猪繁殖与呼吸综合征(PRRS),又名猪蓝耳病,于1987年首先发现于美国,以引起母猪流产、早产、产死胎、弱仔、木乃伊胎及诱发仔猪呼吸系统病变等症状为主要特征的高度传染性病毒性疾病,是制约养猪业发展的因素之一。在我国自1995年暴发此病以来该病使我国的养猪业蒙受重大经济损失。
当前猪蓝耳病流行新特点:
感染率居高不下据上海市奉贤区畜牧兽医站卫秀余等《2005猪病诊断回顾》报告:对全国各地60个猪场送检的226份死胎样品应用PCR方法进行PRRSV抗原检测,结果13个猪场检出阳性样品,阳性率为21.7%。宋云义等(2005)对河南省5个规模化猪场进行PPRS血清学调查,结果5个猪场都检测出PRRS阳性猪群,阳性率达100%。四川农业大学罗宗刚等(2006)应用ELISA方法对7个未进行猪蓝耳病疫苗免疫的规模化猪场进行PRRS抗体检测,结果检出抗体阳性猪场6个,阳性率为85.7%,共检测血清244份,检出阳性血清150份,阳性率达61.5%。虽然不同的地区和不同的猪场,血清学阳性率有所差异,但仍然表明全国各地规模化猪场广泛存在PRRSV的感染,蓝耳病仍然是目前引起种猪繁殖障碍和仔猪呼吸道病的首要疫病。
隐性感染病例增多初产母猪感染PRRSV后其流产率可达50%~70%,以早产和产死胎为特点。但自2000年以来,生产母猪发生流产、产死胎、木乃伊胎的少了,流产率约为10%左右,而大多数母猪表现为滞后产、产后不发情、屡配不孕等,受胎率下降10%~15%。多数种猪和成年猪表现为隐性感染,管理水平与生物安全好的猪群一般不表现出临床症状,只有在混合感染或继发感染其他病原时,猪群会出现呼吸道病症状,发生死亡。由于隐性感染的种猪长期带毒,既可发生垂直传播,又能进行水平传播,其危害性更大,这样的猪群随时都有发生种猪繁殖障碍和呼吸道病的问题。
持续性感染长期存在PRRSV具有持续感染的特性,因此,持续性感染是猪蓝耳病在流行病学上的一个重要特征。带毒母猪的血液、淋巴结、脾脏及肺脏等组织中病毒可存在很长时间,向外排毒达112天之久。病毒可通过胎盘和精液传播,其妊娠母猪产下的仔猪有的可成活,但长期带毒,在猪群中表现出持续性感染,并将长期存在。
免疫抑制导致猪群出现免疫麻痹和免疫耐受研究结果表明PRRSV感染可降低肺泡巨噬细胞的功能,诱导感染细胞的凋亡,引起T细胞亚群发生改变,对B细胞的功能和体内的细胞因子的生产都会产生一定的影响,造成猪体免疫抑制,产生免疫麻痹和免疫耐受。PRRSV感染后引起猪体免疫功能下降,特别是在感染的早期对免疫功能的抑制十分明显。近年来研究结果证实,PRRSV对猪瘟弱毒疫苗和气喘病活菌苗的免疫应答能产生干扰作用,其抗体水平明显低于对照猪群。
仔猪的发病率与死亡率增高当前感染猪群母猪发生急性流产的已不多见,发病已由过去以母猪繁殖障碍为主转为以仔猪的呼吸道病综合症为主。阴性猪场引进了蓝耳病阳性种猪的猪场发病,表现为哺乳仔猪大批发病死亡,死亡率高达80%~100%。阳性猪场由于母猪康复后可产生免疫力,对于再次感染PRRSV均有抵抗力,其产出的仔猪吃初乳后可获得中和抗体,但当仔猪断奶后母源抗体下降,加之断奶应激,营养应激及环境应激等,易诱发保育猪发病,表现为严重的呼吸道病症状,发病死亡率高达20%~50%。哺乳仔猪发病多发生于哺乳期20日龄左右,保育猪发病多发生于30~60日龄,而且多见于发生在春冬两个季节。
