多糖广泛存在于动物细胞膜、植物和微生物细胞壁中,到目前为止,已有几百种多糖从自然界被分离和提纯,多糖不仅是生命有机体的重要组成成分,还具有广泛的生物活性,如免疫调节、抗炎、抗病毒、抗肿瘤、抗凝血、抗氧化、抗辐射、抗衰老、降血糖、降血脂、保肝、抗寄生虫等。多糖作为非细胞毒物质,对正常细胞几乎无毒副作用。近十年来中药多糖在兽医临床应用方面取得了可喜的进展,现综述如下。?
1 中药多糖对畜禽疫苗免疫应答的影响?
在兽医卫生预防措施中,畜禽多种病毒及细菌性疾病的特异性预防占重要的地位。在很多情况下,如畜禽机体处于免疫缺陷状态,疫苗的保管,运输方式不当和接种方法失误,以及缺乏对疫苗生物活性的严格控制等因素,在畜禽中往往无法建立充分的免疫环境甚至造成免疫力下降。而多糖具有多方面的生物活性,它能调节机体免疫机能。主要影响网状内皮系统、巨噬细胞、淋巴细胞、白细胞以及DNA、RNA、蛋白质的合成、抗体的生成、cAMP与cCMP的含量 、补体的生成以及对干扰素的诱生作用等。因此将多糖与疫苗配合使用,将起到事半功倍的效果。??
美国卡林顿研究室与德克萨斯州AδM大学研究芦荟中提取的乙酰甘露聚糖发现它很容易被免疫细胞摄入,从而大大增强宿主动物对入侵微生物(如病毒)的免疫应答,将乙酰甘露聚糖与鸡马立克疫苗合用,免疫力的产生比仅接种马立克疫苗者提前3天。将乙酰甘露聚糖注射1日龄雏鸡后再以粗粒气雾法对其接种新城疫B1疫苗,结果免疫应答增强。Chinnah (1992)等将芦荟多糖与ND-IBD-IB(鸡新城疫—法氏囊炎—传染性支气管炎)三联苗合用,发现芦荟多糖能显著提高ND抗体的滴度,IBD抗体存留时间显著延长。杨汉春等报道,玉米花粉多糖(PPC)与鸡新城疫—减蛋综合征疫苗配合使用,免疫后第60天,与对照组相比,PPC对 ND和EDS76免疫效果HI值有显著提高(P<0.05)。玉米花粉多糖按50、 100、200 mg剂量分别与猪瘟弱毒细胞冻干苗共同免疫猪,于免疫后140 d,抗体效价均明显高于对照组(P<0.05),第21天达到高峰,且3个多糖试验组间差异不显著。屈洪岩等研究表明,玉米花粉多糖分别按每只10、 5 mg两个剂量组胸肌注射7日龄伊莎雏鸡,同时新城疫克隆弱毒疫苗皮下注射,在首免后3、5、10、15天时, 二免后5、20、45、60、75天时,两个剂量组HI抗体效价的平均值与对照组相比,差异显著或极显著。张世军等将苜蓿多糖与猪瘟兔化弱毒疫苗合用,免疫后10 d、20 d和30 d,免疫抗体抑制率试验组均高于对照组(P<0.01)。谢春芳等报道,云芝多糖与新城疫Lasota苗、法氏囊弱毒疫苗配合使用, 免疫后28天新城疫疫苗在免疫接种后抗体滴度,试验组高于对照组3个滴度,对法氏囊疫苗 ,试验组鸡在免疫后7天抗体阳性率比对照组高13?6%。蛋雏鸡于7日龄开始注射黄芪多糖 ,每隔20天注射1次,注射剂量为2 ml/kg,产蛋后,为避免应激反应,影响产蛋,改为饮水服用黄芪多糖注射液,剂量为注射量的2倍,可大大提高蛋鸡的抗病能力和成活率,对产蛋率、雏鸡增重无影响,长期使用无毒副作用,安全可靠。李宏全等报道,将黄芪多糖(APS)分别按0、2.5、5.0、10.0 mg/只,以点眼、滴鼻,皮下注射 、肌肉注射的不同方式,分别与鸡NDI系、NDIV系、ND油乳剂苗和IBD冻干苗同时接种于4组健康非免疫雏鸡,各APS组血清ND、IBD抗体效价显著高于APS空白组(P<0.05),其中以APS 5.0 mg/只组的抗体效价最高。孙月平等将黄芪多糖和环磷酰胺与新城疫弱毒苗、新城疫油乳剂苗配合应用于雏鸡,试验后4、8、18、28、38 d,环磷酰胺能使新城疫HI抗体水平下降,黄芪多糖能使其上升,两者相比差异极显著(P<0.01),黄芪多糖并能使环磷酰胺的这种作用逆转。刘永庆等通过 对1~50日龄的海兰白雏鸡持续添加3%的虾健多糖添加剂,结果显示,50日龄时其血清抗IBD病毒抗体滴度显著增高,抗ND抗体滴度虽有增高,但差异不显著。实施常规ND免疫,酵母多糖(YPS)的摄入可显著提高HI抗体滴度,YPS投给方式对HI滴度的提高无明显影响, 通过饮 水摄入YPS剂量为150 mg/kg和300 mg/kg的滴度相当, YPS自由饮服与肌注同时给药也未观察到叠加效应。 程富胜等研究表明, 应用8301多糖配合鸡马立克疫苗给1日龄试验鸡, 免疫后96日龄, 8301多糖肌注组在稀释度1∶1和1∶2时血清抗体效价为强阳性和阳性 ,与对照组相比差异显著。
2 药多糖对畜禽促生长的影响?
