近年来,利用分生组织培养方法快速繁殖草莓无病毒苗的技术已普遍受到重视。世界上一些草莓主产国,如意大利,通过草莓组织培养苗工厂化生产的途径,快速繁育优良种苗,同时进行品种复壮工作,为草莓生产提供了大量新品种和无毒化种苗,加快了优良品种的推广和老品种的复壮,我国利用草莓茎尖培养无病毒种苗的研究工作也获得了成功,并已开始在生产上大面积应用。
快速繁殖草莓秧苗比其他方法有许多优点:采用无毒材料培养的秧苗无病毒,生长健壮,叶片浓绿,可改善果实品质,提高产量;繁殖快,对新品种的推广有利,解决了新品种材料少、在生产中推广速度慢的问题。快速繁殖不受季节影响,一年四季均可进行。在人工控制的条件下,可工厂化育苗,根据生产需要为生产提供种苗。现把组培草莓种苗的方法和技术简要介绍给广大草莓种植者。
1.培养基的配制:培养基由植物生长所必需的有机营养成分、微量元素和生长调节剂组成。首先配制基本培养基,包括微量元素、有机物质、蔗糖(3%)、琼脂(0.6%)等。为调节被培养物的生长和分化,还需加入细胞分裂素和其他生长素,如6-苄氨基嘌呤(ba)0.25毫克/升、吲哚丁酸(iba)0.5~1.0毫克/升、ga3(赤霉素)0.1毫克/升等,组成ms培养基。配好后装入三角瓶或试管,经高压消毒后备用。
2.采取茎苗:在6月份选取刚扎根的匍匐茎苗,对茎苗进行消毒。消毒方法是,剥去茎苗外面的叶片,用肥皂水洗干净,再用自来水冲洗一小时。在无菌条件下,用70%的酒精漂洗10分钟后,用5%的次氯酸钠溶液消毒7~8分钟,再用无菌水冲洗5遍,使接种材料无细菌和真菌。然后在超净工作台上,无菌条件下剥取茎尖生长点0.5毫米,接种到上述已配好的培养基上,每个培养瓶可接种5~7个茎尖。接种后,在26℃的恒温、光强2000勒[克斯]、每天光照6小时的条件下进行培养。
3.初代培养:对刚接种到培养基上的匍匐茎尖进行培养,使茎尖分生组织分化出芽和无根小植株。在培养基上加入有利分化的激素,成为分化培养基。茎尖经30天以上的培养,一个茎尖能分化出数个无根小植株。
4.继代培养:把已分化好的新芽转入到新培养基上,进行继代培养繁殖,使新芽不断增殖,加速生长。3~4个星期后,可获得30~40个腋芽形成的芽丛,芽丛中有的抽生新茎,并有正常叶片。经过多次继代培养,使增殖的数量达到一定要求,再把无根苗转入生根培养基上培养,促进生根。
5.生根培养:生根培养时要撤去ba,即去掉了细胞分裂素类的激素,增加生根培养激素,如吲哚丁酸(iba)等。生长在这种培养基上的无根植株不再增殖,在每株无根苗基部生出许多不定根,可得到成批完全小植株。
6.移植:在把试管苗种植到土壤里以前,可先将其培养在无菌土壤中,或在盛有由蛀石、草炭、锯末等基质组成的培养土的小塑料盆中进行培养。培养时,应将试管苗放在温室中,温度保持在20~25℃为宜。为了保持湿度,以利于试管苗成活,移植后的14天内要用薄膜遮阴,待外界气温适合时,再移植到田间培植。要注意防治蚜虫等虫害,加强田间水、肥管理,可喷两次50毫克/千克赤霉素,促进抽生匍匐茎。新抽生的匍匐茎苗为原种苗,经多次、多量繁殖,即可获得成批生产用苗。
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