混合感染与继发感染病例增多由于PRRSV损害和破坏肺部巨噬细胞和单核淋巴细胞,使其数量减少,功能减弱,导致肺部抵抗外来病原感染的能力明显下降。加之免疫抑制产生免疫麻痹和免疫耐受,猪体对疫苗的免疫不产生免疫应答,使猪体整体免疫力低下,特别是仔猪表现更为明显,致使呼吸道和肺部容易遭受各种病原的混合感染或继发感染,使病情复杂化,增大发病率和病死率。在临床上常见蓝耳病与圆环病毒Ⅱ型或猪瘟病毒或伪狂犬病毒或肺炎支原体等混合感染。常继发的病原有副猪嗜血杆菌、链球菌、放线杆菌,巴氏杆菌、沙门氏菌和附红细胞体等,呈现双重感染或多重感染。据有关报道,目前由单一病原引起的疫病仅占畜禽发病的17%,而83%的疫病都是由双重感染或多重感染而引发的。
我国的流行毒株仍为美洲型依据血清学试验及结构基因序列分析可将PRRSV分为两个血清型,即欧洲型和美洲型,二者来源于同一祖先,但二者之间存在显着的抗原差异性。前者主要流行于欧洲地区,后者主要流行于美洲和亚太地区。欧洲型代表株为LV株,美洲型代表株为VR-2332株,两者的核苷酸序列同源性约为60%。分子生物学研究表明欧洲和美洲两地区的分离株存在广泛的基因变异,美洲型毒株之间的差异性较大,而欧洲型毒株之间则相对保守。通过对我国各地分离的PRRSV毒株的基因组分析表明,目前我国流行的毒株仍为美洲型。据邓雨修等(2005)对分离于华东地区和广西等地的50株PRRSV进行RT-PCR-RFLP分析,发现了三种不同基因亚型,其中一群与美国的分离株VR2332及其疫苗毒株相近,另外两个亚群可能是我国流行毒株的变异。
成为诱发猪高热综合征的主要病原之一2006年6至10月份,先后在安徽、江西、浙江、湖南、湖北、江苏等省份部分地区发生猪高热综合征,发病率高达30%~50%以上,病死率为40%~50%,造成重大的经济损失。据有关省采取病料,经实验室检验,结果表明病原中蓝耳病病毒占62.4%(78/125),猪瘟病毒占40%,伪狂犬病毒占20%,其次为圆环病毒与猪流感病毒等。可见,在高热高湿的应激因素诱发下,已隐性带毒及野毒即可并发和继发感染,造成疫病的发生与流行。
由于PRRS传播迅速,流行广泛。而且该病毒抗原具有多样性,目前尚无特效的治疗措施,现在防治本病的疫苗主要是灭活苗和弱毒苗,但是弱毒苗的安全性和效力并不可靠。它也不能阻止本病的再次感染。弱毒苗具有返祖现象,灭活苗的保护率也很有限,而且用抗生素的效果也不十分理想。而从传统中草药中开发出对防治PRRS国内外的研究还很少。本试验采用中宝蓝耳康对猪繁殖与呼吸综合征的疗效进行了研究。
1材料
1.1试验药物
中宝蓝耳康(由深圳中宝天然生物科技发展有限公司提供)。PRRS灭活苗,哈尔滨兽医研究所,批号:2005015,PRRS特异性抗体检测试剂(HerdCheck IDEXX Kit,美国富道公司产品),美洲型蓝耳病强毒株由中监所提供。
1.2试验猪
由某猪场提供,均为相同来源的30头30日龄体重8kg断奶仔猪,攻毒前测定血清中PRRSV抗体均为阴性(分组,称重)。
