由于抗生素类药物的大量应用,耐药性菌株不断产生,为疾病的防治带来了困难;同时,畜产品中药残问题严重影响了我国肉鸡产品的出口、危害人类健康。而中药具有安全、低毒、低残留、不易产生抗药性等优点。因此为提高机体的免疫力和饲料转化率,减少养禽业对抗菌药物的过分依赖,降低药物残留,满足消费者对优质畜产品的需求,开展对中药的开发与利用,具有重要的意义。?
1 材料与方法
1.1 材料?
1.1.1 实验动物 1日龄艾维茵肉用雏鸡120只。 泰安市泰伟种鸡厂提供。?
1.1.2 药物 NDⅣ系疫苗,齐鲁动物保健品厂生产(批号:210212);中药添加剂组(中药制剂):由黄芪、党参、茯苓、甘草、山楂、麦芽、神曲组成。由山东农业大学中兽医教研室提供,经水煎、过滤、浓缩成?1∶?1的水煎液;对照组1(US添加剂):美国某公司生产;对照组2(中药对照组):由黄芪、淫羊藿和板蓝根组成,选自《中国兽药典》。
1.1.3 ND红细胞凝集抗原 由山东农业大学动物科技学院预防医学系提供。?
1.1.4 血细胞自动分析仪F820 日本希森美康株式会社生产。?
1.2 方法?
1.2.1 分组及投药 将120只1日龄肉鸡随机分为4组,每组30只。中药添加剂组、对照组1和对照组2从第2天开始投药,分别按饲料量1%添加药物。空白对照组不添加任何药物,按常规方法饲养。?
1.2.2 检测指标
(1)ND抗体水平:分别于7、21日龄用NDVⅣ系免疫,在19、28、35日龄时检测ND抗体水平。
(2)免疫器官指数测定:饲养至45日龄时扑杀所有鸡只,采集脾脏、法氏囊,用滤纸吸取表面的水分后,用精密天平称重,根据与体重之比计算脾脏、法氏囊的器官指数。
(3)血细胞测定:45日龄时翅静脉采血, 每只鸡准确吸取鲜血20 μl, 置于稀释液中混匀,用血细胞分类计数仪进行检测。
(4)体重:分别于1、7、14、21、28、35、45日龄称重,观察各阶段鸡体重增长情况。?
1.2.3 统计方法 采用SPASS软件进行数据处理。?
2 结果?
2.1 免疫效果?
2.1.1 各试验组ND疫苗免疫后HI抗体效价 见表1。
表1 不同日龄血清ND抗体效价的变化(n log2)
日龄 中药组 对照组1 对照组2 空白对照组
19 3.170±0.252 3.500±0.200 2.600±0.100 3.000±0.200
28 8.300±0.252 6.900±0.300 7.300±0.300 7.200±0.300
35 7.600±0.250 8.500±0.200 8.000±0.300 7.600±0.200
由表1可知,在二免前4组抗体水平相差不大,但是在二免疫后中药添加剂组抗体水平明显高于3个对照组,差异极显著(P<0.01)。表明该中药制剂能增强免疫效果,使抗体水平能够迅速提高。?
2.1.2 免疫器官指数 见表2。?
由表2可知,中药添加剂组法氏囊指数明显高于对照组2和空白对照组,差异显著(P<0.05),而与对照组1差异不显著(P>0.05)。脾脏指数均高于3个对照组,差异极显著(P<0.01)。?
2.1.3 血细胞计数 见表3。?
由表3可知,中药添加剂组的WBC+RBC水平与3个对照组相比,差异极显著(P<0.01)。对照组1与对照组2和空白对照组相比,差异极显著(P<0.01)。中药添加剂组的血液中HGB水平与3个对照组相比有显著差异(P<0.05)。其WCH水平与对照组1和空白对照组相比差异显著(P<0.05),与对照组2没有显著差异(P>0.05)。?
2.2 对肉鸡增重的影响?
2.2.1 实验鸡体重的变化 见表4。?
