2.6 骨髓细胞学检查法
病初取病猪胸骨的骨髓浆汁做成涂片,姬姆萨染色后镜检,出现副淋巴母细胞,确定病猪感染猪瘟病毒。
2.7 酶联免疫吸附试验(ELISA)
酶免疫分析技术是继荧光技术后发展起来又一先进诊断技术,其基本原理是特异性反应系统、间接放大系统和显示系统结合起来,用于检测抗体或抗原的一种免疫方法。Shannon等报道,在猪瘟感染前病毒血症产生时,采其血清进行ELISA检测猪瘟病毒,可做早期诊断,捕获ELISA能够检测2种不同猪瘟病毒株感染的病猪的血液和组织中的抗体。
2.8 核酸探针杂交试验
核酸探针技术以病毒RNA基因组为模板制备探针,在cDNA合成后进行Southern-blotting。这种方法特异性强、准确可靠,可用于不同毒株的分离和鉴定。Cruliere等、Dable等、Colijin等利用猪瘟病毒基因组RNA构建cDNA,与牛病毒性腹泻病毒进行序列分析,合成36个探针,按照它们在病毒基因组的位置,根据特异杂交带区别猪瘟病毒、牛病毒性腹泻病毒以及绵羊边界病病毒。
2.9 反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)
是以病毒RNA为模板进行反转录,再以PCR进行核酸扩增来检测猪瘟病毒。罗廷荣等应用RT-PCR对猪瘟诊断表明,RT-PCR技术可应用于临床诊断。Sand-Vik等和Glodrick等分别利用此法对猪瘟病毒进行检测,结果显示此法具有检出率高、特异性强,微量病料即可诊断,且具有生物安全性,无散毒的危险。
作者单位:东北农业大学动物医学院牡丹江龙大股份有限公司
摘自:《吉林畜牧兽医》
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