2方法
2.1预试验
先用几头猪分别滴鼻2ml,4ml,8ml,16ml,与对照相比,看看是否发病。
2.2免疫增强试验
组别 第1-7天 第8天 第15天 第23天 第38天 第68天 第98天
Ⅰ 疫苗 无 颈部肌肉注射免疫PRRS灭活苗 采血,测抗体 采血 采血 采血 采血
Ⅱ 0.1g/kg+ 疫苗 0.1g/kg体重灌服蓝耳康,每日两次 免疫 采血 采血 采血 采血 采血
Ⅲ 0.2g/kg+ 疫苗 0.2g/kg,同上 免疫 采血 采血 采血 采血 采血
Ⅳ 0.4g/kg+ 疫苗 0.4g/kg,同上 免疫 采血 采血 采血 采血 采血
Ⅴ 0.2g/kg+疫苗+0.2g/kg 0.2g/kg,同上 免疫,免疫后0.2g/kg灌服蓝耳康,连续7天 采血 采血 采血 采血 采血
Ⅵ 疫苗+0.4g/kg 无
免疫,免疫后0.4g/kg灌服蓝耳康,连续7天
采血 采血 采血 采血 采血
2.3攻毒保护试验
组别 第1天 第8-14天 第15天 第16-35天
Ⅰ 0.1g/kg 无 0.1g/kg体重灌服蓝耳康,每日两次 4ml PRRSV/头,并继续0.1g/kg投喂蓝耳康
每日观察临床症状(精神、食欲、粪便、皮肤颜色、死亡),并记录各组猪只的临床表现,并于攻毒后1-10天每日测体温。攻毒后14,21,28,38天采血、鼻塞或粪便拭子,将每组样品RT-PCR。
Ⅱ 0.2g/kg 无 0.2g/kg,同上
4ml PRRSV/头,并继续0.2g/kg投喂蓝耳康
Ⅲ 0.4g/kg 无 0.4g/kg,同上
4ml PRRSV/头,并继续0.4g/kg投喂蓝耳康
Ⅳ 疫苗+0.2g/kg 免疫 0.2g/kg,同上 4ml PRRSV/头,停止给药
Ⅴ 疫苗 免疫 无 4ml PRRSV/头
Ⅵ 阴性对照 无 无 4ml正常细胞培养物/头
2.4攻毒治疗试验
组别 第1天 80%的猪开始发病时 治疗14天后
Ⅰ 0.1g/kg 4ml PRRSV/头滴鼻
每日测体温,0.1g/kg体重灌服蓝耳康,每日两次,连续14天
治疗14天后,观察临床症状(精神、食欲、粪便、皮肤颜色、死亡),并记录各组猪只的临床表现,并于治疗后14,21,28,38天采血、鼻塞或粪便拭子,将每组样品RT-PCR。
Ⅱ 0.2g/kg 4ml PRRSV/头 每日测体温,0.2g/kg,同上
Ⅲ 0.4g/kg 4ml PRRSV/头 每日测体温,0.4g/kg,同上
Ⅳ 疫苗+0.2g/kg 4ml PRRSV/头
每日测体温,紧急接种PRRS灭活苗,并0.2g/kg灌服蓝耳康,每日两次,连续14天
Ⅴ 疫苗+抗生素 4ml PRRSV/头
每日测体温,紧急接种PRRS灭活苗,并使用头孢噻肟,每日两次,连续14天
Ⅵ 病毒感染对照 4ml PRRSV/头 无
3.1免疫增强试验
3.2攻毒保护试验
注:保护判断标准
保护(显效):用药14d后,猪精神、食欲好转,粪便、体温、皮肤颜色均正常,病毒血症或排毒时间缩短甚至不带(排)毒。
无效:用药14d后,猪精神、食欲未见好转,粪便、皮肤颜色异常,体温高,甚至衰竭死亡,用药组与对照组相比带毒排毒时间无差异。