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王晶钰1, 张万珍2, 张彦明1, 郭抗抗1
(1. 西北农林科技大学动物科技学院, 陕西杨陵712100; 2. 秦皇岛市肉鸡示范场, 河北秦皇岛066200)
中图分类号: S858. 3　　　　　　　　　　　　　　　文献标识码:A 文章编号: 100725038 (2003) 0220092202
摘　要: 为了解新城疫弱毒苗和传染性支气管炎弱毒苗接种对肉鸡大肠杆菌病发病的影响,对8 日龄肉仔鸡用不同剂量NDV clone230 株或IBV 2H120 株进行滴鼻及饮水, 48 h 后相同途径接种2 株不同“O ”血清型的致病性大肠杆菌。
结果表明, 致病性大肠杆菌单独接种鸡死亡率在20%～ 25% 之间, 而NDV clone230 株或IBVH120 株与致病性大肠杆菌联合接种鸡死亡率有明显增加, 达40%～ 75%。
关键词: 新城疫病毒clone230 株; 传染性支气管炎病毒H120 株; 致病性大肠杆菌; 联合接种; 肉鸡
大肠杆菌病是肉鸡养殖中最常见的细菌性传染病之一, 可引起胚胎死亡、脐炎、败血症、肉芽肿、眼球炎等, 每年给肉鸡养殖业都能造成严重的经济损失[ 123 ]。大肠杆菌病的发生往往存在一定的诱因, 如鸡舍通风不良, 氨气浓度过高, 长时间停水喂料, 发生鸡毒支原体感染等[ 426 ]。而肉鸡养殖中在NDV、IBV 疫苗滴鼻点眼或饮水免疫后几天, 常不同程度地发生大肠杆菌病, 提示NDV、IBV 疫苗接种促进了鸡大肠杆菌病的发生。为了解NDV 和IBV 感染在肉鸡大肠杆菌病的发生中的作用, 特进行了本项研究。
1　材料
1. 1　菌株与毒株
鸡致病性大肠杆菌Q 16 (O 22 ) 和SH2436 (O 89 ) , 由西北农林科技大学生物制品研究中心提供, NDVclone230 株、IBV H120株, 购自中国兽药监察所, 本实验室传代保存。
1. 2　试验用鸡胚、雏鸡9～ 11 日龄非免疫鸡胚, 由西北农林科技大学生物制品研究中心提供, 8 日龄艾维茵肉鸡, 由陕西正大公司种鸡场提供。
2　试验方法
2. 1　NDV clone230 株及IBV H120 株E ID50测定将NDV clone230 株和IBVH120 株用生理盐水作1021～ 1029梯度稀释, 每稀释度接种10 日龄非免疫鸡胚8 枚, 孵化144 h , 按Reed2M uench 法计算半数鸡胚感染量(E ID50)。
2. 2　IBV H120 株与大肠杆菌配合感染将100 只8 日龄艾维茵肉仔鸡随机分为5 组, 编号1～ 5 组, 20 羽?组。对1～ 4 组每羽滴鼻点眼5. 0×105
E ID50 IBV H120 株, 24 h 后, 3～ 4 组每羽口服1. 5×106
E ID50 IBV H120 株, 48 h 后, 对2、4、5 组每羽滴鼻接种大肠杆菌Q 16 (O 22) 株24 h 肉汤培养物0. 1 mL (含菌量约1. 0×107 CFU )。各组隔离饲养在温室中, 常规饲喂不含抗生素饲料, 每4 h 观察一次, 记录发病及死亡情况。
2. 3　NDV clone230 株与大肠杆菌配合感染取100 只8 日龄艾维茵肉仔鸡, 随机分为5 组, 编号6～ 10 组, 20 羽?组, 对6～ 9 组每羽滴鼻点眼5×106
E ID50 NDV clone230 株, 24 h 后8～ 9 组每羽口服1. 5×107 E ID50NDV clone230 株, 48 h 后对7、9、10 组每羽滴鼻接种大肠杆菌SH2436 株(O 89 ) 24 h 肉汤培养物0. 1 mL (含菌量1. 0×107 CFU )。各组按1～ 5 组方法饲养并观察。
2. 4　细菌回收试验
将病死鸡及时进行剖检, 无菌法取肝脏或心血接种麦康凯平板, 置37 ℃培养24 h, 分离大肠杆菌, 并对回收到的细菌进行血清学鉴定。存活鸡在攻毒后10 d 扑杀, 观察病变并进行大肠杆菌的分离鉴定。
3　结果
3. 1　NDV clone230 和IBV H120 株E ID50测定NDV clone230 株对10 日龄鸡胚的半数感染量E ID50为1. 0×10- 8. 7, IBV H120 株对10 日龄鸡胚的半数感染量E ID50为1. 0×10- 8. 1。
3. 2　IBVH120株与大肠杆菌配合感染情况IBVH120株与大肠杆菌配合感染情况, 结果见表1。
　　由表1 表明, E. col iQ 16 (O 22) 株单独接种组, 肉鸡死亡率为25% , IBVH120 滴鼻点眼后接种大肠杆菌组死亡率为40% , IBVH120 滴鼻点眼并口服后攻毒组死亡率为60%。
3. 3　NDV clone230 株与大肠杆菌SH2436 株配合感染情况
NDV clone230 株与大肠杆菌SH2436 株配合感染情况, 结果见表2。
表2 表明, E. col i SH2436 (O 89 ) 株单独接种组死亡率为20% ,NDV clone230 滴鼻点眼后接种大肠杆菌组死亡率为50% , clone230 滴鼻点眼并口服组死亡率为75%。
4　讨论
