2.2HVT为载体的MDV重组疫苗

　　HVT基因组可容纳25kb的外源基因,可以插入一些外源基因。用HVT重组病毒表达MDV抗原的优点是二者有交叉抗原反应，从而可以用大量的HVT蛋白来诱导免疫反应，HVT在雏鸡体内维持时间也长，比起FPV来能够长时间的表达MDV的抗原。RossLJN等[14]使用HVT做载体，在TK基因区插入gB构建基因工程苗,虽然TK基因的破坏使HVT在细胞内繁殖能力降低，但这种低效价重组病毒比其野毒株的免疫效果好。重组HVT疫苗的一个重要特点是可以插入多个外源基因，具有多重保护的潜力，人们对此非常感兴趣制成联苗使用,以预防MD和其他禽病。MorganRW等[15]将鸡新城疫病毒(NDV)的融合蛋白(F)基因和血凝素神经氨酸苷酶(HN)基因分别插入HVT非必需基因Us10，构建了NDVF-HVT和NDVHN-HVT两种重组体，它们能在细胞培养物上和鸡体内稳定而充足的感染，NDVF-HVT重组体接种的鸡可同时抵抗NDV和MDV的双重攻击，由此可见，利用HVT为载体结构建多联苗是实际可行的,关键在于插入合适的外源基因。这个重组方法的成功主要依赖于鉴定出了HVT基因的适宜位点，而后插入不削弱鸡体中病毒复制的外源基因，从而产生了理想的表达。迄今为止发现的最适合的插入点是Us10基因片段,它与不知功效的HSVUs10基因同源。ReddySK等[16]又构建了表达NDV的F和HN抗原,MDV1的gC和gB抗原的HVT重组疫苗,输卵管免疫接种结果保护了SPF鸡全身性ND和RBIB。此外，还建立了表达鸡传染性法氏囊病毒（IBDV）的VP2抗原HVT重组苗，在HVT的gI和UL13位点插入IBDV的VP2抗原产生重组疫苗，接种后防止了鸡法氏囊的萎缩。HVT多联重组苗的构建成功不仅可以抗MD，同时还能对新城疫(ND)、IBD等产生保护，具有广泛的开发前景。