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清宫液Ⅱ号抗炎药理学研究

零零社区网友  2006-01-16  互联网

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子宫内膜炎是奶牛的一种常见疾病,可导致母牛生殖机能紊乱、不孕、降低生产性能,给奶牛场及养殖户造成较大经济损失。清宫液Ⅱ号是依据子宫内膜炎的病理学过程和中兽医学理论,利用中药现代研究成果选药组方,用中药有效成分提取和制剂新工艺研制而成的用于治疗奶牛子宫内膜炎的纯中药制剂,临床试验结果证明,安全高效。笔者主要通过建立四种不同炎症模型,对清宫液Ⅱ号的抗炎药理学进行研究。

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1 实验材料与仪器?

1.1 实验动物?

昆明种小白鼠,雌雄各半。甘肃医学科学院实验动物研究中心提供。

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1.2 药物?

清宫液Ⅱ号,中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所研制。

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1.3 主要试剂?

氢化可的松注射液,天津药业焦作有限公司,生产批号040124-2。伊文思兰,美国Fluka公司,进口分装。其他试剂为国产分析纯。?

1.4 主要仪器?

电子天平,LIBROR L-160DTP型。紫外可见分光光度计,GBC Cintra6型。

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2 实验方法与结果?

2.1 清宫液Ⅱ号对小鼠耳肿胀的影响?

参照文献方法,选取健康、体重20.3±2.1 g昆明鼠,按照表1分为4组,每组20只,雌雄各半,在正常饲养的基础上每组每天给药1次,连续4 d,其中模型组每次给予等体积生理盐水。最后一次给药后1 h,于每只小鼠左耳两面滴二甲苯0.05 ml致炎,右耳作对照。致炎后20 min处死小鼠,在两耳相同部位打下耳片,于天平精确称重,以(左耳重-右耳重)/右耳重计算鼠耳肿胀率。结果见表1。

2.2 清宫液Ⅱ号对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响

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参照文献方法,选取健康昆明鼠,体重19.3±1.9g,按照表2分为4组,每组20只,雌雄各半,在正常饲养的基础上每组每天给药1次,其中模型组每次给予等体积生理盐水,连续给药4 d。最后一次给药后1 h,每鼠尾静脉注射1%伊文思兰溶液0.2 ml/只,随即腹腔注射0.7%冰醋酸溶液0.1 ml/10g体重致炎。20 min后处死小鼠,用5 ml生理盐水冲洗腹腔,将收集的腹腔液1 000 r/min离心5 min,收集上清液,在紫外可见分光光度计590 nm波长处测OD值,以OD值表示腹腔液中的伊文思兰含量。??

表 1 清宫液Ⅱ号对小鼠耳肿胀的影响

2.3 清宫液Ⅱ号对小鼠足跖肿胀及前列腺素E2(PGE2)渗出的影响?

参照文献方法,昆明鼠分组及用药同实验2.2,最后一次给药后0.5 h,每只小鼠右后足足跖部皮下注射1%角叉菜胶0.03 ml(0.0241 g)致炎。4 h后处死小鼠,齐踝关节切下两后足于天平分别精确称重,以(右后足重-左后足重-致炎剂)/左后足重计算足跖肿胀率。

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将炎足剥皮,浸于2.5 ml生理盐水中2 h,将浸泡液 3 000 r/min离心15 min,取上清液0.5 ml,加入2 ml 0.5 mol/l KOH-甲醇溶液中,于50 ℃水浴中异构化20 min。加甲醇至5 ml,在278 nm处测紫外吸收,以OD值表示溶液中PGE2含量。结果见表3。

参照文献方法,选取健康昆明鼠,体重20.3 ±2.1 g,按照表4分为3组,每组20只,雌雄各半。无菌条件下将具有青霉素活性的直径8 mm的滤纸片(0.0093 g)植入小鼠肩胛部皮下,术后第2天开始给药,每5 d一个疗程,连续18 d,其中模型组给予等体积的生理盐水。最后一次给药后1 h处死小鼠,取出纸片及周围的肉芽组织,于60 ℃干燥24 h至恒重,在精密天平准确称量肉芽组织重量,计算肉芽组织重量(以每10 g小鼠体重所对应的肉芽肿质量表示)。

3 讨论?

本实验以鼠耳肿胀模型、毛细血管通透性增加模型、足跖肿胀三个急性炎症模型和纸片肉芽肿慢性炎症模型,考察了清宫液Ⅱ号的抗炎药理学特征,结果表明,清宫液II号能够明显对抗由二甲苯引起的鼠耳肿胀,对醋酸引起的小鼠腹腔毛细血管通透性增加有明显的抑制作用。在足跖肿胀实验中,清宫液Ⅱ号对小鼠足跖肿胀度及炎足的PGE?2渗出都具有显著的抑制效果,对炎足组织中的两个炎症指标同时表现出的抑制效果也证明了清宫液II号的良好抗炎作用。由以上三个急性炎症模型的实验结果可以看出,清宫液Ⅱ号对急性炎症具有十分明显的抗炎效果。清宫液Ⅱ号可以明显减少纸片导致的肉芽组织增生,表明清宫液Ⅱ号也能够很好地对抗慢性炎症的发生。

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实验用两个不同剂量(0.125 g/ml和0.03125 g/ml)对清宫液II号进行了考察,结果发现,这两个剂量对急性和慢性炎症的都能表现出明显的抗炎作用,这为选择清宫液II号的临床用药剂量提供了有效的参考。?

在实验中,不同炎症模型的清宫液Ⅱ号用药途径并不完全相同。鼠耳肿胀模型选择了腹腔注射的给药方式,而其他三个炎症模型则选择了灌胃的给药方式,实验结果表明,在不同的用药途径下,清宫液Ⅱ号均可有效地抑制了炎症发生,这进一步证明了清宫液II号对炎症的抑制作用。

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临床上,奶牛子宫内膜炎表现出各种炎症类型,选择一种有效的抗炎治疗药物十分必要。清宫液II号对急性、慢性炎症的过程都具有明显的对抗作用,因而为临床上将清宫液Ⅱ号用于各种类型子宫内膜炎的治疗提供了理论依据。?



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