病毒在细胞间的移动是一个主动的过程，需要病毒编码的蛋白参与，这种蛋白称运动蛋白（movement protein，MP）。运动蛋白可与胞间连丝相互作用，促进病毒在细胞间的转移。如果能够干扰或阻碍运动蛋白与胞间连丝的结合，就可以阻止病毒在植物体内的扩散，将侵入植物体内的病毒局限在最初的侵染部位，从而达到抗病毒的目的。为探讨MP在促进病毒通过胞间连丝转移中所起的作用，Cooper等将TMV编码的30kD的运动蛋白（P30）完整编码区及缺失了5′端的RNA结合区的突变基因导入烟草，发现转完整P30基因的植株发病明显快于对照植株，而转缺失突变型P30基因的植株对病毒感染具很强的 抵抗作用。后来的一些研究也表明，只有缺陷型或异 源的MP才能介导转基因植株对病毒的抗性；而有功能的完整MP或者对病毒侵染不起作用，甚至提高寄主对病毒的敏感性。张振臣等将4种不同缺失类型的Fny-CMV，MP基因导入烟草，其中含有N端缺失501个核苷酸的K130基因片段的转基因烟草，对CMV表现较好抗性。

    关于其抗病机理，一般认为转基因植物缺失型MP和植物病毒正常的MP在寄主细胞的胞间连丝上有共同结合位点。转基因植物中所表达的缺失型MP抢占了胞间连丝上的病毒MP的结合位点，病毒侵入植株后，正常的MP就失去了与胞间连丝结合的机会，从而阻碍了病毒在细胞间的移动。研究表明，MP基因介导的抗性具有广谱性。MP转基因植株不仅对MP基因来源病毒具有抗性，同时对其他一些病毒也具有抗性。如TMV部分缺失的MP基因转基因烟草植株不仅对TMV产生抗性，对CMV、烟草脆裂病毒等也具有抗性。目前报道的MP基因介导抗病性的例子还不多，但随着MP基因介导抗病性研究的深入，将有助于设计出更广谱、更有效的抗病毒新策略。

    2.5 运用植物细胞工程技术结合理化诱变因子诱变筛选抗CMV突变体

    植物组织和细胞培养技术的发展为在细胞水平上筛选抗病突变体提供了新的途径。自从Carlson（1973）在烟草叶肉细胞原生质体和单细胞培养中，利用野火病毒诱变抗烟草野火病突变体以来，许多学者利用细胞培养技术结合理化诱变因子在许多作物上获得了抗病突变体。王万军等利用60Co-γ射线照射花药，经细胞培养获得抗黄瓜花叶病毒的突变体植株。陈廷俊采用组织培养、化学诱变与病理学方法相结合，初步建立了一个烟草抗CMV细胞突变系筛选系统，并从普通烟草良种Burley18中筛选到抗CMV细胞突变系。这些尝试为创造抗CMV种质资源提供了新的途径。

    3 小结和展望

    ①药剂防治主要切断传播途径，由于污染环境和产品、危及人的健康，在生产应用上受到越来越多的限制。生物制剂、疫苗等由于其防治效果不稳定、防效不明显，应用范围也很难扩大。

    ②由于自然界缺少CMV抗源，利用常规育种手段很难获得真正的抗病新品种，育成的多是一些耐病品系，且由于常规育种的技术特点，育种需要的周期长，选择效率低。

    ③基因工程技术由于具有可利用的基因资源丰富、育种周期短、抗性稳定、不污染环境等优点，在抗病育种中受到了普遍关注。通过植物基因工程技术的应用，基因资源的研究与常规育种技术相结合，可望培育出新一代抗病新品种。目前通过基因转化技术已获得了一批对CMV具有较好抗性的转基因植株，为生产上减轻CMV的危害起到了一定的作用。

    ④运用植物细胞工程技术结合理化诱变因子诱变筛选抗CMV突变系，为短期、高效创造抗CMV突变系提供了有益的尝试，但其预见性和成功率较差。

    相信随着生物技术的发展及其在抗病育种上的应用，CMV在生产上的危害必将得到有效的遏制。