近年来随着对中药及其制剂的广泛应用和对其毒性研究的深入，人们发现许多认为是“无毒”的中药具有一定的毒副作用，本复方中药是用于防治禽流感的一种药物，为了对其安全性做出科学评价，为临床用药提供保证，进行了安全性实验研究。?

　　1 材料与方法 ?

　　1.1 昆明小鼠 昆明小鼠80只，雌雄各半，体重18～22 g，由哈尔滨兽医研究所实验动物中心提供。在人工照明12 h、通风良好情况下饲养观察3天，随机分成8组，10只/组。给药前18 h和给药后4 h内禁食，但不禁水。?

　　1.2 复方中药 自行研制的复方中药为黄褐色透明澄清液体，由贯众、板蓝根、黄芪、柴胡、连翘、黄连、金银花、黄芩及甘草9味中草药组成。?

　　1.3 试验环境 室温18～25℃，相对湿度60%，室内无对流风。?

　　1.4 半数致死量（LD50）的测定采用简化机率单位计算法计算LD50。采取口服和腹腔注射两种给药途径。口服剂量为1 600 mg/kg体重，每只0.5 ml，口服组组间剂量比为1∶0.8，试验共分7组，其中1组为对照组，10只/组；腹腔注射组注射剂量为1000 mg/kg体重，每只0.5 ml，组间剂量比为1∶0.75，试验共为6组，其中1组为对照组，10只/组。腹腔注射后，及时剖检死亡动物并取心、肝、脾、肾、肺及肠做病理切片，观察其病理变化。?

　　1.5 最大耐受量的测定 试验共分5组，口服给药剂量分别为5 000 mg/kg体重、4 000 mg/kg体重、3 200 mg/kg体重、2 600 mg/kg体重，每只1 ml，3次/天，观察10天内昆明小鼠的最大耐受量。最后一组为空白对照组。?

　　2 结果?

　　2.1 急性毒性的测定 腹腔注射复方中药10 min后，昆明小鼠表现出兴奋不安，痉挛，缩成一团，呼吸困难，死亡时间在给药后0.5 h。用简化几率单位计算法（也称和尔恩法）计算LD50，试验结果见表1。

表1 急性毒性试验

　　经计算LD50=425.6±126.4 mg/kg哑铃分子结构，促使红细胞形成“缗钱状聚集体”，从而使血液黏度升高，因此可以认为，降低血浆纤维蛋白含量以减少红细胞“缗钱状聚集体”的形成，也是电针降低血液黏度的一个方面。?

　　除上述因素外，血小板的聚集性也是影响血液黏度的重要因素。血小板保持一定的聚集性，通过聚集形成血小板血栓，对于防止出血是必要的。但当体内血小板聚集性过强时，会形成大量的血小板血栓，而使血液黏度增高，流动性降低，对血液循环产生不良影响。在本试验中，电针后绵羊的血小板聚集性显著降低，说明降低血小板的聚集性，使之处于分散状态，防止或减少血小板血栓的形成，是电针降低血液黏度的又一途径。?

　2.2 对数死亡几率单位直线绘制 利用表1的结果，在Excel中绘制直线，得出剂量对数死亡几率单位的关系。剂量对数?死亡几率直线：y=0.2674x+1.3041(y为对数剂量，x为死亡几率)。?

　　2.3 对昆明小鼠的体重影响?

　　2.3.1 口服复方中药对昆明小鼠体重的影响 口服复方中药后，连续7天观察昆明小鼠的临床变化并记录体重。昆明小鼠未出现任何临床变化。第Ⅰ组(1 600 mg/kg)7天内体重增加5.49 g；第Ⅱ组（1 280 mg/kg）7天内体重增加4.24 g；第Ⅲ组（1 024 mg/kg）7天内体重增加4.56 g；第Ⅳ组（819.2 mg/kg）7天内体重增加3.61 g；第Ⅴ组（655.36 mg/kg）7天内体重增加6.87 g；第Ⅵ组（524.2 mg/kg）7天内体重增加7.19 g。对照组7天内体重增加6.53 g。?

　　2.3.2 最大耐受量的测定?

