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本试验对免疫鸡血清和卵黄中的AIV抗体水平进行了检测，为AIV的监测提供新的途径,为AIV高免卵黄在生产实践中的应用提供了依据。?

1 材料与方法

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1.1 疫苗及抗原

AI油乳剂灭苗为市售（H9N2），批号020924；AI AGP抗原及标准阳性血清、AI HI 抗原均购自中国农业科学院哈尔滨兽医研究所。

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1.2 实验鸡

未经AI疫苗免疫的120日龄海兰蛋鸡，经AI血清HI及AGP抗体检测均为阴性，隔离饲喂35天后进行免疫试验。

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1.3 免疫接种

将80只实验鸡随机分为2组，每组40只,单笼饲养并编号，第1组免疫接种AI油乳剂灭活疫苗，0.5ml/只；第2组注射生理盐水为对照，0.5ml/只。

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1.4 集蛋及采血

免疫接种后分别于第0、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、31天，在第1组中随机收集鸡蛋10枚，并采集相对应的蛋鸡血液；同时，在第2组中随机收集鸡蛋10枚，采集相应的蛋鸡血液。?

1.5 卵黄抗体的提取

用萃取法提取卵黄抗体。将收集的每枚鸡蛋均弃去蛋清，分别吸取5ml蛋黄，加入5ml生理盐水做1∶1稀释，然后加入等量氯仿萃取30min，3 000 r/min离心5 min，吸出水层用于抗体监测。?

1.6 抗体监测

采用β-微量法分别测定血清及卵黄中的AI HI抗体，并采用10 g/L琼脂板分别测定血清及卵黄中的AI AGP抗体。?

2 结果 ?

图1 免疫后不同时间血清与卵黄中的HI抗体效价(略)

2.1 HI抗体检测

结果见图1。对照组血清与卵黄AIV抗体均为阴性。由图1可见，AI油乳剂灭活疫苗免疫后的第5天，血清中即可测出HI抗体,至免疫后第19天，抗体效价达到高峰值；卵黄中的HI抗体于免疫后第7天可以测出，然后逐渐上升，至免疫后第19～21天达高峰值，且接近血清的HI抗体水平，二者差异不显著（P>0.05）。?

2.2 AGP抗体检测

结果见表1。对照组血清与卵黄AIV抗体均为阴性。

表1 免疫后不同时间血清与卵黄中的AIV AGP抗体检测结果(略)

由表1可见，蛋鸡免疫AI油乳剂灭活疫苗后第5～7天,血清中即可检出AIV抗体；第9天后，抗体阳性检出率达100%(10/10)。卵黄中的AGP抗体可于免疫后的第7～9天检出;第15天时，抗体阳性检出率达100%。AGP抗体的消长规律与HI抗体基本一致。

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