（三）催情药剂量

催情药物主要用于雌蛙，因雄蛙较雌蛙提前一周左右进入发情期，一般不需要注射药物来促进精子的生成和成熟，但为了促进其发情强度，也可酌情给雄蛙注射相当于雌蛙一半的药量。

上述三种药物，可单独使用，也可混合使用，一般混合使用效果会更好些。

单独使用时，促黄体生成素释放激素类似物（LRH-A）为30微克/千克体重；绒毛膜促性激素（HCG）为1200国际单位/千克体重；林蛙脑垂体为15～20个/千克体重.

由于林蛙体躯较小，注入体内催情药水的体种不能太多，所以，催情药物的浓度要配高一些，每只亲蛙注入体内催情药水的体积以0.5毫升左右为宜。

（四）注射方法与效应时间

1、注射方法采用臀部肌肉注射或腹部皮下注射。一般只需注射一次。臀部肌肉注射时，以45度角刺入，进针深度1.5厘米左右。腹部皮下注射时，用镊子夹起肚皮，以水平方向刺入，进针深度2厘米左右。

2、注射操作催产注射时最好两人配合操作，一人用双手握住蛙体，一人以右手持注射器，左手拿消毒棉球轻抵注射部位，退针时，左手用棉球轻轻按揉针孔，防止药水外溢。

3、效应时间将注射催情药物的亲蛙，按1：1性比放入产卵池内。在适宜水温下，催产后的效应时间约为40～48小时，雌、雄亲蛙即开始抱对，继而排卵、排精，完成受精过程。如果超过48小时，仍无抱对现象，则需做第二次催情，第二次催情的药剂用量为第一次的1/2。

4、注射后注意保持环境安静采用人工催产、自然产卵受精的方法，可获得理想的人工繁殖效果。值得注意的是，在亲蛙发情抱对时，应保持环境的安静，否则一旦受到外界的刺激，雄蛙就会产生僵直现象，需数分钟才能恢复过来。因此，要严禁人为惊吓，以免影响产卵和受精率。

五、人工孵化

在自然条件下，野生林蛙的受精卵，由于受天敌的危害和环境及气候等条件的影响，孵化往往很低。而人工孵化，则是在专用的孵化池中进行，避免了各种不利条件的危害和影响，大大地提高了孵化率。

（一）孵化池

为了能把不同时期产的卵分池孵化，避免因不同时期的卵同池孵化而产生蝌蚪规格参差不齐的现象，孵化池可多建几个，数量依亲蛙数量而定。面积不必太大，一般2～3平方米即可，水深20～３０厘米。为保证水中的溶解氧含量，池水应能保持一定的交换量，但水流不能太大，不可冲动卵团。进出水口都要用筛绢罩上，防止有害昆虫、剑水蚤等充入和受精卵或蝌蚪随水流出。

如果条件允许，也可不建孵化池，在大水面中用网箱孵化。网箱面积1平方米左右，箱深40厘米，采用40目聚乙烯网片固定在框架上制成。孵化时将网箱固定架设在水面上，网箱底部入水深度15厘米左右，精心看护孵化即可。

（二）孵化管理

1、投放同一批受精卵受精卵团经充分吸水膨胀后，就可以移入孵化池内孵化。同一池内，要投放同一天产出的卵。

2、孵化密度每平方米可投放受精卵团10～15团，约8000～15000粒卵。

3、水质、水温控制池水要保持微流动和交换，水温保持在18～24摄氏度，切勿超过27摄氏度，否则胚胎或蝌蚪就会被烫死。如果是静水孵化，应每隔6小时更换掉1/4的老水，新注入的水与原池中水的温差，不要超过2摄氏度。

4、送卵操作要轻快在从产卵池向孵化池移送受精卵团时，操作要轻快，不可将受精卵团弄散或将卵团上、下面弄颠倒，否则容易降低孵化率甚至导致胚胎死亡。

5、做好孵化记录要认真记录温度、水深、入孵时间、入孵卵数、受精率、孵化率、孵出时间等，以便发现问题及时处理和总结经验教训。

（三）胚胎发育与变态过程

1、胚胎发育据马常夫等观察结果，卵受精后约10～17小时开始分裂（但在水温低的条件下，2～3天才开始分裂），卵受精的第2天，即进入原肠早期，最初形成背唇，出现新月形小沟。第3天进入原肠胚中期，侧唇出现，原口内卷，背唇和侧唇合成半圆弧形。第4天原口内唇向内卷，原口变小，为卵黄栓所堵塞，过渡到原肠胚晚期。第5天出现神经板，以后神经板边缘升起形成褶，中央向内凹，形成神经沟，沟宽约1毫米，胚体长2.4毫米.第5天半神经褶愈合,形成神经管,口吸盘出现,呈裂缝状,鳃亦出现.第6天至第6天半，出现尾芽，长度为胚体长的1/8～1/9，胚体长为2.8毫米。第7天可见外鳃原基，尾长为全长的1/3，胚胎长6.5毫米。此时胚胎脱离卵胶膜，吸附于卵胶膜或水草等物体上。第8天外鳃分出短指状的枝，体长为7.5毫米,尾长为体长的1/2。第9天外鳃生成线状。10天左右蝌蚪口已张开。发育至第12天，体长11毫米，尾长6毫米，腹部短而圆，尾扁而宽，消化管变成弯曲状。第13天鳃盖生成，外鳃消失，体长14毫米，尾长8毫米，消化管迂回弯曲。自此，胚胎发育基本完成，下一步进入发育完善阶段