胡庭俊等报道,8301多糖200 mg/kg剂量给伊莎褐鸡肌肉注射1次后,在60 d的观察期内, 供试鸡无任何不良反应,脏器正常,且具有明显的增重效应。酵母多糖(YPS)在雏鸡6~15、1 8~27、30~39日龄间按20 mg/kg灌胃,灌胃液体积为1 ml,饲养50天后仔鸡平均体重较对照组提高7.78%(P<0.01)。金淑英等在研究酵母多糖对断奶仔猪抗病促生长作用时,选取了28日龄杜长大断奶仔猪38头,对照组饲喂不含抗生素的仔猪颗粒料,试验I组饲喂含100×10-6?金霉素的颗粒料,试验Ⅱ组饲喂含1%酵母多糖的颗粒料。 结果表明,日增重试验Ⅰ、Ⅱ组分别比对照组提高5?71%及6?06%;饲料转化效率试验Ⅰ 、Ⅱ组分别比对照组提高4.23%及4.76%;腹泻率试验Ⅰ、Ⅱ组分别比对照组降低16.6 %及50%。李逐波等以多糖微量元素(Fe、Cu、Zn、Mn等)络合物饲喂肉鸡,试验期42天,生长率较对照组提高7.06%(P<0.01),料重比较对照组降低15.57%(P<0.01)。毛兴奇以多糖微量元素(Fe、Cu、Zn、Mn)络合物饲喂生长肥育猪 ,试验期30天,生长率较对照组提高30.6%,(P<0.01),料重比较对照组降低22.22%(P<0.05)。曾子建等研究表明,以多糖微量 元素(Fe、ZN、Mn)饲喂2月龄断奶仔猪,试验期为23天,试验组与对照组相比日增重率提高12.83%(P<0.01),料重比降低19.33%(P<0.01)。朱新产等在肉鸡饲粮中添加1.5%海藻多糖,对山东地方特色保种白羽鸡进行饲养试验,肉鸡6周龄的平均体重较对照组提高15.7%(P<0.05),料肉比降低7.39 %(P<0.05)、屠宰率、胸腿肌率二组间差异显著(P<0.05),半净膛率、全净膛率、腹脂率、肝重均有提高,但差异不显著(P< 0.05)。?