由表4可知,4个试验组初始重没有显著差异(P>0.05),出栏体重中药添加剂组、对照组1与对照组2均高于空白对照组,差异极显著(P<0.01)。平均日增重4个组之间没有显著差异(P>0.05)。
表2 各试验组法氏囊指数和脾脏指数
中药组 对照组1 对照组2 空白对照组
法氏囊(mg/g) 1.012±0.012 0.996±0.100 0.748±0.100 0.797±0.047
脾(mg/g) 1.517±0.027 1.230±0.030 1.378±0.078 1.363±0.033
注:法氏囊指数=法氏囊重(mg)/体重(g);脾脏指数=脾脏重(mg)/体重(g)
表3 各试验组血细胞分类计数结果
中药组 对照组1 对照组2 空白对照组
WBC+RBC(×1012/Q) 7.29±1.00 6.68±1.80 5.88±2.00 5.96±2.00
HGB(g/Q) 103.30±2.85 91.60±1.60 97.00±4.00 96.50±6.50
WCH(pg) 4.26±0.26 3.57±0.17 4.10±0.20 3.68±0.20
表4 各试验组体重增长情况(g)
中药组 对照组1 对照组2 空白对照组
4日龄 56.00±3.00 55.00±2.00 57.00±3.00 56.80±1.42
45日龄 1845.00±5.00 1827.00±17.00 1832.00±12.00 1704.00±4.00
平均日增重 40.00±3.00 39.00±3.00 39.33±4.51 36.00±6.00
2.2.2 料肉比 见表5。
表5 各试验组料肉比
中药组 对照组1 对照组2 空白对照组
料肉比 2.28±0.07 2.30±0.08 2.29±0.06 2.47±0.07
由表5可知,中药添加剂组、对照组1和对照组2料肉比明显低于空白对照组,差异显著(P<0.05)。而该3组之间没有显著差异(P>0.05)。
2.3 发病情况 15日龄时,空白对照组死亡1只,体重80 g。对照组2死亡1只,体重120 g。剖检均为典型的大肠杆菌引起的心包炎、肝周炎。其他鸡群生长良好,未见异常。?
3 讨论与分析
3.1 该中药方剂由黄芪、党参、山楂、麦芽等组成。其中黄芪补气健脾为主药,具有免疫增强作用。已有试验证明,黄芪多糖可增强红细胞免疫功能、显著提高雏鸡T淋巴细胞转化率,加速免疫器官发育完善,还能显著增强雏鸡外周血中NK细胞活性,具有免疫促进作用。近年来研究发现,红细胞不仅运送氧气和二氧化碳,同时也具有重要的免疫功能。它具有识别、黏附、浓缩、杀伤抗原、清除免疫复合物的能力,参与机体免疫调控。而白细胞在对病原体的吞噬方面和免疫过程中起着重要的作用。本试验中,在血细胞分类记数时,由于鸡的红细胞有核,因此WBC和RBC计数在一起。结果表明,细胞总数比空白对照组高1.33×1012/Q,说明红细胞与白细胞数量明显增多。参与机体免疫调控的细胞数量增多,有利于提高机体免疫力和清除体内的病原微生物。说明该中药制剂对于肉鸡的细胞免疫具有增强作用。?
3.2 据报道,法氏囊、脾脏、胸腺的重量可用来评价雏鸡的免疫状况。法氏囊是禽类重要的中枢免疫器官,是诱导淋巴干细胞成为免疫活性细胞,并将其输送给外周免疫器官的场所。来自于骨髓的多能干细胞,经血流进入法氏囊后分化成为B细胞,经淋巴和血液循环移至外周免疫器官的非胸腺依赖区并继续增殖,参与体液免疫。研究证明,如雏鸡法氏囊萎缩则雏鸡不能产生抗体,如果法氏囊发育良好,则有利于抗体水平的提高。脾脏是体内最大的免疫器官,是产生抗体的主要基地。本试验中,中药添加剂组肉鸡的法氏囊指数和脾脏指数均高于其他3个对照组,表明其中枢及外周免疫器官发育正常,参与免疫应答的作用强。在ND疫苗二免7天后抗体水平比对照组高1个滴度,并且所采样品中各个鸡产生抗体水平比较均一。同时WBC和RBC水平也高于对照组,表明该中药添加剂对肉鸡的体液免疫和细胞免疫均有促进作用。?
3.3 本方剂中黄芪补气健脾为主药,辅以山楂和麦芽,助其行气化积、消食、健脾胃之功效,特别适合于禽类消化道较其他动物短的特点。试验结果表明该中药添加剂组平均体重均高于对照组;料肉比明显低于空白对照组。说明本方的确具有明显提高肉鸡饲料利用率、促进增重的效果。?
3.4 中药制剂对于疾病的预防是一个整体水平的提高。本试验中药添加剂组肉鸡未见任何异常,而对照组2和空白对照组有2只鸡死于大肠杆菌,表明其在提高机体抵抗力的同时,对体内的大肠杆菌有明显抑制作用。?