4. 1　试验结果表明,NDV clone230 和IBVH120 与肉鸡源大肠杆菌间有不同程度的协同致病作用。NDVclone230 和IBVH120 疫苗株在重复接种后, 大肠杆菌发病死亡率有大幅度上升, 这一结果提示我们,NDV 和?或IBV 弱毒疫苗接种, 确实能诱发肉仔鸡的大肠杆菌病。重复接种或大剂量接种NDV 和IBV 弱毒苗时, 肉鸡大肠杆菌病的发生有上升趋势, 这与生产中肉仔鸡进行第二次NDV 和IBV 疫苗接种后不久出现大肠杆菌病暴发的现象相吻合。
4. 2　NDV 和IBV 能对易感鸡的呼吸道黏膜造成损伤, 有利于致病性大肠杆菌的侵入[ 427 ]。病理剖检和组织切片观察发现,NDV clone230 株与IBVH120 在接种后48 h, 鸡的气管黏膜和气囊膜有明显的炎性渗出, 气管黏膜纤毛和上皮细胞部分脱落, 从气管和肺脏可分离到所接种毒, 但分离不到细菌。表1　IBVH120 与E. col iQ 216 配合感染各组的发病情况
Table 1　Results of IBVH120 w ith E. coliQ 216 united infection
组别
Group
接毒量(E ID50)
Do se of challenge
接菌量(CFU )
Do se of challenge
接种数(只)
Ch icken No.
死亡数(只)
Death No.
死亡率(% )
Death rate
H120 5. 0×106 — 20 0 0
H120 2. 0×107 — 20 0 0
H120+ E. co li 5. 0×106 1. 0×107 20 8 40
H120+ E. co li 2. 0×107 1. 0×107 20 12 60
E. co li — 1. 0×107 20 5 25
表2　NDV clone230 与E. coli SH2436 (O 89) 配合感染各组的发病情况
Table 2　Result of NDV clone230 w ith E. coli SH2436 (O 89) united infection
组别
Group
接毒量(E ID50)
Do se of challenge
接菌量(CFU )
Do se of change
接种数(只)
Ch ichen No.
死亡数(只)
Death No.
死亡率(% )
Death rate
Clone230 5. 0×106 — 20 0 0
Clone230 2. 0×107 — 20 1 5
Clone230+ E. coli 5. 0×106 1. 0×107 20 10 50
Clone230+ E. coli 2. 0×107 1. 0×107 20 15 75
E. coli — 1. 0×107 20 4 20
　　NDV clone230、IBVH120 与E. col i 联合接种组以及E. col i 单独感染组在E. col i 接种后48 h 内死亡鸡较多, 且呈明显的败血症变化; E. col i 接种72 h 后死亡鸡有典型的大肠杆菌病变: 如纤维性肝周炎、心包炎、气囊混浊、气管黏膜有出血性炎症, 肠道严重出血等。从败血症死亡鸡中均能分离到相应病毒和大肠杆菌。
4. 3　经NDV clone230 株重复接种鸡, 在没有接种致病性E. col i 时有4 只鸡发病, 1 只死亡, 并从其中分离到与攻毒菌不同的致病性大肠杆菌血清型O 1, 进一步证实了新城疫弱毒苗免疫后, 可诱发肉鸡大肠杆菌病的发生。
参考文献:
[ 1 ]　林维庆. 鸡大肠杆菌病[J ]. 中国兽医杂志, 1991, 17 (6) : 49251.
[ 2 ]　Calnek B W. 禽病学(第9 版) [M ]. 高福等, 译北京: 北京农业大学
出版社, 1991: 1262132.
[ 3 ]　Gom is SM , W atts T, R iddell C, et al. Experimental rep roduction
of Escherich ia co li cellulitis and sep tcem ia in bro iler ch ickens [J ].
A vian D isease, 1997, 41: 2342240.
[ 4 ]　中村菊保. 鸡大肠杆菌病发病机制[J ]. 国外兽医学- 畜禽传染病,
1993, 14 (2) : 426.
[ 5 ]　L ertner G, Heller E D. Co lonization of Escherish ia co li in young
turkeys and ch ickens[J ]. A vian D iseases, 1992, 36 (2) : 2112220.
[ 6 ]　王进友. 肉鸡败血性霉形体与大肠杆菌混合感染的防治[J ]. 中国兽
医杂志, 1996, 22 (9) : 19220.
[ 7 ]　N akamura K, N arita M , Imai K, et al. The effect of m ixed live
vaccines of N ewcastle disease and infectious bronch itis on the
ch icken resp irato ry tract [ J ]. V eterinary Bulletin, 1993, 63 ( 9 ) :
6192.