3 中药多糖对畜禽免疫器官生长发育的影响
多糖对免疫器官的发育具有促进作用,但多糖的来源不同,或因提取方法不同,其生物活性也不一样,对免疫器官发育的影响也不同。张运涛等报道,在蛋用雏鸡的饮水中分别添加0.1%和0.5%的酵母多糖,结果表明:酵母多糖对雏鸡免疫系统的成熟具有明显的促进作用,0.1%添加组的胸腺、脾脏、法氏囊和盲肠扁桃体的重量或面积分别比对照组高22.48 %、10.01%、11.81%和28.55%(P<0.01),0.5%添加组分别较对照组高86.17%、58.51%、56.32%和56.43%(P>0.01)。张乐萃等研究表明,将黄芪多糖、香菇多糖、复合中药多糖(以黄芪多糖和香菇多糖按一 定比例混合)、生理盐水分别按200 mg/kg,200 mg/kg、200 mg/kg、0.2 ml/只给健康罗曼雏鸡肌肉注射,结果显示:三个中药多糖组与对照组相比,脾重分别提高 130.5 mg、118.5 mg和177.5 mg,腔上囊重分别提高70.7 mg、33 mg和90.9 mg。李宏全(2001)报道,APS能显著促进鸡脾和腔上囊的发育,能抵抗免疫抑制剂对免疫器官的损害或修复受损的免疫器官,使免疫器官的组织结构恢复正常水平,维持机体的正常免疫机能。 张乐萃等研究证实,给健康罗曼雏鸡肌注新城疫(ND)黄芪多糖佐剂油乳苗、ND香菇多糖佐剂油乳苗、ND复合多糖(以黄芪多糖和香菇多糖按一定比例混合)佐剂油乳苗、ND油乳苗(对照) 、生理盐水(空白对照),分别于注苗后5、10、15、25、35 d取脾、法氏囊称重,结果表明 ,中药多糖作为新城疫油乳苗佐剂有明显增加免疫器官重量和免疫器官重与体重之比的作用 ,复合中药多糖对脾、法氏囊的增重效果优于单一多糖,其对抗体水平的影响与免疫器官重量的增加相一致。郝永清等将水溶性苜蓿多糖给肉仔鸡肌肉注射通过对肉仔鸡免疫器官组织学观察表明,苜蓿多糖组与对照组相比,胸腺发育良好,皮质较厚,淋巴细胞密集、胸腺小体较多;脾脏红、白髓界限明显,淋巴小结数量较多,动物周围淋巴组织鞘丰富,脾索淋巴细胞密集,脾脏发育良好;法氏囊皱壁大,皮质与髓质分界明显,淋巴细胞密集,施丹纽士氏滤泡大而密集;盲肠扁桃体发育良好,有丰富的淋巴细胞和淋巴小结,绒毛顶端也有淋巴小结。
4 中药多糖对雏鸡氟中毒的影响?
王建平、刘春吉等给罗曼褐壳蛋公雏分别饲喂中药多糖和灵芝多糖,研究中药多糖和灵芝多糖对雏鸡氟中毒的影响,结果发现,中药多糖和灵芝多糖高氟组和单纯高氟组比较 ,各内脏器官(胸肌、腿肌、肝脏、腺胃、肌胃、脾脏、胸腺、法氏囊等)病变轻,鸡发育、 生长良好,粪氟排出量多。?
5 展望?
5.1 构建新疫苗?
随着畜牧养殖业越来越向工业化生产发展,免疫预防也出现了新的问题,其中选择最佳免疫途径,尽可能地模拟病原体的自然感染途径显得更为重要。最近针对大量的畜禽肠道内外感染性疾病而提出的口服黏膜免疫已显示出优势。由于生物性多糖存在着普遍的免疫调节与促进作用和特殊的组成结构,因此,利用多糖的结构组成来构建适宜的疫苗将成为可能(不仅 仅作为佐剂)。多糖用于疫苗构建并释放到黏膜诱导处,在发生感染的黏膜表面激发宿主的保护免疫应答反应.
5.2 研制新药?
多糖可经过浓硫酸法、三氧化硫—吡啶法、氯磺酸—吡啶法和三氧化硫—二甲基甲酰胺法等 4种方法硫酸化而形成多糖硫酸酯,其对病毒有明显的抑制作用。如牛膝多糖硫酸化后可明显抑制乙型肝炎病毒HBA和HBA的活性,对Ⅰ型单纯性疱疹病毒有明显的抑制力。从夏枯草中分离的硫酸化多糖对人类免疫缺陷病毒(HIV)有抑制作用。病毒为了繁殖,需要最佳浓度的铁和锌,这些金属对于大量的酶反应是必需的,直接增加或减少铁锌浓度,则病毒的生长可以受到抑制。已知镍和钴不足,可加剧锌的缺乏,提高铁的浓度,可抑制钴的吸收。据此, 可以将多糖作为配体与铁发生络合反应,生成一种以铁离子为中心的络合物,作用于病毒,夺 走锌离子,从而抑制核糖核苷酸还原为脱氧核糖核苷酸,相应的抑制病毒DNA的合成,达到抑制病毒的作用。多糖还可用作控释缓释制剂的新辅料。药用辅料在相当程度上决定新剂型和新制剂的质量,而多糖不仅具有抗炎、抗病毒、抗癌的作用,而且可以增强机体的非特异性或特异性免疫功能,保护细胞损伤等功能。利用多糖作为辅料不仅具有控释缓释制剂的一 般优点,而且因其对免疫功能的调节作用,可以大大地提高药物的疗效。?
中国加入WTO后对于各种药品及保健品的要求更加严格,药物及保健产品及毒副作用在畜产品中的残留问题一直是药物研究领域中需要解决的课题,多糖作为天然产品具有毒副作用小、无残留等特点,已得到国际上的认可,因此,中药多糖的应用研究必将取得新的进展。
来源:《中兽医医药杂志》