2、解剖检验
取带子实体的病树皮作徒手切片,在显微镜下仔细观察,根据形态特征鉴定是否为病原菌的分生孢子器或子囊壳。
3、保湿培养检验
如病斑无子实体出现,可将有病树皮放在25~30℃条件下保湿培养,待长出子实体时再作解剖检验。
4、组织分离检验
取病健交接处小块组织,经表面消毒后,放人PDA培养基上,置25~30℃条件下培养观察其形态及培养特征。
在PDA培养基上,3d可见具特征的菌落长出,菌丝为棉絮状,初呈白色,后变淡黄色或橘黄色,培养基背面为橙黄色。菌丝生长缓慢,在室温条件下半个月后长出分生孢子器,并溢出大量的分生孢子角。培养时可能遇到病原菌的弱毒系(Hypovirulenstrain),其菌落为白色,产生分生孢子的数量少且需时较长。
5、接种检验
将人工分离培养所得到的孢子在寄主幼树主干或枝条上进行伤口接种,在保湿条件下培养20d后观察症状。
6、病原鉴定
菌丝着生在形成层或皮层内,组成紧密的扇形菌丝层。子座自树皮裂缝中突出,直径0.3~2.0mm,常橘红色,内生分生孢子器或子囊壳。分生孢子器不规则,大小不一,多为1室,色淡黄至茶褐色;分生孢子单胞,无色,长椭圆形或圆柱形,大小为2.4~3.0μm×1.2~1.3μm。子囊壳茶褐色至黑色,球形或扁球形,直径150~350μm,深埋在于座组织中,1个至多个,颈细长,黑色,下部色淡,长达600μm,长颈伸出于座顶部。子囊棒状,顶璧增厚,中有孔道,周围有一亮环结构,大小为36~42μm×5.5~7.0μm;子囊孢子8个,成单行或不规则排列,椭圆形,双胞,无色,隔膜处稍缢缩,大小为5.5~11.0μm×3.0~5.0μm。
检疫处理方法
1、加强检疫,防止带菌苗木、种子、接穗传到无病区。必需从病区调人的苗木,除严格检验外,尚需在萌芽前用3~5°Be石硫合剂或波尔多液(1:l:160)喷施喷洒,或用0.5%福尔马林浸种30min、5%氯酸钠浸苗5min。
2、抓好产地检疫,在疫区内要彻底清除重病株和重病枝,并及时烧毁,减少侵染源。发病轻者可刮除病皮,涂抹0.1%升汞、10%碱水或401、402抗菌剂(10%甲基或乙基大蒜素溶液)200倍液加0.1%平平加(助渗剂)。
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来源:互联网
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