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微生物肥料行业标准(NY 227-94)



  1.蛔虫卵死亡率%95!100

  2大肠杆菌值101

  3汞及化合物(以Hg计)mg/kg$5

  4镉及化合物(以Cd计)mg/kg$3

  5铬及化合物(以Cr计)mg/kg$70

  6砷及化合物(以As计)mg/kg$30

  7铅及化合物(以Pb计)mg/kg$60

  5检测方法

  51外观

  感观检验符合41成品技术指标。

  52有效活菌数和杂菌含量测定

  521试剂和溶液

  a.无菌水、蒸馏水;

  b.选择培养基(附录A);

  c.刚果红染液(0.5%)。

  522仪器

  a.显微镜1000;

  b.摇床旋转式200r/min;

  c.恒温培养箱;

  d.恒温烘干箱;

  e.灭菌锅;

  f.扭力天平(分度值0.01g);

  g.玻璃仪器(灭菌的9cm平皿、10mL、5mL、1mL吸管、三角瓶、玻璃刮刀)。

  523测定步骤

  5231采样应不少于500g,从中称取10!20g

  (精确0.01g),加入带玻璃珠的100!

  200mL的无菌水中(液体菌剂取10!20mL,加入90!180mL的无菌水中),静置20min后在

  旋转式摇床上200r/min充分振荡30min,即成母液的菌悬液。

  5232用无菌吸管吸取5mL上述母液的菌悬液加入45mL无菌水中,混匀成110稀释的菌悬液,这样依次稀释,分别得到11l02,11103和11104,11105等浓度(每个稀释度必须更换无菌吸管)。

  5233用1mL无菌吸管分别吸取不同稀释度菌悬液0.1mL,加至直径为9cm平皿的琼脂培养基表面,用无菌玻璃刮刀将菌悬液均匀地涂于琼脂表面。或取1mL不同稀释度菌悬液加入培养皿内,与琼脂培养基混匀。每个样品取3个连续适宜稀释度,每一稀释度重复3次,同时加无菌水的空白对照,培养2!5d,每个稀释度取5!10个菌落的菌体,涂片染色,显微镜观察识别后计数菌落。

  524计算公式:

  统计算出同一稀释度三个平皿上菌落平均数。

  根据式(1)和式(2)计算:

  菌剂含菌数=菌落平均数稀释倍数母液菌悬液的体积

  菌剂数…………(1)

  杂菌率(%)=杂菌数

  有效菌数+杂菌数100……………………(2)

  根据菌落特征判定,分别计算出制品中的特定微生物及杂菌数率。固体(包括颗粒)菌剂含菌数以亿/g表示,液体菌剂含菌数以亿/mL表示。

  525菌落计数

  5251以平板上出现30!300个菌落数的稀释度平板为计数标准。

  5252当只有一个稀释度,其平均菌落数在30!300之间时,则以该平均菌落数乘以其稀释倍数(见表3例1)。

  5253若有两个稀释度,其平均菌落数均在30!300之间,应按两者菌落总数之比值来决定。若其比例小于2应计数两者的平均数,若大于2则计数其中稀释较小的菌落总数(见表3例2及例3)。

  5254若三个稀释度的平均菌落数均大于300,则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数(见表3例4)。

  5255若三个稀释度的平均菌落数均小于30,则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数(见表3例5)。

  5256若三个稀释度的平均菌落数均不在30!300之间,则以最接近300或30的平均菌落数乘以稀释倍数(见表3例6)。

  表3计算菌落总数方法的示例

  不同稀释度的平均菌落数两个稀释度菌落总数

  例次10-510-610-7菌落数之比个/mL或个/g

  1143115922-1.6108

  22760235311.32.7108

  32676136342.51.4108

  4无法计数1142312-3.1109

  528125-2.8106

  6无法计数30318-3.0108

  53含水量测定

  531仪器

  a.土壤铝盒;

  b.扭力天平(分度值0.01g);

  c.恒温烘干箱;

  d.干燥器。

  532测定步骤

  称取样品30!40g

  (精确到0.01g)二份放入铝盒中,于105条件下烘烤4h直至恒重,

  取出后放入干燥器内冷却,一般冷却20min,再称其残重和铝盒重,损失量即为水分含量。

  533计算公式:

  m

  H0-m1

  2O%=m100……………………………………………………………(3)

  0

  式中:m0———表示烘干前样品重,g;

  m1———表示烘干后样品重,g。

  54pH值测定

  541试剂和溶液

  无离子水。

  542仪器

  a.烧杯;

  b.酸度计;

  c.扭力天平(分度值0.01g)。


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