　　最大耐受量倍数=每只小鼠的耐受药量/小鼠平均体重×鸡平均体重/鸡每次用量经计算，该药的最大耐受量倍数为400。给药后7天，连续观察昆明小鼠的精神状态并称量体重，了解体重的变化。昆明小鼠精神状态良好，在7天内体重增加5.49 g，而对照组昆明小鼠在7天内体重增加6.34 g。?

　　2.4 昆明小鼠各脏器的病理变化 给昆明小鼠腹腔注射不同剂量的复方中药10 min后，高剂量组昆明小鼠表现出兴奋不安、抽搐等现象，并在0.5 h发生死亡。马上对其剖检，发现死亡鼠的肝脏体积稍肿大，被膜紧张，边缘钝圆，表面呈暗紫红色，切面呈暗红色，质地变软；脾、肾脏体积均增大。随着剂量的减少，昆明小鼠的死亡率随之降低，脏器病变也随之减轻。病理组织学检查表明，各脏器的病理变化与剂量呈一定的关系，高剂量组昆明小鼠的心、肝、脾、肺、肾和肠出现较严重的病理变化。具体检查结果如下。?

　　肝脏，中央静脉可见有红细胞，少量肝细胞发生变性坏死，肝细胞体积增大，胞浆内有大小不等的空泡，核偏位。肠，肠黏膜固有层血管充血、白细胞浸润和水肿，黏膜上皮中杯状细胞显著增多。脾脏，呈急性脾炎变化，被膜下有多量红细胞，淋巴滤泡结构不明显，淋巴细胞发生变性坏死，淋巴细胞数量减少。中央动脉内皮增生，数量增多，向管腔内凸出。肺脏，小支气管黏膜上皮细胞发生变性坏死，管腔内有少量脱落的炎性细胞和一定量的红细胞。淋巴细胞和巨噬细胞等炎性细胞浸润，有少量的脱落的上皮细胞、炎性细胞和红细胞。肾脏，肾小管上皮细胞空泡变性，严重的发生坏死。变性细胞内有大小不等的空泡，严重的胞核溶解，消失，肾小管间有一定量的炎性细胞浸润。心脏，即纤维表面不平坦，成凸凹状，肌浆内着色不均匀，有红色着染的点状或块状物质，心肌纤维核数量减少，肌纤维断裂、崩解、溶解、消失。肌纤维间有一定量的红细胞。中、低剂量组小鼠各器官出现的病理变化较高剂量组明显减轻，与对照组相比差异不明显。?

　　3 讨论 ?

　　3.1 复方中药对昆明小鼠的急性毒性 口服组和腹腔注射组的半数致死量值差异较大，说明小鼠对于腹腔给药途径敏感。可能经口服给药后，在消化道内经过各种消化酶的作用，有毒物质被降解为无毒物质进入血液循环。而腹腔注射后，腹腔面积大，吸收快，药物直接以原型的形式进入血液循环，引起全身中毒的症状。?

　　3.2 昆明小鼠各脏器的病理变化 腹腔注射复方中药Ⅱ后，昆明小鼠在0.5 h内出现死亡。死亡率随着剂量的加大有增加的趋势。心、脾、肺、肾、肠的病理变化也随着剂量的加大而加强。注射药物后，该药在腹腔内快速吸收，几乎不受吸收相的影响，分布全身。观察心、肺、肝、肾的病理变化，均可以看出静脉性充血即瘀血的现象。静脉性充血(简称瘀血)是指组织或器官因静脉回流受阻，血液流出量减少，使血管内静脉血液量过度充盈的现象。可能是因为该复方中药的有毒产物，侵害心脏，引起心肌变性，心肌收缩力减弱，使心输出量减少而形成心脏积血，当心舒张时，静脉血流就不可能完全回到心脏而淤积在静脉内，引起各器官的瘀血?

　　3.3 口服复方中药Ⅱ对昆明小鼠体重的影响 口服复方中药Ⅱ后不同剂量对小鼠的增重情况不同，在第Ⅰ组(1 600 mg/kg)至第Ⅳ组（819.2 mg/kg）体重增加幅度比对照组慢，而第Ⅴ组（655.3 mg/kg）和第Ⅵ组（524.2 mg/kg）体重增加幅度比对照组快，说明该复方药物在适宜剂量时，有增加体重的作用。故该药在临床应用时，不仅有抗病毒、增强机体免疫力，还有增加体重的作用。（中国兽医杂志）