随着牙鲆鱼养殖业的发展，各类病害肆虐，其中以暴发性流行细菌病的危害最为严重。本试验主要研究由致病性弧菌、嗜水气单胞菌、爱德华氏菌引起的红头、红体、体表鳍条溃烂、腹水等疾病的防治，从而提高苗种培育与商品鱼养殖的成活率，提升经济效益。

　　一、实验器材

　　1 . 诊断选药盒。现在市面上有销售成品的方便型诊断选药盒，每次可进行16种抗菌药物的筛选实 验，分别是：四环素、氧氟沙星、复方新诺明、青霉素、硫酸粘杆菌素、罗红霉素、庆大霉素、新霉素、强力霉素、恩诺沙星、链霉素、氟苯尼考、诺氟沙星、阿米卡星、头孢拉定、阿莫西林。其他参考试验药片分别是：土霉素、头孢氨苄、阿奇霉素、卡那霉素、头孢噻呋钠、TMP、盐酸克林霉素、甲硝唑、替米考星、泰乐菌素、磺胺问甲氧嘧啶、大观霉素、红霉素、盐酸沙拉沙星、舒巴坦钠、盐酸二氟沙星。

　　2 . 自制培养基。培养皿、试管、消毒生理盐水、蛋白胨、琼脂、高压锅等。每个可做4～8个种类的药物选别。

　　3 . 生物杀菌剂。市售针对弧菌、单胞菌等的嗜细菌类生物制剂。

　　4 . EM菌、硝化宝等微生物制剂，分解水体中有机物、氨氮、亚硝酸氮等。

　　5 . 剪刀、解剖刀、镊子、托盘等。

　　6 . 无菌操作台、酒精灯、培养箱、显微镜等。

　　二、实验方法

　　实验有两个要点，一是用传统的抗菌素治疗，通过使用诊断选药盒选取对致病菌作用最有效的抗菌素，进行药浴及投喂药饵防治；二是通过生物杀菌剂进行针对性治疗实验和生物杀菌剂加EM菌、其他微生物改良制剂的预防感染实验。

　　实验从三个方面进行：一是疾病治疗，利用诊断选药盒选取最佳抗菌药和用生物杀菌剂进行疾病治疗实验；二是利用特定病原菌进行疾病感染和治疗的实验；三是根据治疗实验的效果，进行针对性的疾病预防实验。

　　1 . 疾病治疗实验

　　（1） 当鱼类出现活动异常、摄食不良、死亡增加及表现出一定的病征，采集病鱼的病灶部位进行细菌培养， 用诊断选药盒进行选药实验，选取对致病菌作用力最强的抗菌药用于疾病治疗。

　　（2） 治疗实验分两组，每组分别使用2～500升的小水池，各放入发病的鱼苗200尾，抗菌药分别用10毫克／升药浴4小时，按每千克鱼体重100毫克投喂药饵连续5天；5毫克／升药浴4小时，按每千克鱼体重50毫克投喂药饵连续5天。进行效果对比。

　　2 . 感染实验

　　（1） 采集大量发病水池内病鱼病灶部位进行细菌分离培养鉴定，获取致病性弧菌、嗜水气单胞菌、爱德华氏菌。

　　（2） 分别对分离获取的三种细菌进行诊断选药盒选药实验，选择对病原菌作用最强的抗菌药用于实验。同时大量培养三种细菌，达到用于攻击感染实验的用量，以便进行健康鱼苗的攻击感染实验。

　　（3） 实验组合设定。致病菌的组合：三个单一菌种攻击感染实验（弧菌、嗜水气单胞菌、爱德华氏菌），混合菌种攻击感染实验（弧菌+嗜水气单胞菌、弧菌+爱德华氏菌、嗜水气单胞菌+爱德华氏菌）共6种攻击感染实验组，分别编号为实验组1～6，同时设定一个无细菌攻击感染的对照组。以500升实验水池为例，每组8个500升实验小水池，入池鱼苗各200尾。根据需要，选择相应感染实验类型。

　　（4） 感染实验的实施

　　A. 选取全长5厘米左右的健康鱼苗，鱼苗摄食状态良好，每日死亡在0.1％以下。

　　B. 在相应的水池各放紫外线杀菌海水300升，分别移入200尾鱼苗。

　　C. 对照组2个水池，不添加任何细菌。每个感染实验组6个水池，2 个不作任何处理； 2 个采用诊断选药盒选取的抗菌药10毫克／升药浴4小时后换水，每天1 次，同时按每千克鱼体重100毫克口服，连续3～5天1个疗程；2个采用生物杀菌剂2 毫升／米3，药浴4 小时后换水，连续5 天。

　　D. 实施感染的实验水池分别按照致病菌1×105细胞数／毫升进行接种，24小时内不换水，24小时后开始转入正常培养；或者在投喂的配合饲料中喷洒接入适量相应的致病菌，当开始发现有鱼苗异常时实施相应治疗措施等。

　　（5）实验时间及注意事项。实验期间15天，每天吸污并记录相应水池内死鱼数量、活力和摄食情况。所有实验水池工具专池专用，严格控制交叉感染，日常操作中对照组优先进行。第15天，实验结束，统计在池鱼苗数量、活力和摄食等情况，进行数据分析。