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猪链球菌病是严重危害养猪业的重要传染病，在我国的许多地方时有发生，单独发生多见。

猪链球菌和化脓性棒状杆菌混合感染，临床报道罕见，陕西某猪场发生一起疫情，根据流行病学、临床症状、病理剖检、实验室检验，确诊为猪链球菌和化脓性棒状杆菌混合感染。?

1 发病情况及临床症状 陕西某猪场共养猪400多头，均为2月龄左右，购自四川，分圈饲养。仔猪购来后，就有个别猪出现慢食、发热症状，用青霉素、庆大霉素、安乃近等药物治疗，效果不佳，1周后，发病猪逐渐增多，来就诊时，已发病10天，发病猪有30多头，死亡11头，发病猪大多出现发热，病初体温升到40℃，后期达42℃，食欲下降或废绝，喜饮，精神沉郁、呆立、嗜睡、起立困难、流泪，呼吸促迫，间有咳嗽，初期流浆液性鼻液，后流脓性鼻液，呼吸困难，个别猪后肢瘫痪。发病后期四肢内侧、耳内部、嘴周围、眼睑处皮肤均为暗红色。?

2 病理变化 病猪剖检可见：颌下肌肉暗红色，脾脏肿大、色淡、质脆而软、包膜下有小出血点，切面结构模糊，肝脏边缘变钝、质硬、表面有白色坏死灶和出血点，切面结构模糊。胆囊肿大、变厚，肾肿大、稍发白、变软且脆，有出血点

，切面多汁，对合整齐，皮质和髓质界线不清，心包膜变厚，与胸腔粘连，心包膜内有较多淡黄色液体，其中有白色纤维素性渗出物，心内膜和心耳出血，心肌柔软，色淡呈水煮样，肺脏严重肉变，边缘有暗红色斑块，剪开可挤出灰白色脓汁和稀薄血液，全身淋巴结出血、肿大，切面呈大理石样；气管内膜出血，气管内有黏稠脓汁，与气管壁不粘连，成条状堵塞整个气管；鼻腔中也有黏稠脓汁，条状分布于鼻腔中；胃、肠黏膜、浆膜有散在的出血点。

3 实验室检验

3.1 细菌学检查?

3.1.1病料涂片镜检 无菌取病死猪脾、肝、肺涂片，革兰氏染色，镜检，未发现细菌。

3.1.2细菌分离培养 无菌取病死猪脾、肝、肾、心包液、肺、淋巴结、肺脏脓汁、气管脓汁、鼻腔脓汁分别接种于血平板上，37℃培养24 h，观察菌落形态并镜检，结果共分离到四种菌落：一种菌落为白色、圆形、光滑、湿润、隆起，直径1 mm的不溶血菌，命名为A菌；一种菌落为针尖大小的半透明、圆形、隆起的草绿色α?溶血菌，命名为B菌；一种为圆形，表面较平坦，中间比四周白，如同心圆、反扣碟状，周边闪光，直径2 mm，β?溶血，命名为C菌；另一种为圆形、白色、隆起，直径约0.5 mm的不溶血菌落，命名为D菌；A、B菌分离到较多。取菌落涂片，革兰氏染色，镜检为革兰氏阳性球菌，单在或双在，有些排成链状或成堆存在；C、D菌为革兰氏阳性杆菌，两端钝圆、棒状，长短不一，大多直，有些两头稍弯，有些排成栅栏状或“V”字型，将A、B、C、D菌分别接种于血平板上，进行分离纯化。

3.1.3致病性试验 将分离到的细菌分别接种于血清肉汤中，37℃培养24 h后，革兰氏染色，镜检，4管肉汤均已纯化，但革兰氏染色特征均与前面血平板上分离到的四种菌染色特征一致。将分离到的细菌分别给两只小鼠注射，每只0.5 ml菌液。对照组两只，每只注射0.5 ml灭菌生理盐水，24 h内B菌组两只死亡，72 h内C菌组两只死亡，其余小鼠观察7天仍未死亡。从死亡小鼠心血和脾脏分离培养得到和注射菌相同的细菌，证明B、C两菌具有致?病性。

3.1.4细菌的鉴定 将上述分离到的B、C菌纯化后分别接种于各种生化培养基。结果：B菌能发酵甘露醇、乳糖、水杨苷、葡萄糖、山梨醇、麦芽糖、蔗糖、木糖，不发酵纤维二糖和鼠李糖，在柠檬酸盐斜面上产生阳性反应，在丙二酸盐琼脂柱上为阴性反应，还原硝酸盐，液化明胶，具有运动性、不水解淀粉、不产生靛基质，M.R.、V-P、吲哚试验均为阴性。上述试验结果符合链球菌的生化特性，因此鉴定其为链球菌。C菌能发酵葡萄糖、蔗糖、果糖、木糖、麦芽糖、乳糖、糊精和淀粉，使其产酸，不发酵棉籽糖、水杨素、鼠李糖、山梨醇；甘露醇、过氧化氢酶阴性，硝酸盐不还原，不产生靛基质，M.R.试验阳性，V-P试验阴性，可使石蕊牛乳产酸、胨化。同时在血清肉汤中生长、底部有细粒状沉淀，无菌膜。上述

结果符合化脓性棒状杆菌特性，因此鉴定其为化脓性棒状杆菌。?

3.2支原体检查 无菌取病死猪脾、肺、肺脏脓汁分别接种支原体培养基上，37℃培养，观察平板上未见有菌生长。?